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微小RNA-422a对骨肉瘤细胞增殖的影响
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-422a表达水平对骨肉瘤细胞增殖抑制的影响.方法 选择健康雄性SD大鼠40只,分别制备骨肉瘤MG63与U2OS细胞株荷瘤鼠模型,采用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)双染色法转染miR-422a模拟物和抑制物调节miR-422a的表达,分析miR-422a高表达和低表达环境下骨肉瘤细胞的增殖、凋亡,并分析miR-422a表达对不同细胞周期骨肉瘤细胞的抑制作用.结果 转染miR-422a模拟物后48 h,MG63和U2OS细胞的增殖出现明显抑制,在转染miR-422a抑制物48 h后,MG63和U2OS的细胞增殖被促进,差异均有统计学意义(P =0.068、0.035、0.016、0.004;0.072、0.028、0.019、0.003);转染miR422a模拟物后MG63细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.3±0.1)％、(5.2±0.1)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.3±0.5)％、(5.4±0.4)％,U2OS细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.2±0.2)％、(5.3±0.2)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.5±0.1)％、(5.2±0.1)％,转染miR-.422a模拟物进行饥饿处理48 h后MG63细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.2±0.4)％、(28.6±0.7)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(5.5±0.2)％、(48.5±2.4)％,U2OS细胞株对照组0、96 h的细胞凋亡率分别为(6.2±0.3)％、(18.7±3.1)％,模拟物组0、96 h的细胞凋亡率分别为(6.2±0.2)％、(39.8±3.2)％,与阴性对照组比较,转染miR-422a模拟物96 h后,骨肉瘤细胞的凋亡比例未出现显著改变,但在转染miR-422a模拟物进行诱导凋亡处理48 h后,与阴性对照组比较,骨肉瘤细胞凋亡数量明显增加,不同细胞生长周期细胞数量比较,转染miR-422a模拟物后G0/G1期细胞数明显增加,而S期和G2/M期细胞数明显降低.结论 miR-422a高表达能够有效抑制骨肉瘤细胞的增殖,提高骨肉瘤细胞在恶劣环境中的凋亡比例.
关键词： 骨肉瘤 微小RNA-422a 细胞增殖 脱噬作用
