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核糖体蛋白激酶磷酸化程度与人乳头瘤病毒16感染情况的相关性分析
目的:检测人乳头瘤病毒16型(HPV16)感染的宫颈鳞癌组织中核糖体蛋白激酶S6K和S6的磷酸化水平,探讨HPV16感染在宫颈癌发生发展中的作用.方法:利用PCR方法将收集到的135例人子宫颈鳞癌样本分为HPV16感染阳性组和阴性组,用免疫组织化学方法检测磷酸化S6K(p-S6K)和磷酸化S6(p-S6)蛋白在病例样本中的表达水平.结果:HPV16感染的宫颈癌组织内,核糖体蛋白S6K和S6的磷酸化比率分别为46.5％和68.7％,分别高于未感染的宫颈癌组织(8.33％和30.6％),差异具有统计学意义(P均＜0.05).两种蛋白相关性分析,p-S6K与p-S6蛋白在HPV16型病毒感染的宫颈癌组织中表达呈正相关性(r=0.095,P=0.019).结论:HPV16病毒的感染与核糖体蛋白激酶S6K和S6的磷酸化(活化)具有强相关性,后两者的活化能促进细胞的生长增殖,在肿瘤的发生发展中起重要作用.
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Resveratrol对糖尿病大鼠肾皮质4E-BP1和S6磷酸化表达的影响
目的:探讨Resveratrol对糖尿病(DM)大鼠早期肾脏肥大的影响及其可能的机制.方法:雄性SD大鼠13只.应用链脲佐菌素诱导建立DM大鼠模型,6只正常SD大鼠作为对照(NC).DM大鼠于第11周随机分为DM组7只和Resveratrol(DR)组6只,DR组给予Resveratrol 10 mg/(kg·d)灌胃,共4周.第14周收集3组大鼠24 h尿测尿微量白蛋白.处死大鼠.心脏取血测血肌酐.取肾组织,制石蜡切片做HE染色,免疫组化观察肾皮质4E-BP1磷酸化蛋白表达量的变化.Western blot检测肾皮质S6磷酸化蛋白表达的改变.结果:与NC组相比,DR和DM组大鼠血糖、24 h尿微量白蛋白和血肌酐明显升高.而体重明显降低(P均<0.01),而用Resveratrol干预后DR组大鼠血糖、24 h尿微昔白蛋白及血肌酐比DM组明显好转(P<0.05).肾脏HE染色结果显示,DM组大鼠肾小球系膜基质中度增生,系膜细胞增生,系膜区明显扩大,肾小球体积增大.DR组肾小球系膜细胞和基质增生及肾小球系膜区扩张较DM组明显减轻.肾皮质免疫组化结果显示,4E-BP1磷酸化蛋白在DM组表达呈强阳性,在DR组表达呈弱阳性.DM和DR组大鼠血管组织中S6磷酸化蛋白的表达明显高于NC组(P<0.01),而DR组明显低于DM组(P<0.01).结论:DM大鼠早期存在肾脏肥大和mTOR信号通路下游的4E-BP1和S6磷酸化蛋白表达增高.Resveratrol可能通过抑制4E-BP1和S6的磷酸化来减轻DM大鼠早期肾脏肥大,延缓糖尿病肾病的发展.
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第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达
目的 观察第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达模式.方法 选取不同发育阶段(孕15 d子鼠记为A组,出生当天大鼠记为B组,出生后7d大鼠记为C组,出生后56 d大鼠记为D组)的SD大鼠,取出其脊髓,采用Western blot法检测该通路上关键蛋白的表达水平;同时,采用免疫荧光法检测各相应蛋白在大鼠脊髓的细胞定位.结果 Western blot结果显示,A、B、C、D组PTEN与内参肌动蛋白(actin)的灰度值比分别为0.281±0.086、0.462 ±0.002、0.591±0.022、0.392±0.001,A组与其他3组比较差异有统计学意义(P＜0.05),D组与B、C组比较差异有统计学意义(P＜0.05);A、B、C、D组S6与actin的灰度值比分别为0.646 ±0.116、0.450±0.129、0.824±0.082、0.174±0.038,D组与A、C组比较差异有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光染色结果显示脊髓神经元有丰富的PTEN与S6表达.结论 这些结果提示PTEN/mTOR信号通路可能与发育相关的表达模式,从而为中枢神经系统再生能力随着发育过程而降低这一现象提供依据.
