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miR-1284过表达对人胃癌SGC-7901细胞基因表达谱及侵袭转移的影响
背景与目的：人胃癌组织微小RNA表达谱芯片筛选研究报道miR-1284与胃癌淋巴结转移有关，但其在胃癌中的具体作用鲜见报道。该研究探讨miR-1284过表达对人胃癌SGC-7901细胞基因表达谱及侵袭转移的影响。方法：以慢病毒介导miR-1284过表达转染胃癌SGC-7901细胞为实验组(LV-miR-1284组)，转染空载体慢病毒载体的细胞为阴性对照组(LV-NC-GFP组)，未转染慢病毒载体的细胞为空白组(Control组)。采用荧光定量PCR检测各组细胞miR-1284的表达，芯片检测各组细胞差异表达基因，生物信息学预测miR-1284的靶基因，Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力，裸鼠皮下移植瘤模型检测各组细胞转移能力。结果：PCR结果显示，与LV-NC-GFP组和Control组比较，LV-miR-1284组细胞miR-1284表达明显增高；芯片结果显示， LV-miR-1284组有20个基因表达显著上调，17个基因表达显著下调；生物信息学预测miR-1284的靶基因有138个基因；Transwell侵袭实验结果显示，LV-miR-1284组侵袭细胞数为70.00±2.37，其细胞侵袭能力较LV-NC-GFP组(168.67±4.55)和Control组(170.33±3.08)明显减弱；体内裸鼠实验结果显示，LV-miR-1284组肝脏转移率为14.29%，其细胞转移能力较LV-NC-GFP组(85.71%)和Control组(85.71%)明显减弱。结论：miR-1284过表达能抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭转移，其机制可能与调控SUMO1、JUN基因表达有关。
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miR-1284过表达对胃癌细胞中 EIF4 A1的影响
目的：通过验证miR-1284可能的靶基因，从而探讨miR-1284影响胃癌发生发展可能的分子作用机制。方法采用生物信息学软件预测miR-1284可能的靶基因。以慢病毒介导miR-1284过表达转染胃癌MGC-803细胞为miR-1284组（ LV-miR-1284组），转染空载体慢病毒载体的细胞为阴性对照组，未转染慢病毒载体的细胞为空白对照组。运用荧光定量PCR检测各组EIF4A1基因的表达，Western blot法检测各组EIF4A1蛋白的表达，通过双荧光素酶对EIF4A1进行靶基因验证。结果与阴性对照组和空白对照组比较， miR-1284组的EIF4A1基因和蛋白的表达量下降，双荧光素酶示miR-1284能与靶基因EIF4A1的3′UTR的结合。结论 miR-1284通过作用其靶基因EIF4A1发挥生物功能学作用。
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miR-1284过表达增加胃癌耐药细胞的药物敏感性及机制
胃癌细胞的多药耐药性常常是导致化疗失败的主要原因.小RNA(microRNA,miRNA)为调节基因转录的重要因子,miR-15b和miR-16在胃癌多药耐药SGC-7901/VCR细胞中低表达,通过上调miR-15b和miR-16,可靶向抑制抗凋亡蛋白Bcl-2,进而部分逆转细胞的多药耐药表型[1].Chen等[2]使用miRNA芯片检测结果表明,miR-1284在胃癌淋巴结转移阳性组织比原发性胃癌组织表达少,但miR-1284在胃癌细胞中的功能尚不清楚.本研究通过构建目的miR-1284慢病毒,观察miR-1284过表达后对人胃癌耐药SGC-7901/VCR细胞耐药性的影响,并探讨其可能的作用机制.
