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晚期胃癌患者铂类药物化疗前后外周血MT1H mRNA的表达及其意义
目的 探讨晚期胃癌患者铂类化疗前后外周血金属硫蛋白1H(MT1H)mRNA的表达及其意义.方法 选取162例晚期胃癌患者,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测含铂方案化疗前后其外周血中MT1H mRNA的表达,同时比较化疗有效组和无效组患者化疗前后MT1H mRNA变化.结果 108例(66.67%)筛选出循环肿瘤细胞(CTC).化疗后有效组MT1H mRNA表达水平显著低于无效组(P < 0.05):无效组化疗后MT1H mRNA表达水平明显高于化疗前(P<0.05).结论 含铂方案化疗无效的晚期胃癌患者MT1H mRNA表达水平升高,提示MT1H的表达可能与铂类药物继发性耐药有关.
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金属硫蛋白1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达及其对细胞增殖的影响
目的 检测金属硫蛋白1 H(MT1H)在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达,分析MT1H与临床病理特征的关系,并探讨MT1H对人骨肉瘤细胞U2OS增殖能力的影响及其机制.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MT1 H在儿童和青少年骨肉瘤和骨良性疾病中表达情况,分析MT1H表达和骨肉瘤临床病理特征之间的关系.在体外将MT1H基因转染人骨肉瘤细胞U2OS,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Wes-tern blot方法检测MT1 H mRNA和蛋白的表达情况,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,采用Western blot方法检测核因子(NF)-κB、抑制性 κB(IκB)-α蛋白表达情况.结果 MT1H在骨良性疾病和骨肉瘤血清中的表达水平分别为(0.51±0.52)μg/L和(2.17±0.78)μg/L,其在骨肉瘤血清中的表达水平明显升高(t=-8.966,P<0.05).MT1 H在Ⅰ~ⅡA期、ⅡB~Ⅲ期骨肉瘤血清中的表达水平分别为(1.98±0.69)μg/L、(2.45±0.82)μg/L,其表达水平呈逐渐升高趋势,差异有统计学意义(t=-2.343,P<0.05).转染MT1H基因后,骨肉瘤细胞MT1H mRNA和蛋白表达均升高(均P<0.05).MTT结果显示,与空白对照组、空质粒转染组相比,MT1H真核质粒转染骨肉瘤细胞系U2OS 72 h后,细胞增殖加快.空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组A值分别为0.38±0.03、0.36±0.03、0.42±0.03;与空白对照组、空质粒转染组相比,MT1H转染组A值升高(F=4.213,P<0.05).Western blot检测显示,空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组细胞中NF-κB的相对表达量分为0.56±0.05、0.53±0.05、0.92±0.07,IκB-α蛋白的相对表达量分别为0.64±0.06、0.62±0.09、0.34±0.08,与空白对照组、空质粒转染组相比,MT1 H转染组NF-κB蛋白表达上调、IκB-α蛋白表达下调(F=44.581、14.927,均P<0.05).结论 MT1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中表达升高,并且分期越晚,表达越高,体外可能通过增强NF-κB信号通路,促进细胞增殖.
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金属硫蛋白1H在晚期非小细胞肺癌中的表达及预后分析
目的:研究分析晚期非小细胞肺癌中金属硫蛋白1H (MT1H)的表达及其与临床病例的关系,并观察MT1H与病人的生存关系.方法:收集经病理确诊的40例晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者经含顺铂方案化疗前后的外周静脉血,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测MT1H的表达,并将疗效和病人的生存资料与MT1H的表达进行比较.各种临床特征的分析采用t检验和单因素方差分析,用Kaplan-meier法和Cox回归进行生存分析.结果:化疗前MT1H表达水平明显低于化疗后(P＜0.05),且与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关(P＜0.05).有效者化疗前后的表达差异与无效者比较差异无统计学意义(P＞0.05).MT1H阴性组和阳性组中位生存期分别为304 d和246 d.Kaplan-meier分析显示MT1H阴性组和阳性组的总体生存率无差别,Cox回归模型显示年龄段有独立预后作用.结论:①晚期非小细胞肺癌中MT1H表达与肿瘤的分化程度及淋巴是否结转移有相关关系,可以作为判断预后的实验室指标及临床确定治疗方案的参考依据；②MT1H阳性表达显示可能存在耐药性问题.
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人MT1H基因对肺腺癌细胞A549增殖的影响及其机制
目的 研究外源性人金属硫蛋白1H(MT1H)基因稳定转染对肺腺癌细胞A549生长的影响及其机制.方法 构建MT1H基因真核表达质粒pcDNA3.1(-)-MT1H,以脂质体法转染A549细胞,经G418筛选,获得阳性单克隆细胞.用RT-PCR和Western blot技术检测转染前后MT1H mRNA和蛋白表达,MTT实验检测其增殖能力的变化,流式细胞仪分析细胞周期时相分布.然后RT-PCR检测cyclinD1的表达.结果 MT1H在A549细胞中获得表达.与未转染组和空质粒转染组比较,pcDNA3.1(-)-MT1H转染组细胞增殖速度明显增快,G0/G1期细胞减少,S期细胞增多,cyclinD1 Mrna水平明显升高.结论 MT1H能够促进肺腺癌细胞A549增殖,可能和上调cyclinD1促使细胞进入S期增多有关.
