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同时检测4种传染病病原体的蛋白质微阵列研究
[目的]建立1种用蛋白质微阵列法可同时检测血清中艾滋病病毒(HIV)抗体、丙型肝炎病毒(HCV)抗体、梅毒螺旋体(TP)抗体和乙型肝炎病毒表面抗原的方法.[方法]将基因工程HIV、HCV、TP重组抗原和乙肝病毒单克隆抗体共价结合于固相载体玻片上,制成蛋白质微阵列.血清样本经稀释、加样、孵育、洗涤后,加上Cy3荧光标记物,用激光芯片扫描系统对蛋白质微阵列进行扫描成像.将获得的图像用Imagene专用分析软件进行分析,所获数据根据cutoff值自动生成判断结果.用此蛋白微阵列系统检测了100份4个项目皆阴性的血清标本,确定了其cutoff值.检测了经酶联免疫吸附试验(EUSA)筛选出4个项目皆阴性的标本40例;艾滋病病毒抗体阳性标本30例;乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒特异性抗体阳性血清各100份.[结果]蛋白质微阵列法检测艾滋病病毒抗体、丙肝抗体和乙型肝炎表面抗原的阳性和阴性标本的符合率皆为100%,梅毒特异性抗体阳性符合率为97%,阴性符合率为100%.[结论]蛋白质微阵列法检测HIV、HCV、TP和HBshg与EHSA法检测结果具有高度的符合率.该法具有高通量、快速、特异性强、操作简便等特点,适用于大规模样本的分析,在卫生检疫传染病检测方面具有应用和推广价值.
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微阵列检测血样感染相关四项指标的实验研究
目的 利用蛋白芯片技术检测血样感染相关四项指标,并与ELISA酶联免疫技术进行客观分析评价.方法 对230份国家参比品同时进行蛋白芯片与ELISA酶联免疫的检测,并观察蛋白芯片对诊断血样感染四项指标的敏感性和特异性.结果 用统计学的配对计数资料检验得出:χ2=0.5,P=0.125,说明两种方法检测结果无统计学差异.结论 蛋白微阵列检测结果无论是与参比品本身还是与ELISA试剂盒都有极高的符合率,是一种很有发展前途的检验技术.
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同步检测两种输血传播病原体的蛋白微阵列的研究
目的 建立一种基于多元蛋白微阵列的免疫检测方法,用于筛查人血清中艾滋病毒、丙型肝炎病毒.方法 将HIV/HCV抗原喷印到活化的玻片表面,抗原与活化基团共价结合后与血清中的特异性抗体反应,用激光芯片扫描系统对蛋白微阵列进行扫描成像.所获得的图像用软件进行分析,并自动判定并生成待测样本的定性结果.结果 蛋白微阵列法检测HIV、HCV两种定值血清检测限分别为:12ng/ml、5ng/ml.运用该系统检测HIV、HCV两种抗体参比品,各检测项目的符合率分别为87.5%、93.75%.结论 多元蛋白微阵列法特异性强,灵敏度、准确度、精密度较高,具有应用和推广价值.
