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老年性白内障与ABO血型抗原及中医证型关系的初步研究
调查老年性白内障患者170例的中医证型及ABO血型抗原,分析二者之间的相关性,探讨本病的发病机理.结果显示本组老年性白内障患者半数以上属肝肾阴虚证候;ABO血型抗原比较显示O型抗原比例显著高于正常人群(P＜0.05).据此提出本病的中医致病因素与衰老所致肝肾阴虚,精气血不能上荣于目有关;O型抗原在一定程度上代表本病的易感性.
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新乡地区无偿献血者ABO和Rh血型抗原分布调查
目的 调查新乡地区汉族无偿献血者红细胞血型系统ABO和Rh抗原的分布情况,保证临床合理计划供血.方法 用血型群体遗传学研究方法,随机选择新乡市地区无血缘关系的汉族无偿献血者12000名,进行ABO、Rh血型系统的表现型及基因频率分布调查分析.结果 ABO血型表现型频率顺序B＞O＞A＞AB,基因频率q＞r＞p;12000名无偿献血者检出RhD阴性40人,占0.33%,且Rh(-)以Ccdee和 ccdee为多见.Rh血型表现型以CCDee和CcDEe多见,基因组合体频率Cde高.结论 新乡地区汉族人群ABO和Rh等主要血型系统抗原分布与北方汉族人群的分布基本相符,对建立稀有血型档案,保证临床合理计划用血及应急供血,具有重要的临床意义.
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输血后人类白细胞抗原与红细胞同种免疫关系初探
目的:初步探讨反复多次输血患者人类白细胞抗原(HLA)同种免疫与红细胞(RBC)同种免疫的关系,为RBC同种抗体阳性患者制定科学合理输血方案提供依据.方法:RBC同种抗体检测采用常规方法;HLA Ⅰ、Ⅱ类抗原IgG抗体检测采用ELISA法.结果:RBC不规则抗体阳性者HLA抗体阳性率为25.3(20/79), RBC同种抗体阴性者HLA抗体阳性率为10.8%(11/102),2者差异有统计学意义(χ2=6.689,P＜0.01).结论:反复多次输血后RBC同种抗体阳性者更易产生HLA抗体.
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白血病患者ABO血型抗原减弱的原因分析及血型鉴定方法
目的:分析因罹患白血病而造成患者红细胞ABO血型抗原减弱的原因,确定白血病患者的血型鉴定方法,以降低白血病患者血型鉴定发生错误的机率.方法:对我院收治的一例出现红细胞ABO血型抗原减弱的白血病患者进行ABO血型抗原的血清学正反定型试验、吸收放散试验和唾液血型物质检测.结果:该例白血病患者为A抗原减弱且抗B水平下降.终ABO血型鉴定为A型.结论:采用血清学正反定型试验、吸收放散试验和唾液血型物质检测的方法可以更为准确对ABO血型抗原减弱的个例进行血型鉴定.
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微柱凝胶结合血清学技术对ABO血型抗原极度减弱标本的筛选和鉴定
目的 探讨微柱凝胶法联合血清学技术在疾病及其亚型所引起的ABO血型抗原极度减弱标本鉴定中的应用.方法 首先对100例患者及54名献血者进行抗原性效价及抗体效价的测定,然后采用微柱凝胶法和试管法测定其中4例ABO血型抗原极度减弱的患者,并将两种检测方法所得的试验结果进行对比.结果 在100例患者中,有28例ABO血型抗原减弱患者,占患者总数的28％,其中白血病患者占43.3％(26/60),其他疾病患者占5.0％(2/40),在54例献血者中,血型抗原减弱患者占3.7％(2/54),患者的血型抗原减弱性显著高于献血者,差异有统计学意义(P<0.05).和传统的试管法相比,微柱凝胶法检测灵敏度高、测定结果更准确,差异有统计学意义(P<0.05).结论 微柱凝胶法适合检测ABO血型抗原极度减弱患者的血型,在临床上具有很高的应用价值.
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髓系白血病导致ABO血型系统抗原减弱或缺失3例临床分析
目的 探讨髓系白血病(AML)导致ABO血型系统抗原减弱或缺失的血清学特点及临床输血问题.方法 对3例血型抗体减弱或缺失患者血液样本采用血清学方法进行ABO血型鉴定、直接抗人球蛋白试验、吸收放散试验,测定唾液中血型物质.结果 3例AML患者ABO血型系统抗原出现不同程度减弱或缺失,经治疗病情缓解后,2例接受复检者ABO定型恢复正常.结论 某些AML白血病患者可能出现A和(或)B抗原减弱甚至缺失,如果此时只做正定型会导致血型误定.
