首页 > 文献资料
-
仙茅多糖对RAW264.7细胞的促活化作用及对细胞表面Dectin-1受体表达的影响
目的 探讨仙茅多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞的促活化作用及对细胞表面Dectin-1受体表达的影响.方法 采用不同浓度的仙茅多糖(500,250,125,62.5,31.25μg/ml)处理细胞36h,MTT法测细胞活性,ELISA法测TNF-α分泌量,Griess法测NO的分泌量,qRT-PCR测细胞Dectin-1 mRNA的相对表达量.采用Dectin-1受体抑制剂昆布多糖(终浓度为50和100μmol/ml)对细胞预处理2h后,再用仙茅多糖刺激,qRT-PCR测细胞TNF-α和iNOS mRNA的相对表达量,流式细胞术检测细胞吞噬FITC标记的大肠杆菌的能力.结果 RAW264.7细胞受到仙茅多糖刺激后,Dectin-1 mRNA表达量较正常对照组显著增加(P＜0.01或P＜0.05),且在一定范围内存在量-效关系和时-效关系;与正常对照组相比,仙茅多糖对RAW264.7细胞的吞噬功能和分泌活性因子TNF-α和NO的能力有提升作用(P＜0.01或P＜0.05),这种作用可以被Dectin-1受体抑制剂昆布多糖阻断.结论 仙茅多糖可以增强RAW264.7细胞的吞噬功能和分泌活性因子TNF-α和NO的能力,从而促进细胞活化,其机制可能与细胞表面Dectin-1受体有关.
关键词： 仙茅多糖 RAW264.7细胞 Dectin-1受体 促活化 -
Dectin-1在热处理光滑假丝酵母菌刺激大鼠气道上皮细胞中的作用及对IL-10和TNF-α表达的影响
目的 探讨树突状细胞相关C型凝集素-1 (Dectin-1)在热处理光滑假丝酵母菌刺激大鼠气道上皮细胞(RTECs)中的作用及对IL-10和TNF-α表达的影响.方法 将体外培养的RTECs随机分为3组:对照组(RTECs+无菌生理盐水)、真菌刺激组(RTECs+热处理光滑假丝酵母菌)、抑制剂干预组(RTECs+昆布多糖+热处理光滑假丝酵母菌),分别孵育0、2、4、6h后终止,MTT法检测细胞存活率,Western Blot法检测Dectin-1表达,ELISA法检测IL-10和TNF-α的表达.结果 热处理光滑假丝酵母菌破坏细胞结构,降低细胞存活率.在培养开始时(0 h),3组RTECs细胞存活率以及Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).培养2、4、6h后,真菌刺激组、抑制剂干预组Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平均高于对照组,抑制剂干预组Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平均低于真菌刺激组(均P＜0.05).除抑制剂干预组0h与2 h IL-10表达量比较,差异无统计学意义之外,真菌刺激组和抑制剂干预组组内不同时间段Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 Dectin-1是RTECs识别热处理光滑假丝酵母菌的重要受体,并诱导其释放IL-10和TNF-α,介导炎症反应的发生.
-
大鼠侵袭性肺部热处理光滑念珠菌感染肺组织Dectin-1和IL-10的表达
目的 探讨相关性C型凝集素-1(Dectin-1)和白细胞介素-10(IL-10)在大鼠侵袭性肺部热处理光滑念珠菌感染的表达及意义.方法 将24只大鼠随机分为两组,对照组及热处理光滑念珠菌感染组(简称感染组).感染组建立大鼠侵袭性肺部热处理光滑念珠菌感染模型,在第3、6天观察肺组织病理形态学改变,用酶联免疫吸附测定法肺泡灌洗液中IL-10、TNE-α的表达,用蛋白免疫印迹法检测肺组织Dectin-1的表达,并与对照组(正常SD大鼠)比较.结果 对照组大鼠肺组织正常.感染组肺泡结构消失,肺泡腔及间质可见大量炎性细胞浸润,与对照组相比,感染组肺组织Dectin-1及肺泡灌洗液IL-10和TNF-α的表达均呈进行性升高.结论 Dectin-1和IL-10参与了大鼠侵袭性肺部热处理光滑念珠菌感染,且IL-10在深部真菌时,起负性调节的作用.
关键词： 光滑念珠菌 Dectin-1受体 侵袭性真菌感染 IL-10 -
热处理光滑念珠菌对大鼠气道上皮细胞Dectin-1、IL-6和 TNF-α表达的影响
目的：探讨大鼠气道上皮（RTE）细胞与热处理光滑念珠菌孵育后Dectin‐1、IL‐6和TNF‐α的表达及意义。方法以体外培养的RT E细胞与热处理光滑念珠菌孵育后分别于2、4、6 h观察RT E细胞形态变化，以未与光滑念珠菌孵育的RT E细胞为对照组。用Western blot法检测Dectin‐1蛋白的表达；实时荧光定量 PCR检测IL‐6和 TNF‐α mRNA的表达；ELISA法检测上清液IL‐6和TNF‐α的分泌。结果随着孵育时间的延长，RTE细胞破坏逐渐加重及Dectin‐1、IL‐6和TNF‐α的表达呈进行性增高。孵育2 h组与对照组比较、孵育4 h组与孵育2 h组比较、孵育6 h组与孵育4 h组比较，Dectin‐1、IL‐6和T N F‐α的表达差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 RTE细胞具有天然免疫功能，其Dectin‐1参与了对热处理光滑念珠菌的识别，并激活IL‐6和T N F‐α的分泌，介导炎性反应。IL‐6起负性调节作用。
