首页 > 文献资料
-
小鼠牙乳头间充质细胞自发牙向分化及相关基因表达分析
目的 观察小鼠牙乳头间充质细胞在血清培养基中的自发牙向分化,并对其特异性牙向和骨向分化的相关转录因子的基因表达进行分析.方法 获取孕 16.5 d(E16.5 d)胎鼠的原代牙乳头间充质细胞,分别在含血清培养基和添加白血病抑制因子(LIF)的血清培养基中传代培养,观察细胞是否出现成牙本质细胞表型分化,并检测牙向分化表型和维持未分化表型的细胞的特异性转录因子的 mRNA 表达情况.结果 单纯血清培养基培养的牙乳头间充质细胞可在第4代后自发分化为成牙本质细胞表型;而添加105U/L LIF 的含血清培养基,可使小鼠牙乳头间充质细胞的未分化表型稳定至第9代.无论细胞是否出现牙向分化,表现成牙间充质细胞特性的 Msx1/Msx2、Pax9、Lhx6/Lhx7均有表达;而成牙本质细胞表型分化后尚能检测到DSPP、Sox9、Cbfα1、Osx 等启动向矿化组织细胞终末分化的特异性基因表达.结论 牙乳头间充质细胞的自发牙向分化模型可作为诱导其他成体间充质干细胞牙向分化时的阳性对照,其基因表达模式可为研究其他成体干细胞牙向分化后在基因水平上的变化提供佐证.
关键词: 小鼠牙乳头间充质细胞 白血病抑制因子 牙向分化 基因表达 -
SHH对体外培养的小鼠牙乳头间充质细胞增殖的影响
目的观察Sonic Hedgehog对体外培养小鼠牙乳头间充质细胞增殖的影响.方法构建Shh真核表达载体pCDNA3-Shh,脂质体法转染COS7细胞,收集培养上清液.实验组加入转染pCDNA3-Shh的培养上清液,对照组加入转染空载体pCDNA3的培养上清液,培养72h,MTT法检测Shh对体外培养的小鼠牙乳头间充质细胞增殖的影响.结果Shh能促进体外培养的小鼠牙乳头间充质细胞增殖.结论Shh促进牙乳头细胞增殖,参与牙胚发育.
关键词: Shh 小鼠牙乳头间充质细胞 细胞增殖