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ABO血型和肿瘤标记物与乳腺癌及其骨转移的关系
目的 了解ABO血型分布特征、抗原表达和血清肿瘤标志物水平在乳腺癌中的临床诊断价值.方法 用微柱凝胶法进行ABO血型正反定型,应用吸收放散法检测患者红细胞表面的弱抗原,用血清学实验确定其亚型特征.应用化学发光免疫检测技术检测血清肿瘤标志物CA153、CEA含量和阳性率.用SPECT行全身骨扫描检查明确骨转移发生率.结果 1)乳腺癌的患病易感性以B血型为高,血型分布从高到低依次B型＞0型＞A型＞AB型,在497名乳腺癌患者中发现13例ABO血型抗原表达异常(9例为骨转移),其中11例正向定型出现弱凝集,2例不凝集,反向定型正常,正反定型不一致,经吸收放散实验确定ABO血型抗原性减弱或消失,血清学实验确定无明显亚型特征,在乳腺纤维瘤患者和健康献血者中各发现2例ABO血型抗原减弱,但血清学实验呈现较明显亚型特征.2)乳腺癌患者血清CA153、CEA含量分别为87.43μg/L和13.13μg/L、阳性率分别为73.84%和35.01%,均显著高于乳腺纤维瘤患者和健康献血者(P＜0.05);乳腺癌骨转移者血清CA153、CEA含量分别为159.48μg/L和24.23 μrg/L、阳性率分别为95.51%和56.74%,显著高于未转移患者(P＜0.05).3)乳腺癌ABO血型抗原表达与CA153、CEA水平相关.结论 血清肿瘤标记物CA153、CEA水平与乳腺癌发生相关,乳腺癌患者可出现ABO血型抗原减弱,其ABO血型分布特点亦与乳腺癌相关联,是乳腺癌发生的危险因子;若联合检测ABO血型抗原和肿瘤标记物CA153、CEA水平,能提高诊断乳腺癌的准确率,尤其对乳腺癌骨转移判断有一定的临床应用价值.
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抗人红细胞血型A抗原单链抗体原核表达及活性测定
目的构建并表达抗人红细胞血型A抗原单链小分子抗体(single-chain Fv)蛋白.方法设计合成抗重、轻链可变区引物,通过重叠延伸拼接PCR技术,在50A mAb VH和VL基因间引入连结短肽,体外构建50A ScFv基因并进行序列分析;将其克隆入表达载体pET-28a中,在大肠杆菌中诱导表达;并以免疫印迹测定重组蛋白的生物学活性.结果序列分析表明,50A ScFv基因全长747 bp,编码249个氨基酸;重组体表达产物聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,融合蛋白的相对分子质量(Mr)为29 000左右,与预期的结果一致,表达产物主要以不溶性包涵体形式存在;光密度扫描结果表明,重组蛋白占菌体总蛋白的16.2%,免疫印迹试验显示,重组小分子抗体保留了亲本mAb的特异性亲和力.结论成功地构建50A ScFv基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为进一步研制基因工程血型检定抗体奠定了基础.
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抗人红细胞血型A抗原双价小分子抗体基因的构建和表达
目的分离抗人红细胞血型A抗原单抗50A可变区基因,构建并表达其双价小分子抗体(diabody)融合蛋白.方法设计合成抗体重轻链可变区引物,通过加端PCR技术,在50A Va和VL基因两端引入连结短肽和适当的限制性酶切位点,体外构建50A diabody基因并将其克隆入pGEX-4T-2表达载体中,在大肠杆菌中诱导高效表达.用双脱氧核苷酸链末端终止法分析其核苷酸序列.结果序列分析表明,50A diabody基因全长为717bp;其中VH长366bp,编码122个氨基酸;VL长336bp,编码112个氨基酸,两者以五肽连接头相连.重组体表达产物SDS-PAGE电泳显示,其相对分子质量(Mr)为51 000左右,与预期的结果相符;光吸收(A)扫描结果表明,GST-50A diabody融合蛋白占菌体总蛋白的22.5%,产物主要以不溶性的包涵体形式存在.结论成功构建表达了50A双价小分子抗体基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为研制基因工程血型检定抗体奠定了基础.
