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  • 慢性阻塞性肺疾病合并肺纤维化模型及评价指标研究

    作者:阮金新;王林燕;丁岩;魏芸;张硕峰

    目的:确定慢性阻塞性肺疾病合并肺间质纤维化(PIF-COPD)的动物模型及检测指标。方法:大鼠气管滴入博来霉素(BLM)叠加香烟烟雾刺激构建PIF-COPD动物模型。气管滴入6 mg·kg-1 BLM并香烟烟雾刺激47天,检测肺功能,计算肺指数,HE染色观察肺组织病理形态学改变,天狼星红染色观察胶原I和III变化,用抗体微阵列蛋白质芯片检测血清细胞因子表达谱。结果:呼吸功能检测表明,与对照组相比,模型组大鼠的中心气道阻力、组织阻尼、动态弹性显著升高而动态顺应性显著降低,模型动物肺指数显著增加(P<0.01);病理检测显示:模型动物肺组织表现为炎性浸润,I、III型胶原含量明显升高,出现肺气肿、纤维化病理表现。模型组大鼠血清MMP-8、TIMP-1、IL-10、IL-13、PDGF-AA和Beta-NGF较正常组增加明显,RAGE较正常组减少。结论:大鼠6 mg·kg-1 BLM气管滴入合并香烟烟雾刺激47天,可作为PIF-COPD的动物模型;模型组大鼠呼吸功能的检测、血清MMP-8、TIMP-1、IL-13、PDGF和NGF可作为该模型的评价指标。

    关键词: PIF COPD BLM 呼吸功能
  • BLAP75蛋白与DNA螺旋酶BLM以及拓扑异构酶TopoⅢα的相互作用

    作者:徐畅;陈凤华;杜利清;王彦;曹嘉;吴红英;刘强

    目的 确定BLAP75蛋白与BLM蛋白及TopoⅢα蛋白的相互作用及作用位点.方法 构建一系列携带MBP标记的不同BLAP75载体,通过体外纯化蛋白结合实验检测BLAP75与BLM、TopoⅢα的相互作用位点,并在真核细胞中通过免疫共沉淀方法进行验证;运用RNA干扰(RNAi)技术特异性抑制BLAP75的表达,并利用Western印迹法检测其对BLM和TopoⅢα蛋白表达的影响.结果 BLAP75与BLM和TopoⅢα蛋白的结合位点位于BLAP75的N端区域; BLAP75与BLM的直接相互作用需要DNA的介导;当BLAP75蛋白表达量减少时,BLM和TopoⅢα蛋白量也随之减少.结论 细胞内BLM和TopoⅢα蛋白均结合在BLAP75的氨基端部分;BLAP75对TopoⅢα和BLM的蛋白水平具有重要影响.

  • 博菜霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织不同时间点的动态演变

    作者:吕晓东;庞立健

    目的:观察博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型肺组织不同时问点动态演变过程.方法:采用博莱霉素气管内注入致Wistar大鼠肺纤维化模型,用HE、MASSON染色观察肺组织病理形态不同时间点的演变.结果:随着时间的延长,肺纤维化大鼠肺组织肺泡炎、纤维化、胶原沉积不断加重.结论:博莱霉素致大鼠肺纤维化模型肺组织动态演变具有时相型.

  • 下调DNA解旋酶BLM对膀胱癌细胞化疗药物敏感性的研究

    作者:冯大林;钱小松;封素娟;周晓光;张小东

    目的:探讨下调DNA解旋酶BLM对膀胱癌细胞化疗药物敏感性的影响.方法:采用脂质体转染技术将BLM-siRNA转染入膀胱癌细胞株RT112、5637和J82中,利用RT-qPCR和Westernblot方法检测BLM的mRNA和蛋白表达情况,借助CCK-8法检测吡柔比星和顺铂对膀胱癌细胞的半数抑制率浓度及化疗药敏感性.结果:吡柔比星和顺铂作用于三种膀胱癌细胞株,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,三种膀胱癌细胞株的增殖逐渐降低.与对照组比较,下调膀胱癌细胞内BLM后,BLM的mRNA和蛋白表达均明显降低,且在吡柔比星和顺铂作用下细胞增殖较对照组也明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:下调BLM可增加人膀胱癌细胞对化疗药物的敏感性.

  • BLM基因的研究进展

    作者:张永娟;沈佐君

    BLM是RecQ DNA解螺旋酶家族成员之一. RecQ DNA解螺旋酶家族在抑制人类肿瘤发生及早衰方面发挥着重要作用.本文介绍了BLM基因的结构与生物学特性,并在此基础上对BLM基因突变及其蛋白表达作一综述.

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