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恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区细胞凋亡的影响
目的:观察恐伤孕鼠对其仔鼠大脑海马区细胞凋亡的影响.方法:采用恐伤孕鼠的方法造模,受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常组、模型组、补肾组,造模时间为整个妊娠期间.仔鼠出生后14天,取其大脑海马区组织用流式细胞术检测其细胞凋亡率;用免疫组化ABC法观察Bcl-2、Bax在大脑海马区的蛋白表达.结果:模型组仔鼠海马区脑组织细胞凋亡率较正常组和补肾组增加(P<0.05).同时,模型组仔鼠海马区脑组织Bcl-2阳性表达数下降、Bax阳性表达数升高,与正常组和补肾组比较均有极显著性差异(P<0.01).结论:恐伤孕鼠通过凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下降、Bax蛋白表达增加共同作用;i起其仔鼠海马区脑细胞凋亡加,从而影响到仔鼠脑的发育,而补肾治疗可逆转此效应.
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胸部撞击致大鼠急性肺损伤凋亡相关基因bcl-2、bax表达改变及意义
目的:探讨bcl-2、bax在胸部撞击致大鼠急性肺损伤(ALI)中的表达改变及其意义.方法:健康雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组和创伤后3h,12h,24h组.采用TUNEL法以及免疫组化技术观察肺组织bcl-2、bax表达及细胞凋亡的变化,观察病理形态.结果:与对照组比较,各创伤组肺组织内细胞凋亡指数增加,并随着病程延长逐渐上升(P＜0.05＝;bax基因表达明显增强,并随着病程延长而逐渐增高(P＜0.01＝;bcl-2基因表达亦明显升高,但随着病程延长呈降低趋势(P＜0.01＝;bcl-2/bax比值降低,该比值也有随着病程延长而逐渐下降的趋势(P＜0.01＝.各创伤组光镜下见肺组织损伤明显.结论:肺组织细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达参与胸部撞击致ALI时的肺损伤,并在其发病机制中起着一定的作用.
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缺氧复氧对平滑肌细胞增殖与凋亡的影响及蝎毒的干预
目的 观察缺氧复氧及在此基础上给予蝎毒后血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的改变及凋亡相关基因bcl-2、bax的变化,探讨缺氧复氧对VSMC的损伤和蝎毒对缺氧复氧VSMC的保护作用及机制.方法 组织贴块法培养VSMC后随机分为6组:对照组、缺氧复氧模型组、模型+蝎毒组,其中蝎毒又分为5、10、20、40 mg/L不同浓度组.MTT测定细胞增殖变化,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法测定bcl-2、bax表达.结果 (1)MTT法测定对照组、模型组A值分别为1.70±0.24、2.23±0.27,二者存在显著性差异(P＜0.05).蝎毒5、20 mg/L组A值分别为1.99±0.28、2.13±0.24,与对照组比较有统计学意义(P＜0.05);10、40 mg/L组A值分别为1.92±0.16、1.89±0.74,与模型组比较有统计学意义(P＜0.05).(2)对照组细胞凋亡率为(26.4±1.4)%,模型组凋亡率为(17.4±0.9)%,两组之间存在显著差异(P＜0.05).蝎毒5、10、40 mg/L组细胞凋亡率分别为(25.6±2.8)%、(33.5±3.5)%、(34.5±5.2)%,与模型组比较均有统计学意义(均P＜0.05);20 mg/L组细胞凋亡率为(20.1±2.4)%,与对照组比较有统计学意义(P＜0.05).(3)与对照组比较,模型组bcl-2与bax蛋白阳性率及bcl-2/bax比值均有显著变化(P＜0.05);蝎毒各浓度组bcl-2/bax比值与模型组比较均降低(P＜0.05).结论 缺氧复氧后VSMC增殖增多,凋亡减少,蝎毒可以抑制缺氧复氧后VSMC的增殖,促进凋亡,并通过凋亡相关基因bcl-2、bax通路,使bcl-2/bax蛋白比值变化而介导细胞凋亡.
