您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
依赖耐热解旋酶核酸等温扩增文献资料
-
沙门菌tHDA等温扩增检测方法的建立
目的 建立基于依赖耐热解旋酶核酸等温扩增(tHDA)的沙门菌快速检测方法.方法 从GenBank数据库下载沙门菌侵袭蛋白A (invA)基因,比对确定保守区并设计tHDA引物,并对引物浓度、硫酸镁以及氯化钠浓度等反应条件进行优化.同时评价方法的特异性和灵敏度,并检测模拟样本和真实样本以验证方法的可靠性.结果 建立的沙门菌tHDA检测体系经过优化,结果显示仅沙门菌菌株呈现特异性电泳条带,而志贺菌、副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7、霍乱弧菌等其他5种肠道细菌均为阴性,特异性好;tHDA法检测沙门菌纯培养物的灵敏度为19cfu/μl,检测模拟样本的灵敏度为260 cfu/μl.采用tHDA方法检测18份真实样本,共检出9份沙门菌阳性,与国标法检测结果一致.结论 沙门菌tHDA检测方法快速、灵敏、特异,在食源性疾病检测及监测中具有重要的技术优势.
关键词： 依赖耐热解旋酶核酸等温扩增 沙门菌 侵袭蛋白A 分子检测
