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杭州地区临床和环境分离副溶血弧菌菌株携带毒力基因的特征
目的了解杭州地区临床和环境分离副溶血弧菌菌株的毒力基因特征.方法对近年从食物中毒病人、临床散发病人和外环境(小水产品)中分离的174株副溶血弧菌菌株,应用PCR技术进行耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关基因(trh)的检测.结果临床来源的副溶血弧菌(94株来自食物中毒病人和34株来自散发腹泻病人)菌株的tdh携带率均大于97%,trh携带率为0%;而所有46株分离自环境(小水产品)的副溶血弧菌菌株未见有tdh携带,仅1株trh阳性.1株tdh阴性、trh阳性的副溶血菌株,其尿素酶试验为阳性,而在其他所有trh阴性的副溶血菌株中,不管其tdh是阳性或是阴性,尿素酶试验均为阴性.结论引起杭州地区食物中毒及散发腹泻的副溶血弧菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,外环境中存在的trh阳性的副溶血弧菌也是一个潜在的病原.
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一起副溶血性弧菌食物中毒的病原学分析及分子分型溯源研究
目的 对1起食物中毒事件分离的副溶血性弧菌进行病原学检测及分子分型溯源研究.方法 按照《食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》GB 4789.7-2013对事件中病例的粪便/肛拭子、可疑食物等10份样本进行副溶血性弧菌的分离和鉴定.利用荧光PCR对分离出的副溶血性弧菌特异的ToxR基因进行检测,并采用多重荧光PCR对其进行不耐热性溶血毒素(tlh)、耐热直接溶血素(tdh)毒力基因和耐热相关溶血素(trh)毒力基因进行检测;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行电泳获得指纹图谱,并经BioNumerics软件对其进行聚类分析.结果 从4例病例的粪便/肛拭子和2份可疑食物样本中共分离出6株副溶血性弧菌,含5种血清型,分别为O1∶KUT、O1∶KUT、O3∶K6、O4∶KUT、OUT∶ KⅢ、O3∶KUT.6株副溶血性弧菌均扩增出副溶血性弧菌特异的ToxR基因.所有菌株tlh基因均为阳性,分离自病例的粪便/肛拭子的4株菌株tdh毒力基因均为阳性;分离自可疑食物的2株菌株中有1株为tdh毒力基因阳性,另1株为阴性;所有分离菌株trh毒力基因均为阴性.聚类分析显示,菌株间相似系数为62.3％～100.0％.分离自可疑食物的菌株与病例的菌株带型不一致,为不同菌株,分离自病例的同一血清型的菌株同源,不同血清型为不同克隆.结论 这是1起由携带tdh毒力基因的O1、03、04等多种血清型的不同克隆副溶血性弧菌混合感染引起的食物中毒事件.
