您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
时间调控文献资料
-
Feulgen-Ag-NOR联合染色
NOR是核仁组成区相关嗜银蛋白的简称(Nuclear Organizer Region,NOR).细胞学证明,银不与rRNA结合,而与rRNA相关的酸性非组蛋白结合.已有不少学者把它应用于肿瘤研究.本方法将脱氧核糖核酸(DNA)Feulgen反应法与AgNO3-NOR法联合染色,同时显示DNA与NOR,并在原法上做了改进.效果良好,结构清晰,定性准确.具体方法如下:1.组织固定于10%甲醛12～24hr;2.常规石蜡包埋,切片4-6μm;3.切片脱蜡至水,蒸馏水洗10min;4.3.3mol/L HCl浸洗切片1min;5.3.3mol/L HCl水解25min,37℃;6.蒸馏水洗2次,4℃ 2min,室温5min;7.入新配的Schiff试剂,避光,室温下反应1hr;8.连续用亚硝酸水溶液洗3次,每次2min;9.水洗;10.加硝酸银-甲酸明胶液,避光,37℃,按不同组织,时间调控在10-60min之内;硝酸银-甲酸明胶液配法:将1g明胶溶于50ml 1%甲酸中,取出10ml与40m l 50%AgNO3混合.11.蒸馏水充分洗3次;12.脱水、透明、封片、油镜观察.结果:背景淡黄色,DNA染紫红色,AgNO3-NOR染棕黑色.AgNO3-N OR以两种形式存在①团块状,其中含有数个小的银染颗粒,相当于核仁本身;②散在于细胞核内较小的银染颗粒.
