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体外培养对小鼠植入前胚胎DNA甲基转移酶表达模式影响的研究
目的 研究小鼠植入前胚胎DNA甲基转移酶(Dnmt)1和3b的表达模式及体外培养对其表达的影响.方法 应用荧光免疫细胞化学法检测在体内和体外培养的小鼠植入前胚胎Dnmt1、Dnmt3b的表达.结果 Dnmt1、Dnmt3b在体内组2、4、8细胞胚胎和桑椹胚的胞浆内均呈高表达,在囊胚期则为胞浆内低表达,而核内均无明显表达;Dnmt1、Dnmt3b在体外组囊胚期前胚胎的表达模式均与体内组相似,为胞浆内高表达,而囊胚期则为胞核内低表达.结论 体外培养改变了小鼠囊胚期Dnmt1、Dnmt3b的表达模式,影响基因的表达水平和表达模式.
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左归丸抵抗高糖抑制植入前胚胎发育的研究
目的:观察滋阴补肾方左归丸对受高糖抑制的小鼠植入前胚胎的影响.方法:体外培养小鼠胚胎,调葡萄糖浓度至40mmol/L,设正常组、模型组和给药组.观察2-细胞期和囊胚期的胚胎,收集囊胚期的胚胎,DAPI染色做囊胚细胞计数,用2-细胞率、囊胚率和囊胚细胞数评估胚胎发育质量.收集囊胚时期各组的胚胎培养液,做GC-MS代谢检测和数据分析.结果:形态学结果显示,与正常组比较,模型组囊胚率、囊胚细胞数均降低(P＜0.05);与模型组比较,给药组囊胚率升高,囊胚细胞数降低(P＜0.01).GC-MS代谢组学结果显示,左归丸含药血清干预后,胚胎培养液中的β-羟基丁酸、尿素、丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸、花生四烯酸、丝氨酸、亚油酸、苏糖酸增加,羟胺、山梨糖、丙酮酸、核糖酸、苯乙醛、羟基天冬氨酸、乙酰丝氨酸减少.结论:高糖抑制胚胎发育,左归丸含药血清促进胚胎发育.滋阴补肾左归丸调节妊娠糖尿病母体宫内高糖环境,抵抗高糖抑制,提高植入前胚胎质量的关键途径是亚油酸代谢通路,甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢通路,缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸合成代谢通路.
