首页 > 文献资料
-
eIF4A1基因沉默对胃癌SGC-7901细胞生物学行为影响机制的探讨
目的 探讨沉默eIF4A1基因对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移的细胞生物学行为影响的机制.方法 以eIF4A1沉默重组慢病毒颗粒(LV-EIF4A1-RNAi组)感染人胃癌SGC-7901为eIF4A1沉默组(eIF4A1-RNAi组),感染阴性对照慢病毒颗粒(CON077)的胃癌细胞为阴性对照组(CON077组),空白对照组(control组)不作任何处理.以每个副孔初始含4×103个细胞,CCK-8检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测各组5×106个细胞凋亡和1×106个细胞周期分布;Transwell实验检测各组1×105个细胞迁移和侵袭能力;实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞eIF4A1和AKT基因的mRNA和蛋白表达水平.结果 LV-EIF4A1-RNAi(44683-1)组eIF4A1基因的表达量低为(0.31±0.04),因此选择该组为eIF4A1沉默组(eIF4A1-RNAi).与CON077组和control组相比,eIF4A1-RNAi组细胞增殖活力明显降低,细胞凋亡率提高,细胞周期阻滞于S期,G1/G2期细胞减少,细胞的迁移、侵袭能力下降,eIF4A1和AKT基因的mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);CON077组与control组比较,上述指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 慢病毒介导eIF4A1基因沉默能抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖和迁移、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期于S期,其机制可能与AKT表达下调有关.
-
miR-1284过表达对胃癌细胞中 EIF4 A1的影响
目的：通过验证miR-1284可能的靶基因，从而探讨miR-1284影响胃癌发生发展可能的分子作用机制。方法采用生物信息学软件预测miR-1284可能的靶基因。以慢病毒介导miR-1284过表达转染胃癌MGC-803细胞为miR-1284组（ LV-miR-1284组），转染空载体慢病毒载体的细胞为阴性对照组，未转染慢病毒载体的细胞为空白对照组。运用荧光定量PCR检测各组EIF4A1基因的表达，Western blot法检测各组EIF4A1蛋白的表达，通过双荧光素酶对EIF4A1进行靶基因验证。结果与阴性对照组和空白对照组比较， miR-1284组的EIF4A1基因和蛋白的表达量下降，双荧光素酶示miR-1284能与靶基因EIF4A1的3′UTR的结合。结论 miR-1284通过作用其靶基因EIF4A1发挥生物功能学作用。
