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小毛莨内酯对结核休眠菌感染病人GLS mRNA表达的影响
目的研究小毛莨内酯抗人体结核休眠菌感染的分子免疫学机理.方法采用PCR方法检测结核病人PBLs中结核菌16kD α-晶状体同源蛋白DNA阳性的56例患者为本研究对象;采用反转录聚合酶链反应半定量(QC-RT-PCR)方法,测定不同剂量的Tern.对以上病人PBL颗粒裂解肽mRNA表达水平的影响.结果当Tern.在100mg/L,200mg/L浓度时,能诱导结核休眠菌感染病人体外活化的PBL GLS mRNA的表达.结论 Tern.可能通过促进颗粒裂解肽mRNA的表达,增强机体CTL杀菌能力,达到抗结核休眠菌的作用.
关键词: 小毛莨内酯 颗粒裂解肽 结核 休眠菌 16kD α-晶状体同源蛋白 -
小毛茛内酯的合成及抗结核活性的研究
小毛茛内酯一直被认为是猫爪草抗结核活性的有效成分.本文通过Yamaguchi酯化反应以32.7%的总收率完成了小毛莨内酯的化学合成制备,并采用直观快速药敏实验技术评价了其抗结核活性.文献报道,小毛茛内酯是通过增加外周血淋巴细胞颗粒裂解肽的表达,间接杀死结核杆菌.本文研究结果显示,小毛茛内酯在体外对分支杆菌H37Rv ATCC 27294菌株表现出了微弱的抑制活性,其抗结核杆菌作用可能与细胞因子有关.
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小毛莨内酯对重组耻垢分枝杆菌eis基因表达的影响
目的 研究小毛莨内酯(Ternatolide,Tern)对重组耻垢分枝杆菌生长增殖及其eis基因表达的影响.方法 将5×105 MS-eis-PMV261接种于LB培养基培养并加入200 mg/L的Tern作为实验组,MS-eis-PMV261单独培养作为对照,不同时间点测量取菌液波长为600 nm的A值,根据所测A值绘制增殖曲线;提取菌液DNA以RT-PCR方法检测Tern对eis基因表达的影响;免疫印迹法SDS-PAGE及Western Blot检测Tern对EIS蛋白表达的影响.结果 Tern对两组重组耻垢分枝杆菌增殖差异无统计学意义(P >0.05);Tern可抑制eis基因的表达(P<0.05);SDS-PAGE及Western Blot检测发现Tern可显著降低EIS蛋白的表达(P<0.05).结论 Tern对重组耻垢分枝杆菌的增殖无影响,但可抑制结核分枝杆菌eis基因及其表达的蛋白.该结果对研究持留性结核分枝杆菌的药物治疗提供了实验依据.
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小毛莨内酯对结核病人颗粒裂解肽基因表达的作用
目的研究小毛莨内酯(Ternatolide, Tern)对健康成人,初诊未治、耐药肺结核病人及儿童结核患儿周围血淋巴细胞(PBL)体外活化后颗粒裂解肽(granulysin,GLS)mRNA表达的作用,探索其抗结核菌的分子免疫学机理.方法采用反转录聚合酶链反应半定量(QC-RT-PCR)方法,测定不同剂量的Tern对以上4组人群PBL颗粒裂解肽mRNA表达水平的影响.结果当Tern在100 mg*L-1,200 mg*L-1浓度时,均能诱导以上4组人群体外活化的PBL GLS mRNA的表达,且各组诱导表达水平无显著差异.结论 Tern可能是通过提高CTL的效应分子GLS mRNA表达的水平,杀灭胞内致病菌MTB,其诱导作用呈现剂量依赖性.特别是对休眠菌感染所致的耐药结核病人体外PBL GLS mRNA的表达亦有高水平的诱导.
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猫爪草有效成分抗结核治疗进展
临床研究证明,中药猫爪草抗结核效果显著,但机制尚未明了.因此,了解结核杆菌休眠和复苏的机制以及猫爪草提取物对结核分枝杆菌临床分离株的可能作用靶标意义重大.