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糖尿病肾病不同中医辨证分型患者中CDKN2A,CDKN2B,IGF2BP2和CDKAL1基因表达研究
时指出基因研究对于中医中药的临床诊断和治疗具有深远的意义.
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长链非编码CDKN2B调控miR-19对慢性髓细胞白血病的影响
目的:探讨长链非编码CDKN2B调控miR-19的表达影响慢性髓细胞白血病细胞的生物学行为的方式及其机制.方法:qPCR检测不同白血病细胞中CDKN2B的表达情况;双荧光素酶报告基因检测CDKN2B与miR-19的相互作用;MTT增殖实验和流式细胞检测CDKN2B对HL-60细胞增殖和凋亡的影响;划痕愈合实验检测沉默CDKN2B后白血病HL-60细胞迁移能力的变化;Transwell侵袭实验检测沉默CDKN2B后白血病HL-60细胞侵袭能力的变化;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测沉默CDKN2B后miR-19对HL-60细胞迁移和侵袭能力的影响;鬼笔环肽染色检测沉默MEG3后细胞骨架微丝微管形态变化;Western blot检测沉默CDKN2B后PI3K/AKT信号通路蛋白的表达情况.结果:在HL-60细胞中CDKN2B表达水平低;CDKN2B能与miR-19的3′UTR特异性结合;过表达CDKN2B可以抑制HL-60细胞增殖能力,促进其凋亡行为;沉默CDKN2B可以增强白血病HL-60细胞侵袭和迁移能力;过表达CDKN2B后细胞骨架表现为伪足减少,运动能力减弱;肌动蛋白表达水平下调;过表达CDKN2B后PI3K/AKT通路蛋白表达情况相应下调.结论:CDKN2B可以靶向调节miR-19调控白血病细胞生物学行为.
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Tal1促进急性T淋巴白血病Jurkat细胞的增殖
目的 探讨Tal1对T-ALL细胞增殖及其机制的影响.方法 用Tal1慢病毒感染T-ALL细胞株Jurkat,建立稳定的Tal1敲降细胞株(Jurkat-siTal1)和Tal1过表达细胞株(Jurkat-T1),及siRNA阴性对照细胞(Jurkat-mock1)和过表达阴性对照细胞(Jurkat-mock2).CCK-8检测细胞生长能力;流式细胞术检测细胞周期;Real-time RT-PCR和Western blot检测周期蛋白依赖性激酶抑制因子2(CDKN2A)、周期蛋白依赖性激酶抑制因子1(CDKN2B)mRNA和蛋白表达.结果 成功建立Jurkat稳定转染细胞株.CCK8结果表明细胞Jurkat-T1与Jurkat-mock2相比,细胞生长更快,而Jurkat-siTal1与Jurkat-mock1相比,细胞生长明显减缓.流式细胞术检测细胞周期发现,Jurkat-siTal1与Jurkat-mock1相比G0/G1期增加,S期减少;而Jurkat-T1与Jurkat-mock2相比,G0/G1期减少,S期增加.Real-time RT-PCR和Western blot结果显示Tal1抑制Jurkat细胞内CDKN2A、CDKN2B的mRNA和蛋白表达.结论Tal1可以促进T淋巴白血病细胞Jurkat增殖;促进Jurkat细胞由G0/G1期向S期转换,其可能通过Tal1抑制G0/G1和S期负调控蛋白CDKN2A、CDKN2B的表达.
