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分段计算法可替代稀释法解决酶促反应底物耗尽问题
当检测样本中酶活性较高时,会因反应底物提前耗尽,而使测定结果偏低,如果偏差过大,不加审核,草率发出报告,会对临床诊疗工作产生误导.传统的稀释重测,也是行之有效的办法,但会增加试剂成本,延长报告时间,如果采用反应曲线分段计算法,则无需增加额外的检验成本,也不需花费太长时间,就可解决问题.
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30例ALT严重底物耗尽现象的探讨
底物耗尽现象在日常工作中并不少见,但易被忽视,特别当病人ALT结果异常发生底物耗尽时,会出现假阴性或低值结果,若不能及时发现并正确处理,会严重影响病人诊断与治疗的及时性.笔者在工作中对30例严重底物耗尽现象的样本,经处理后得到了正确的分析结果.
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反应曲线在速率法检测AST底物耗尽现象中的应用
目的 探讨反应曲线在全自动生化分析仪检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)底物耗尽现象中的应用.方法 将16例AST高值标本分为对照组和问题组,对标本进行原倍及去离子水5倍、10倍稀释检测.结果 对照组1-8号标本AST测定通过观察反应曲线结果不存在底物耗尽现象,三种测定方式下结果差异无统计学意义(P＞0.05).问题组1-8号标本AST测定通过观察反应曲线结果存在底物耗尽现象,三种测定方式下结果差异有统计学意义(P＜0.05),而且在主机数据显示中为黄色,后带有*号.结论 底物耗尽现象的问题可以通过观察标本反应曲线发现,并通过稀释样本重新测定得以解决.
关键词： 底物耗尽 反应曲线 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) -
BS-2000M2全自动生化检测系统底物耗尽限参数的临床应用评价
目的 评价BS-2000M2全自动生化检测系统(简称BS-2000M2)底物耗尽限参数(即酶线性扩展功能)的临床应用效果.方法 采用BS-2000M2减量参数(稀释法)和底物耗尽限参数(酶线性扩展功能)平行测定临床常用的10项动力学法生化检测项目[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟基丁酸脱氢酶(α-HBDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、α-淀粉酶(α-AMY)和尿素]的高浓度样本,计算酶线性扩展功能检测结果相对于稀释法检测结果的偏差.记录反应区间终点的主波长吸光度(A)值,手工计算是否发生底物耗尽,与实际反应曲线或仪器结果标记进行比较,以判断参数设置的有效性.结果 以我国卫生行业标准WS/T 403—2012规定的分析质量目标或国家卫生计生委临床检验中心室间质评允许总误差(TEa)作为可接受标准,ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CK-MB、α-AMY和尿素底物耗尽大可报告范围上限分别扩展至3339 U/L、7411 U/L、3407 U/L、3945 U/L、7646 U/L、9783 U/L、14106 U/L、3296 U/L、9700 U/L和54 mmol/L.手工计算是否发生底物耗尽与实际反应曲线或仪器结果标记一致,未出现误报或漏报底物耗尽现象.依据临床样本浓度分布,采用酶线性扩展功能后,ALT、AST、ALP、GGT、LDH、α-HBDH、CK、CK-MB、α-AMY和尿素分别可保证100.00％、100.00％、100.00％、100.00％、100.00％、100.00％、99.96％、100.00％、100.00％和99.97％的样本可以一次检测即获得终结果,且所有样本无错误结果出现.结论 BS-2000M2的酶线性扩展功能可有效解决高浓度样本假阴性结果的风险,降低了重测频率,缩短了样本周转时间.
关键词： BS-2000M2全自动生化检测系统 样本稀释 底物耗尽 线性扩展 -
酶类测定底物耗尽的监测
在用生化分析仪检测酶类项目时,常有一些高活性样品使底物耗尽,如果仪器不具备识别功能或识别参数设置不当就会产生错误结果.为能正确反映测定结果,多数全自动生化分析仪设置了底物耗尽指示系统.现就东芝MEGA800生化分析仪采取的监测底物耗尽的办法,以检测ALT为例介绍如下.
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α-羟丁酸脱氢酶与乳酸脱氢酶比值在发现α-羟丁酸脱氢酶和转氨酶底物耗尽中的应用研究
目的 寻找能够发现α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)和转氨酶底物耗尽的筛查指标.方法 分析HBDH与乳酸脱氢酶(LDH)在参考人群中的比值(HBDH/LDH),根据比值的升高或降低来推断HBDH和转氨酶是否存在底物耗尽的可能性,并通过查看反应曲线加以确认.结果 29例HBDH、ALT、AST底物耗尽案例均可通过HBDH/LDH比值关系推断发现,敏感性达100％.结论 HBDH/LDH的比值可以用于发现HBDH和转氨酶的底物耗尽,尤其是有利于发现容易被忽略的转氨酶底物耗尽情况.
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ALT、AST测定发生的底物耗尽的分析以及对应试剂线性上限的验证
在日常工作中,我们经常见到异常低值的AST和ALT结果,如果审核不仔细,往往会发出错误的报告,从而影响诊断和治疗,甚至造成诊疗错误.自2008年1月～2009年1月,我科共检测35789例生化血清标本,其中筛选出来的129例AST、ALT 异常低值标本,分析其原因:脂血浑浊标本,是造成AST/ALT异常低值的主要的原因;其次是标本取样针堵塞、明显溶血标本、标本离心不完全,血清浑浊以及酶底物耗尽等.其中酶底物耗尽是造成结果误发的主要原因.
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生化分析仪测定磷酸肌酸激酶底物耗尽现象分析与处理
目的：发现和处理日立7180全自动生化分析仪检测高值磷酸肌酸激酶（CK）底物耗尽现象的问题。方法：充分利用日立7180生化仪参数的设置检测高值、超高值标本20例，同时，对高值、超高值标本进行3、5倍稀释检测，对照和比较同一标本三种检测方式下的测定值。结果：1-7号标本不存在底物耗尽现象，3种检测方式的结果无统计学意义（P>0.05），8-20号标本存在底物耗尽现象，3种检测方式结果差异有统计学意义（P<0.01），存在底物耗尽现象，结果在数据显示Data Review后面提示“F”号。结论：底物耗尽现象的问题，可通过稀释重测，乘以稀释倍数可以解决。
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全自动生化分析仪ALT底物耗尽现象的发现和解决
目的 发现和解决Olympus AU400全自动生化分析仪检测高值丙氨酸氨基转移酶(ALT)底物耗尽现象的问题.方法 充分利用Olympus AU400仪器参数设置,检测超高、高值标本20例,同时对超高、高值标本进行3～5倍稀释检测,对照和比较检测结果.结果 1～5号标本不存在底物耗尽现象,3种检测方式下结果差异无统计学意义(P>0.05);6～20号标本存在底物耗尽现象,3种检测方式下结果差异有统计学意义(P<0.05),而且存在底物耗尽现象的结果在Data Display中显示为黄色,后面带有*号.结论 底物耗尽现象的问题,通过稀释重测,再乘以稀释倍数可以解决.
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终点法底物耗尽现象的自动识别
目前各种型号的全自动生化分析仪在各级医院检验科已得到广泛应用,但对于终点法底物耗尽现象各种设备自动识别的参数设置各不相同,各试剂供应商提供的参数也存在一些不合理的地方,大部分限制参数为开放式,对底物耗尽现象根本起不到自动识别的限制作用,给临床高值标本的分析带来很大的误差.
