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肝癥口服液对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的阻断作用
目的:探讨肝癥口服液对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的阻断作用.方法:除正常对照组外,给予大鼠二乙基亚硝胺((DEN)35mg/kg,灌胃,2次/周,共16周,预防组同时给予药物预防,16周后所有实验组停用DEN,各药物预防组继续用药至20周末实验结束,于第12周、第20周末分批处死大鼠,分别进行①肝组织切片常规HE染色,观察形态变化;②第12周,肝组织切片做γ-谷氨酰转肽酶(GGT)组化染色,对GGT阳性灶进行定量分析.结果:①实验第12周,B组大鼠肝细胞排列紊乱,肝小叶结构消失,假小叶形成,可见大量异常肝细胞构成的不典型增生结节及卵圆细胞.各药物预防组肝细胞异型性增生灶和卵圆细胞明显少于B组,异型性较轻.第20周,B、C、D和E组大鼠肝癌发生率分别为88.8%、23.08%、30%、33.33%.C、D、E组肝癌发生率显著低于B组(P＜0.05或P＜0.01);②B组肝组织GGT酶组化染色单位切面病灶数、单位面积内病灶面积、病灶平均面积三项指标显著高于各药物预防组(P＜0.05或P＜0.01).结论:肝癥口服液和苦参碱均能有效地预防大鼠肝癌前病变及癌变的发生.肝癥口服液中药大剂量预防组优于苦参碱组.
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肝癥口服液对原发性肝癌患者外周血T细胞亚群的影响
目的:研究原发性肝癌(Hepatocelluar Carcinom,HCC)患者外周血T细胞亚群的变化和肝癓口服液对HCC患者及健康志愚者外周血T细胞亚群的影响.方法:应用流式细胞仪三色分析法测定14例HCC患者、30例健康志愿者和5例HCC患者及5例健康志愿者应用肝癥口服液后外周血中CD4+、CD8+、CD8+CD28-、CD8+CD28+细胞数值.结果:HCC患者外周血中CD4+明显下降,CD8+增高,CD4+/CD8+下降,CD8+CD28-增高,而CD8+CD28+降低,与健康志愿者比较,差异具有显著性;健康志愿者用药前后外周血中CD4+、C08+、CD4+/CD8+比值、CD8+CD28-、CD8+CD28+的测定值变化不明显,P值均大于0.05;HCC患者用药后CD4+、CD8+CD28+测定值明显增加,CD8+CD28-测定值明显下降,统计学分析差异具有显著性;HCC患者用药后CD8+呈下降趋势,CD4+/CD8+比值则呈上升趋势,但统计学分析差异无显著性.结论:HCC患者处于细胞免疫功能受抑状态,肝癥口服液可以逆转HCC患者细胞免疫功能明显受抑状况,增加正性抗肿瘤免疫作用的T细胞亚群比例,降低负性抗肿瘤免疫作用的T细胞亚群的比例,增强宿主的抗瘤免疫.
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肝癥口服液含药血清对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响
目的:探讨肝癥口服液含药血清对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,为临床应用肝癥口服液治疗肝癌提供实验室依据.方法:选取Ⅱb或Ⅲ期肝癌病人和健康志愿者各5例,分别在用药前及用药后8周采集血清,与SMMC-7721细胞共同培养24h、48h后,应用噻唑氮蓝(MTT)比色法测定肝癌细胞SMMC-7721增殖水平.结果:HCC患者含药血清对SMMC-7721细胞增殖抑制率在24h、48h分别为45.00%、39.32%;而健康志愿者为4.58%、7.70%,HCC患者含药血清对肝癌细胞增殖抑制作用明显高于健康志愿者.结论:肝癥口服液含药血清对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用并促进其凋亡,表明肝癥口服液有抗肿瘤作用.
