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白头翁属药用植物及药材鉴别研究
目的:本研究对白头翁、朝鲜白头翁、兴安白头翁3种药用植物及药材进行了形态分类和ITS2序列分子鉴别研究,为建立其分子鉴定方法提供有力依据.方法:通过对长白山区白头翁属3种药用植物进行野外实地考察采样,形态分类描述及提取样品总DNA,扩增ITS2序列、双向测序.所得序列经CodonCode Aligner拼接、比对,采用MEGA 6.0软件对样品进行变异位点分析、计算种内和种间遗传距离(K2P)并构建邻接树(NJ).结果:形态鉴别容易区分白头翁与朝鲜白头翁和兴安白头翁,但朝鲜白头翁和兴安白头翁不易区分,ITS2序列片段长度均为219 bp,3种药用植物的药材ITS2序列与其基原植物序列一致,种间变异位点有6个,遗传距离显示物种种内大K2P距离远远小于种间小K2P距离,NJ树结果显示,白头翁、朝鲜白头翁、兴安白头翁均可明显区分.结论:ITS2序列能够准确鉴定白头翁属3种药用植物的药材和基原植物,可作为形态鉴别的有力补充.
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白头翁属药用植物的HPLC指纹特征与化学分类研究
目的:建立白头翁属5种药用植物皂苷类成分的HPLC指纹特征图谱,为这5种药用植物的鉴定及亲缘关系评价提供依据.方法:采用HPLC测定白头翁属药用植物的指纹图谱,依据获得的色谱数据对各样品进行分析与鉴定.结果:建立了白头翁属5种药用植物中皂苷类成分的HPLC指纹图谱,这5种药用植物均显示了其共性和各自的指纹特征;确立10个色谱峰为共有峰.运用系统聚类将14份样品聚成4类:第Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ类分别为朝鲜白头翁,蒙古白头翁和白头翁;第Ⅲ类由兴安白头翁、细叶白头翁组成.朝鲜白头翁与兴安白头翁,蒙古白头翁与细叶白头翁之间的化学亲缘关系较远.结论:聚类结果与传统分类结果有较好的一致性.HPLC化学图谱可用于白头翁属植物的分类和鉴别研究,并为白头翁属植物指纹图谱研究和质量控制提供重要参考.
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白头翁属植物三萜皂苷及生物活性研究进展
目的 对毛茛科白头翁属(Pulsatilla)植物中三萜皂苷及生物活性作一综述.方法 以近期国内外的30篇文献为依据,按皂苷的化学结构、结构解析与NMR特征、生物活性进行综述.结果 白头翁属植物含有的主要化学成分为齐墩果酸型及羽扇豆烷型三萜皂苷,其生物活性主要有抗炎、抗菌、抗肿瘤、增强认知能力及神经细胞保护等作用.结论 为白头翁属植物的进一步研究提供依据.
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变黑白头翁提取物降低亚砷酸盐对小鼠精细胞的毒性
目的:研究变黑白头翁提取物降低亚砷酸盐对小鼠精细胞毒性的作用.方法:给予实验小鼠亚砷酸钠(20 mg/kg每日),并分别在第30、60、90天对小鼠进行检测.亚砷酸盐中毒小鼠被分为2组,其中一组给予变黑白头翁提取物(35 mg/kg),另一组给予85％乙醇.通过检测小鼠精细胞凋亡标志蛋白CYP1A1、p53及caspase 3的活性,确定细胞及DNA的损伤情况,并测定睾丸毒性标志物的水平.通过圆二色光谱仪及熔化温度数据检测变黑白头翁提取物与DNA的相互作用情况.结果:亚砷酸盐中毒小鼠的所有细胞凋亡标志蛋白及睾丸毒性标志物的水平均有所上升,而经变黑白头翁提取物治疗的小鼠上述各项指标均降低或恢复至正常水平.变黑白头翁提取物与DNA相互作用,引起了DNA结构和构象的变化.结论:变黑白头翁提取物可作为砷中毒引起的生殖功能损害的治疗药物给予研究和开发.
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白头翁属药用植物的ITS序列分子鉴定研究
目的 通过测定并对比白头翁、兴安白头翁、朝鲜白头翁和细叶白头翁4种白头翁属植物的Internal Transcribed Spacer (ITS)序列,为白头翁属植物的分子鉴定和遗传多样性研究提供依据.方法 提取4种白头翁属植物的DNA,扩增ITS序列并克隆测序.利用Clustal X、DNAMAN、MEGA 5等软件分析白头翁属植物的ITS序列特征.结果 建立了4种白头翁植物ITS全序列数据库,包括14个变异位点和4个信息位点.细叶白头翁与朝鲜白头翁之间的遗传距离小,与兴安白头翁遗传距离大.结论 4种白头翁属药用植物的ITS序列可为其分子鉴定和遗传多样性研究提供依据.
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基于ITS2序列白头翁属原植物及药材的DNA条形码鉴定研究
目的:利用内转录间隔区2 (intemal transcribed spacer 2,ITS2)序列对白头翁属基原植物、药材进行DNA分子鉴定,为白头翁属植物的种类鉴定和遗传多样性研究提供理论依据.方法:提取白头翁属植物的DNA,对其ITS2序列进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增与测序,且从GenBank下载上述所属植物的ITS2序列.所有序列经DNAMAN软件拼接,采用MEGA 6.0软件比对分析以及计算相关数据,基于K2P模型构建Neighbor-Joining(NJ)系统发育树.从ITS2数据库中下载序列的ITS2二级结构信息,比较各样本间ITS2序列二级结构的差异.结果:从NJ系统发育树分析看出,所有样本被聚为3大支.白头翁属植物自成1支,银莲花属植物为1支,獐耳细辛属植物为1支,白头翁属基原植物、药材的ITS2序列完全一致,并与其他混淆药材及植物明显区分.结论:ITS2序列可对白头翁药材、原植物进行鉴别,且在近缘物种鉴定方面具有较大应用价值,可用于白头翁属植物种类的分子鉴定.