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川芎嗪对大鼠脊髓损伤后bcl-2、bax基因表达的影响
目的探讨川芎嗪对脊髓损伤后脊髓组织bcl-2、bax基因表达的影响.方法120只SD大鼠随机分成两组:生理盐水(SAL)组、川芎嗪(TMP)组;采用Allen WD法以10g×2.5cm致伤力损伤T8脊髓,TMP组术后即刻给予川芎嗪[200mg/kg]腹腔注射,SAL组腹腔注射等量生理盐水.采用RT-PCR和免疫组织化学染色(SABC方法)分别检测SCI后基因bcl-2、bax的mRNA水平和蛋白表达变化.结果①bcl-2mRNA和蛋白在脊髓损伤后2h、6h、12h、24h、48h均有表达,随时间的推移逐渐升高,24h达到高峰,后逐渐下降;而TMP组bcl-2mRNA和蛋白各时间点的表达均明显升高,与SAL组相比,各时相点均有非常显著性差异(P＜0.01).②SAL组baxmRNA在SCI后2h、6h、12h、24h、48h均有表达,随时间的推移逐渐升高,24h达到高峰,后逐渐下降;而TMP组baxmRNA各时间点的表达均明显降低,与SAL组相比,伤后6h有显著性意义(P＜0.05),而其余各时相点均有非常显著性差异(P＜0.01).结论TMP可以促进脊髓损伤后bcl-2基因表达和蛋白产物的增加,抑制bax基因的表达和蛋白产物的增加,这可能是TMP对脊髓损伤具有保护作用的分子机制之一.
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氟尿嘧啶缓释制剂抑制人结直肠癌裸鼠皮下种植瘤生长的机制研究
目的 探讨氟尿嘧啶缓释制剂对人结直肠癌裸鼠皮下种植瘤生长的抑制作用,进一步验证氟尿嘧啶缓释制剂是一种有效抑制肿瘤生长,副作用少的新型化疗药.方法 24只裸鼠接种人结直肠癌细胞LOVO细胞株,建立裸鼠皮下种植瘤模型,随机分为PBS对照组、5-FU注射液化疗组和缓释剂植入组,每组8只,记录三组裸鼠肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,比较各组种植瘤生长情况,并HE染色观察各组肿瘤组织病理学改变,免疫组化法检测Bcl-2/Bax蛋白水平表达的变化.结果 裸鼠皮下接种肿瘤细胞7 d后成功致瘤.用药后肿瘤生长曲线及第30天肿瘤体积大小:PBS对照组为(3 240+187) mm3、5-FU注射液化疗组为(1568+86) mm3、缓释剂植入组为(600+38) mm3,三组比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).HE染色:缓释剂植入组相比其他组肿瘤细胞异性型明显,恶性程度明显,腺管状结构不明显,小区肿瘤细胞有凋亡明显,仅有少量坏死,肿瘤组织边界清晰,未见侵袭脂肪及肌层组织.5-FU注射液化(组)、缓释剂植入组Bcl-2蛋白表达均低于PBS对照组,Bax表达均高于PBS对照组；其中5-FU注射液化疗组Bcl-2低于缓释组,Bax高于缓释组.结论 氟尿嘧啶缓释制剂对人结直肠癌裸鼠皮下种植瘤有较好的抑瘤作用,作用机制很可能通过介导下调Bcl-2和上调Bax的表达.
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生化汤水提醇沉液对药流后大鼠子宫蜕膜Bcl-2、Bax影响的研究
目的 研究生化汤水提醇沉液对药流大鼠子宫蜕膜组织中细胞凋亡调控基因Bcl-2与Bax的影响,探讨其治疗药流后阴道出血的作用机理.方法 将50只妊娠SD大鼠随机分成5组,各组均于妊娠第7天采用药物米非司酮配伍米索前列醇造成大鼠流产后出血过多模型,造模成功各组分别灌胃给药5日后处死,用免疫组化方法检测子宫蜕膜Bcl-2、Bax表达情况.结果 缩宫素组、水提醇沉组、水煎剂组与模型组比较均有降低Bcl-2、促进Bax表达的作用(P＜0.05);生化汤水提醇沉液降低Bcl-2、促进Bax表达的作用优于水煎剂组(P＜0.05).两者治疗药流启阴道出血异常的功效有差异.结论 生化汤水提醇沉液治疗药流后阴道出血的作用机理可能是通过降调Bcl-2,促进Bax使残留蜕膜组织变性坏死而排出,从而缩减药流后阴道出血而达到目的 .