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肝癥口服液含药血清对人肝癌BEL-7402细胞系侵袭和转移的影响
目的:探讨肝癥口服液含药血清对人肝癌BEL-7402细胞系侵袭和转移的影响及其机制.方法:应用细胞培养技术培养人肝癌细胞株BEL-7402,采用血清药理学的方法,以原发性肝癌患者服用肝癥口服液前后血清处理肝癌细胞,通过Boyden小室模型测定其侵袭力和黏附力,细胞迁移实验测定细胞运动能力,同时观察细胞形态,流式细胞术测定肝癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP2),基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2),整合素β1(integrinβ1)和上皮钙黏附素(E-cd)表达的改变.结果:肝癥口服液含药血清能明显抑制肝癌细胞侵袭力(25.79±2.31 vs 49.54±4.32,P＜0.05)、黏附力(42.38±3.19 vs 68.67±5.36,P＜0.05)及运动能力(34.72±3.43 vs 54.16±5.35,P＜0.05).形态学观察发现,服药后血清组细胞形态较圆,伪足数目较少,MMP2阳性表达细胞减少(289.61±25.32 vs 439.28±22.45,P＜0.05),TIMP2阳性表达细胞增多(348.75±34.58 vs 250.53±1 6.48,P＜0.05),MMP2/TIMP2比值下降(0.83 vs 1.76,P＜0.05);integrinβ1表达减少(286.05±28.47 vs 389.57±21.23,P＜0.05),E-cd的表达则增加(385.57±26.36 vs 230.72±13.41.P＜0.05).结论:肝癥口服液含药血清能抑制肝癌BEL-7402细胞侵袭与转移,其机制可能与直接抑制细胞迁移运动,抑制细胞基质溶解相关基因蛋白MMP2表达,促进TIMP2表达;抑制黏附分子integrinβ1的表达,促进E-c表达有关.
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肝癥口服液人含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡及细胞周期的影响
本文就肝癥口服液人含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721细胞凋亡及细胞周期的影响进行了研究.通过荧光显微镜观察及流式细胞仪检测表明,肝癥口服液可以促进人肝癌细胞SMMC-772细胞凋亡,且对正常人的免疫系统影响不大.
关键词： 肝癥口服液 肝癌细胞SMMC-7221 凋亡 细胞周期 -
肝癥口服液含药血清对人肝癌BEL-7402细胞系生物学行为的影响
目的:探讨肝瘕口服液含药血清对人肝癌BEL-7402细胞系增殖、凋亡、侵袭和转移等生物学行为的影响及其机制.方法:培养技术培养BEL-7402细胞,以原发性肝癌患者服用肝癥口服液前后血清处理肝癌细胞,MTT法测定细胞抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡率,通过Boyden小室模型测定其侵袭力、黏附力,细胞迁移实验测定细胞运动能力,同时观察细胞形态,流式细胞术测定肝癌细胞MMP2、TIMP2、integrinβ1、E-cd表达的改变.结果:肝瘢口服波含药血清能明显抑制肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡,同时抑制肝癌细胞侵袭力、黏附力及运动能力.形态学观察发现,服药后血清组细胞形态较圆,伪足数目较少,MMP2阳性表达细胞减少,TIMP2阳性表达细胞增多,MMP2/TIMP2比值下降;integrinβ1表达增加,E-cd的表达则减低.结论:肝癥口服液含药血清能抑制肝癌BEL-7402细胞增殖,促进细胞凋亡,同时抑制细胞侵袭与转移,其机制可能与直接抑制细胞迁移运动,抑制细胞基质溶解相关基因蛋白MMF2表达,促进TIMP2表达;抑制黏附分子E-cd的表达,促进integrinβ1表达有关.
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肝癌患者肝癥口服液含药血清对SMMC-7721肝癌细胞TGFβ受体表达的影响
目的:观察肝癥口服液含药人血清对SMMC-7721肝癌细胞TGFβ1/Smads信号转导通路中TGFβ受体(TGFβR)的影响.方法:以健康志愿者和肝癌患者用药前后血清培养人SMMC-7721肝癌细胞,应用RT-PCR和Western Blotting技术观察含药血清对肝癌细胞TGFβRⅠ和TGFβRⅡ mRNA和蛋白表达的影响.结果:健康志愿者服用肝癥口服液前后血清对SMMC-7721细胞的TGFβRⅠ和TGFβRⅡ蛋白和mRNA表达无显著影响;肝癌患者肝癥口服液的含药血清可使明显受到抑制的TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达恢复,尤其以TGFβRⅡ表达显著上调.结论:肝癌患者肝癥口服液含药血清可增加肝癌细胞TGFβR的表达,使受到抑制的TGFβ1/Smads信号转导通路功能恢复.
