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人脐血清对人脐带血间充质干细胞生物学特征与衰老的影响
目的:探讨人脐血清(human umbilical cord blood serum,CBS)对体外培养人脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)基本生物学特征的影响.方法:密度梯度离心分离脐带血单个核细胞,以含3％CBS加7％胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)(CBS组)或10％FBS(FBS组)的完全培养基培养hUCB-MSCs,流式细胞术检测细胞表面分子与细胞周期,显微镜下测定细胞表面积和表达β-半乳糖苷酶细胞百分率,MTT法检测光密度值、绘制生长曲线.结果:CBS组和FBS组均表达CD44、CD105、CD90、CD73,不表达CD45、CD34、CD11b、CD19和人白细胞DR抗原(human leukocyte antigen DR,HLA-DR),但与FBS组比较,CBS组表达CD90细胞百分率更低,G0/G1期细胞比例较少,细胞增殖指数较高(P＜0.05)且细胞表面积也明显更小(P＜0.05).CBS组生长曲线较FBS组左移,峰值更高,细胞倍增时间48.37 h,FBS组则为54.43 h.FBS组β-gal染色阳性细胞百分率明显高于CBS组(P＜0.05).结论:部分CBS合用FBS培养hUCB-MSCs能更好地促进细胞增殖,并更好地保持hUCB-MSCs的基本生物学特征和延缓细胞的衰老.
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人脐带血清合用胎牛血清培养人脐血间充质干细胞
目的 探讨人脐带血清与胎牛血清合用培养人脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)的形态学、表面标志和胞内标志蛋白的变化.方法 密度梯度离心分离脐带血单个核细胞后,应用含10％胎牛血清完全培养基原代培养,分别以3％人脐血清加7％胎牛血清(CBS组)和10％胎牛血清(FBS组)完全培养基传代培养.P5内细胞,进行细胞形态学观察,流式细胞术检测细胞表面分子,免疫细胞化学染色检测细胞内标志蛋白.结果 P5内细胞,两组hUCB-MSCs均为梭型细胞,细胞大小无明显改变,均表达CD44、CD105、CD90、CD73和波形蛋白,不表达CD45、CD34、CD11b、CD19和HLA-DR；其中表达CD44、CD73阳性细胞百分率高达99％.结论 3％人脐血清加7％胎牛血清可成功地培养出形态与表型特征良好的hUCB-MSCs.
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人脐血清源性外泌体对肝癌Hep3B细胞活力的影响
目的:探究脐血清源性外泌体对肝癌Hep3B细胞活力的影响.方法:提取健康足月胎儿脐血清源性外泌体,加入细胞培养基孵育24小时,MTT检测细胞活力变化,倒置显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Cleaved-Caspase3表达变化.结果:脐血清源性外泌体能显著抑制肝癌Hep3B细胞活力,导致细胞发生形态学改变、凋亡细胞比例增加及活化的Caspase3水平上升.结论:脐血清源性外泌体能诱导肝癌细胞发生凋亡,具有潜在的抑制肿瘤的生物学活性.
