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两种剂型二氧化氯对微生物消毒作用的比较
用悬液法测定了 2种剂型稳定性二氧化氯对HBsAg抗原性破坏作用和对大肠杆菌噬菌休f2灭活效果。结果，用非吸附刑固体剂型制成的600mg/L二氧化氯溶液作用60 min，能破坏HBsAg抗原性，液休剂型者则需900mg/L二氧化氯作用60 min。用该固体剂型所制3.0 mg/L二氧化氯溶液作用5min，对大肠杆菌噬菌休f2灭活率达100％，而液体剂型者需3.0 mg/L二氧化氯作用7 min。
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抗阿尔茨海默病Aβ人源单链抗体基因的筛选和表达
目的 从人源噬菌体单链抗体库中筛选与阿尔茨海默病发病中起关键作用的β淀粉样多肽(Aβ)1-42特异性结合的单链可变区抗体(scFv)基因,利用原核生物大肠杆菌进行可溶性表达,以获得抗AB1-42人源抗体.方法 利用噬菌体展示技术对人源噬菌体单链抗体库进行多轮富集,以Aβ1-42为抗原经酶联免疫吸附(ELISA)检测,筛选与Aβ1-42特异性结合的阳性噬菌体克隆,再用阳性噬菌体感染E.coli HB2151进行可溶性表达,经SDS-PAGE、Western blot及ELISA法检测scFv单抗的可溶性表达水平及抗原结合活性.并对阳性scFv抗体基因进行基因测序鉴定.结果 获得了7个特异性的抗Aβ1-42 scFv阳性噬菌体克隆,其中4个克隆ELISA检测吸光度值(A值)高于阴性对照5倍以上;其中1株(A 10)获得可溶性单链抗体的成功表达,表达产物主要位于菌体中,ELISA效价显示在全菌蛋白中A值高于对照5倍以上.其相对分子质量约为33 000.DNA测序表明所获抗体的可变区基因属于scFv抗体基因,推导得到的氨基酸序列具有典型的抗体可变区结构.结论 用人源噬菌体单链抗体库筛选出抗Aβ1-42的人源抗体单链可变区基因,并成功表达了具有抗原结合活性的可溶性单链抗体,为进一步研究阿尔茨海默病的发病机制和治疗奠定了基础.
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儿童泌尿系感染的病原学分析
目的:了解近 3年来广州市儿童医院泌尿系统感染患儿的病原菌分布及耐药性,为正确诊断和治疗提供实验室依据.方法:取中段晨尿进行病原菌分离培养,采用 API鉴定系统鉴定细菌 ,并用 Kirby-Bauer纸片扩散法做药敏试验,对大肠埃希氏菌和克雷伯菌进行 ESBLs的检测;分析病原菌的分布及耐药情况.结果: 279株病原菌中,革兰氏阳性球菌 68株,占 24.4%;革兰氏阴性杆菌 211株,占 75.6%,其中大肠埃希氏菌 102株,占 36.6%.葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、红霉素的耐药率均高于 75%,耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)发生率达 68%,对万古霉素、替考拉宁敏感;肠杆菌科细菌对氨基糖苷类、喹诺酮类及第 3代头孢菌素有不同程度的耐药, ESBLs产生率为 11.5%,对亚胺培南敏感;非发酵菌对头孢菌素耐药率较高(高于 30%)而对氨基糖苷类、喹诺酮类耐药率较低(低于 20%).结论:儿童泌尿系感染以革兰氏阴性杆菌为主,大肠埃希氏菌是首位病原菌;革兰氏阳性球菌的感染有上升的倾向;病原菌对常用抗生素耐药率高且有逐渐加剧的趋势,多重耐药株大量出现.泌尿系感染宜根据不同病原菌参照体外药敏试验结果选用敏感抗生素治疗 ,合理用药是抗感染治疗及控制细菌耐药性产生和蔓延的有力措施.
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铜银离子协同氯化消毒对脊灰病毒核酸的破坏作用
目的探讨铜银离子协同氯化消毒对病毒核酸的破坏作用. 方法铜银离子协同氯化消毒（40 μg*L-1 银离子，400 μg*L-1铜离子和0.3 mg*L-1游离氯）前后用逆转录PCR的方法检测协同消毒前后脊灰病毒的核酸，并用免疫印记法（DIBA）检测脊灰病毒的抗原性（蛋白质）；用核酸修复实验测定噬菌体f2的核酸修复率，并用血清学方法检测噬菌体f2的抗原性. 结果 RT-PCR检测显示铜银离子协同氯化消毒前脊髓灰质炎病毒Ⅰ型(PVI)的特异条带为阳性，协同消毒后的为阴性；DIBA检测显示协同消毒前后的结果均为阳性. 铜银离子协同氯化消毒灭活作用后，大肠杆菌噬菌体f2的核酸修复率随作用时间延长而降低；噬菌体的抗原性与正常无明显差别. 结论结果提示铜银离子协同氯化消毒灭活水中病毒的作用位点可能在病毒的核酸.
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龋齿DNA疫苗(PGJAP)中污染大肠杆菌噬菌体的检测方法的建立
龋齿DNA疫苗工程菌采用的大肠杆菌DH-5α在生产过程中极易污染大肠杆菌噬菌体,所以应对原始菌种、主菌种和工作菌种及大量生产时的发酵液作大肠杆菌噬菌体检测. 用大肠杆菌噬菌体VCSM13为标准噬菌体株,对大肠杆菌C3000和DH-5α分别作噬菌斑检测和pfu值计算,验证并确定以VCSM13作为标准噬菌体株,C3000作为检测菌株,对龋齿DNA疫苗原始菌种、主菌种(第一代)、工作菌种(2007001)和其发酵液(200703)分别作噬菌体检测,并建立了检测大肠杆菌噬菌体的直接噬菌斑法.结果显示VCSM13在DH-5α的噬菌斑计数为76,pfu/ml为7.6×1013,C3000的噬菌斑计数为81,pfu/ml为8.1×1013,龋齿DNA疫苗的原始菌种、主菌种、工作菌种和发酵液,噬菌斑计数全部为0.Pfu也为0.阳性对照为74,pfu/ml是7.4×1013,阴性对照为0. 通过对阳性对照样本作增殖法试验及挑斑接种验证后,证明此法操作简单,灵敏度高.
