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外环境中脊髓灰质炎病毒分离的实验研究
建立一种简便、实用的检测大量水样中的微量脊髓灰质炎病毒的方法.这种方法是将L20B细胞加入大量的含微量脊髓灰质炎病毒的水中,充分作用后收集细胞,作病毒分离培养.同时以NaCl-AlCl3沉淀法作对照.结果表明,1000ml水样中含病毒100、10TCD50时能全部检出;当含1~2TCD50时14份样本可检出13份.NaCl-AlCl3沉淀法在100TCD50时4份样本中仅检出1份,其它各浓度的4份样都未能检出.
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三种细胞在脊髓灰质炎病毒检测中的应用比较
为了比较在常规应用条件下L20B细胞与RD、Hep-2细胞对脊髓灰质炎(脊灰)病毒(PV)的敏感性和选择性,同时用3种细胞检测急性弛缓性麻痹(AFP)病例412份粪便标本,进行PV分离鉴定及效价测定.结果表明,L20B细胞对PV更敏感,对PV有完全的选择性和良好的特异性,对同时混有非脊灰肠道病毒(NPEV)和PV的粪便标本,L20B细胞能更快地检测出PV,而RD、Hep-2细胞被NPEV的生长所掩盖.L20B细胞的PV检出率(5.34%)高于RD(4.61%)、Hep-2细胞(2.67%).L20B、RD、Hep-2细胞对PV的敏感性分别为88%、76%、44%,但3种细胞对PV都出现了不同程度的漏检.从25株PV效价滴定结果分析,3种细胞对PV的滴度均为L20B、RD细胞高于Hep-2细胞.表明L20B细胞能简化粪便标本PV检测过程.它的应用对PV分离不失为一种便捷、省时、省力、经济和可靠的方法.
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水样中脊髓灰质炎病毒检测方法的实验研究
目的:探索灵敏、简便、实用的检测水样中微量脊髓灰质炎病毒(脊灰病毒)的方法.方法:将L20B细胞加入含微量脊灰病毒的水样中,充分作用后收集细胞,作病毒分离培养,并以NaCl-AlCl3沉淀法作对照.结果:应用活的L20B细胞时,1 000 ml水样中含病毒100TCID50、10TCID50时能全部检出;当含1~2TCID50时14份样本可检出13份.NaCl-AlCl3沉淀法在100TCID50时4份样本中仅检出1 份,其他各浓度的4份样未能检出;应用固相化的L20B细胞处理污水时,2~3×106个细胞,甲醛固定4 h和48 h以上的细胞吸附的病毒量,均值都是18.1TCID50,用细胞吸附浓集法,在40份自然水样中,10份检出脊灰病毒,而NaCl-AlCl3沉淀法未能检出脊灰病毒.结论:应用活细胞吸附时敏感度达到1~2TCID50/1 000ml;应用甲醛固定的细胞吸附污水中病毒时敏感度可达到10 TCID50/1 000ml.
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L20B细胞吸附法用于环境水中病毒的分离培养
目的:建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法.方法:细胞吸附浓集法:将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后,加入适量的L20B细胞,混匀,充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒,然后收集细胞培养、分离病毒.同时用AlCl3-NaCl沉淀法浓集病毒,接种L20B细胞分离病毒,作为对照.结果:40份水样,用L20B细胞吸附法检出10株脊髓灰质炎病毒,用AlCl3-NaCl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒.结论:新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测,且检测的敏感性明显高于AlCl3-NaCl沉淀法.
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细胞吸附浓集法分离外环境水中脊髓灰质炎病毒
[目的]建立一种用于检测外环境水中脊髓灰质炎病毒的方法.[方法]细胞吸附浓集法:将自然沉清的水样抗菌、等渗处理后,加入适量的L20B细胞,混匀,充分吸收水中的脊髓灰质炎病毒,然后收集细胞培养、分离病毒.同时用AlCl3-NaCl沉淀法浓集病毒,接种L20B细胞分离病毒,作为对照.[结果]40份水样,用L20B细胞吸附法检出10株脊髓灰质炎病毒,用AlCl3-NaCl沉淀法未检出脊髓灰质炎病毒.[结论]新建立的细胞吸附浓集法可用于外环境水中的脊髓灰质炎病毒的检测,且检测的敏感性明显高于AlCl3-NaCl沉淀法.
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外环境中脊髓灰质炎病毒分离的实验研究
[目的]建立一种简便、实用的检测大量水样中的微量脊髓灰质炎病毒的方法.[方法]将L20B细胞加入大量的含微量脊髓灰质炎病毒的水中,充分作用后收集细胞,作病毒分离培养.同时以NaCl-AlCl3沉淀法作对照.[结果]1000ml水样中含病毒100、10TCD50时能全部检出:当含1~2TCD50时14份样本可检出13份.NaCl-AlCl3沉淀法在100TCD50时4份样本中仅检出1份,其它各浓度的4份样都未能检出.
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固相化细胞吸附浓集法分离污水中脊髓灰质炎病毒的实验研究
[目的]建立一个适用于污水中脊髓灰质炎病毒分离培养的方法.[方法]采用固相化的L20B细胞吸附法,浓集污水中的脊髓灰质炎病毒,将浓集物再用活的L20B细胞培养.[结果]能够检出1000ml水中的0.1~10TCID50量的脊髓灰质炎病毒,在1000ml预处理后的污水中加入10TCID50量的病毒,亦可以检出.[结论]本方法的有效检出限为10TCID50/1000ml,可用于污水中的脊髓灰质炎病毒的浓集和分离培养.
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RD、Hep-2、L20B细胞用于脊髓灰质炎病毒学监测的实验研究
目的:观察RD、Hep-2和L20B用于脊髓灰质炎病毒学常规监测的实验结果,提高脊髓灰质炎病毒的检出率.方法:对RD、Hep-2和L20B用于脊髓灰质炎病毒监测进行了实验研究.用细胞培养法进行病毒分离.结果:L20B细胞对脊髓灰质炎病毒具有较强的敏感性和特异性,但非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)在RD细胞上呈选择性增值,可能会造成NPEV检出率下降.结论:RD、Hep-2和L20B细胞可用于脊髓灰质炎病毒学常规监测.
关键词: Rd Hep-2 L20B细胞 脊髓灰质炎病毒 非脊髓灰质炎肠道病毒