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Notch1/Hes1通路活化通过抑制氧化应激改善高糖诱导的心肌细胞肥大
目的 研究Notch1/Hes1信号通路活化对高糖诱导的心肌细胞肥大的影响,及其对氧化应激的作用.方法 原代培养大鼠心肌细胞,采用图像分析法检测心肌细胞表面积,BCA试剂盒分析细胞总蛋白含量,采用RT-qPCR和Western blot技术检测Notch1、Hes1、超氧化物歧化酶(SOD1)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平,相关试剂盒检测细胞匀浆中丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量.结果 与对照组比较,高糖能明显诱导心肌细胞表面积及总蛋白含量的增加(P＜0.05),心肌细胞中Notch1、Hes1蛋白表达量也明显降低(P＜0.05),同时氧化应激产物MDA、NO明显升高(P＜0.05),并且SOD1显著降低、iNOS显著升高(P＜0.05);激活Notch1/Hes1信号通路能够显著降低高糖引起的心肌细胞肥大及氧化应激损伤(P＜0.05),而Notch1干扰慢病毒可阻断Notch1对心肌细胞肥大及氧化应激的上述改善作用(P＜0.05).结论 激活Notch1可以降低高糖诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能与降低细胞氧化应激损伤有关.
关键词： Notch1/Hes1信号通路 心肌细胞肥大 氧化应激 -
Notch1/Hes1信号调控C/EBPα表达对AECII细胞增殖与分化的影响
目的:探讨Notch1/Hes1信号通路能否通过调控CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达从而影响肺泡II型上皮细胞(AECII)的增殖与分化功能.方法:体外培养人AECII,将细胞随机分为对照组、激活剂组(加入Notch通路激活剂Jagged1蛋白500μg/L)和抑制剂组(加入Notch通路抑制剂DAPT 10μmol/L),于干预后24 h收获各组细胞.采用RT-qPCR和Western blot法分别检测Notch1、Hes1及C/EBPα的mRNA与蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞活力;细胞计数检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期及分化.结果:与对照组相比,激活剂组Notch1、Hes1和C/EBPα的mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),促进AECII从S期进入G2/M期,增殖增加而分化减少(P<0.05);抑制剂组Notch1、Hes1和C/EBPαmRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05),AECII被阻滞于G0/G1期,增殖减少而分化增加(P<0.05).结论:Notch1/Hes1信号可调控C/EBPα表达并能影响AECII增殖与分化.
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褪黑素抗心肌缺血/再灌注损伤的作用及其对Notch1/Hes1信号通路影响
目的 探讨褪黑素(melatonin,Mel)对减轻大鼠心肌缺血/再灌注(MVR)损伤的作用及其对心肌Notch1/Hes1信号的影响.方法 90只雄性SD大鼠(200～250)g,随机分为3组(每组n=30):假手术(Sham)组、溶剂对照(MI/R+V)组和Mel处理(MI/R+ Mel)组[10 mg/(kg ·d),灌胃4周].行结扎大鼠冠状动脉左前降支手术造成MI/R模型,心肌缺血30 min,再灌注4h后检测心肌Notch1受体胞内区(Notch1 intracellular domain,NICD)及Hes1、PTEN、p-Akt/Akt比值和凋亡相关蛋白表达,再灌注6h后检测梗死面积和心肌细胞凋亡率,再灌注72 h后检测心功能.结果 MI/R损伤显著下调左心射血分数(LVEF)与左心室短轴缩短率(LVFS),增加心肌凋亡率及梗死面积.Mel口服预防性治疗4周可显著改善心功能并减轻心肌凋亡及梗死(P＜0.01).另外口服Mel治疗可显著激活心肌Notch1/Hes1信号通路并调控PTEN/Akt信号,从而下调心肌凋亡信号(P＜0.05).结论 口服Mel预防性治疗可显著减轻MI/R损伤后心肌梗死及凋亡水平,改善心功能.而且,Mel口服可显著上调缺血打击后心肌Notch1/Hes1信号并对PTEN/Akt信号发挥调控作用,下调心肌凋亡信号,从而保护心肌.
关键词： 褪黑素 Notch1/Hes1信号通路 心肌缺血/再灌注损伤 心肌保护 凋亡
