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模拟低氧对舌鳞癌SCC-15细胞系中SOX2和OCT4表达的影响
目的 研究模拟低氧条件对舌鳞癌SCC-15细胞增殖、周期、凋亡的影响,及SOX2和OCT4蛋白、mRNA的表达变化.方法 体外培养舌鳞癌SCC-15细胞,加入模拟低氧物去铁胺(desferrioxamine,DFO)模拟低氧环境,为模拟低氧组,同时设置不加DFO的常氧组为对照,采用CCK-8法检测SCC-15细胞的增殖率;流式细胞技术检测SCC-15细胞的周期和细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测常氧组和模拟低氧组SCC-15细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)、SOX2及OCT4蛋白的表达;qPCR检测常氧组和模拟低氧组SCC-15细胞中HIF-1α、SOX2及OCT4mRNA的表达.结果 与常氧组相比,模拟低氧组SCC-15细胞的增殖受到抑制(P＜0.05),G1期细胞所占比例上升、S+G2期细胞所占比例下降(P＜0.05),细胞凋亡率未见明显变化(P＞0.05);蛋白质印迹法结果显示,与常氧组比较,模拟低氧组SCC-15细胞中HIF-1α、SOX2、OCT4蛋白的表达均升高,且HIF-1α、OCT4蛋白的升高幅度大于SOX2蛋白,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜o.01);qPCR结果显示,两组SCC-15细胞中HIF-1α mRNA水平差异无统计学意义(P＞0.05),而模拟低氧组SCC-15细胞中SOX2、OCT4 mRNA的表达水平高于常氧组(P＜0.05).结论 DFO可以有效模拟低氧环境,促进SOX2和OCT4的蛋白和mRNA表达水平升高.
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NOD2上调自噬抑制舌鳞癌细胞增殖和迁移
目的：探讨 NOD2在雷帕霉素（Rap）诱导下上调舌鳞癌 SCC-15细胞自噬对增殖和迁移能力的影响。方法：NOD2表达载体转染 SCC-15细胞上调 NOD2表达，NOD2-shRNA 载体转染 SCC-15细胞，抑制 NOD2表达；应用 Rap 诱导 SCC-15细胞正常组、NOD2上调组和抑制组的细胞自噬活性，采用 Western blot 检测自噬标记蛋白 LC3和 Beclin-1表达变化；MTT法检测 NOD2对自噬诱导后细胞增殖的影响；划痕实验检测 NOD2对自噬诱导后细胞迁移能力的变化。结果：Rap 诱导NOD2上调组细胞中 LC3-II 和 Beclin-1表达显著增强（P ＜0．05）、诱导 NOD2抑制组细胞中 LC3-II 和 Beclin-1表达显著降低（P ＜0．05）。与对照组相比，Rap 诱导 NOD2上调组细胞生长明显抑制（P ＜0．05），迁移速率减慢；诱导 NOD2抑制组细胞增殖加快（P ＜0．05），迁移速率增快。结论：NOD2可上调舌鳞癌 SCC-15细胞自噬抑制其增殖和迁移。
