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乙醛脱氢酶1A1表达与乳腺癌淋巴结转移及预后关系研究
目的:研究乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase,ALDH1)亚型ALDH1A1在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌淋巴结转移和临床预后的关系.方法:采用免疫组化方法检测72例原发性乳腺癌组织中ALDH1A1的表达,分析其表达与乳腺癌病人淋巴结转移、肿瘤分化、TNM分期及病人总生存期等临床因素间的关系.结果:72例乳腺癌病人中,淋巴结转移组(n=37)ALDH1A1阳性表达21例,占56.8％；非淋巴结转移组(n=35)ALDH1A1阳性表达8例,占22.9％,两组具有统计学差异(P＜0.01).ALDH1A1在伴淋巴结转移乳腺癌病人的表达显著高于不伴淋巴结转移者(P＜0.01)；但与病人的年龄、病理类型、肿瘤分级、TNM分期、分化程度和受体状态不相关(P＞0.05).Kaplan-Meier生存分析表明,ALDH1A1高表达组病人的总生存期、无病生存期、5年生存率和5年无病生存率均显著低于ALDH1A1低表达组,两组具有统计学差异(P＜0.05).单因素及多因素统计分析显示,ALDH1A1表达、淋巴结转移和TNM分期是与乳腺癌预后相关的重要独立因素,ALDH1A1高表达组病人预后显著差于ALDH1A1低表达组(P＜0.05).结论:乳腺癌ALDH1A1表达与淋巴结转移及预后显著相关,可作为预测乳腺癌淋巴结转移以及判断病人临床预后的重要指标.
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乙醛脱氢酶1a1在早期胰腺癌的表达及意义
目的 探讨胰腺癌组织中乙醛脱氢酶1a1(ALDH1a1)的蛋白表达水平与胰腺癌患者临床病理之间的关联.方法 通过免疫组化法检测31例胰腺癌组织及其癌旁组织ALDH1a1的蛋白表达,用Kaplan-Meier法分析ALDH1a1表达水平对胰腺癌患者无病生存期的影响.结果 胰腺癌组织中ALDH1a1蛋白的阳性程度高于其癌旁正常组织;ALDH1a1蛋白表达高的胰腺癌患者无病生存期短;ALDH1a1蛋白高表达与肿瘤的低分化程度、大肿块相关,与Ki67、胎盘型谷胱甘肽-S-转移酶(GSTπ)、肺耐药相关蛋白(LRP)表达呈正相关.结论 检测胰腺癌组织中ALDH1a1的表达具有预测患者预后的价值.
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miR-23b转染宫颈癌干细胞顺铂化疗敏感性变化及其机制
目的 观察微小RNA-23b(miR-23b)转染对宫颈癌干细胞(CD133+CaSki细胞)顺铂(CDDP)化疗敏感性的影响,并探讨其机制.方法 流式细胞术分选宫颈癌细胞系CaSki中的CD133+CaSki细胞,荧光定量PCR检测CD133+CaSki细胞和宫颈癌非干细胞(CD133-CaSki细胞)中的miR-23b,并预测其靶基因.将CD133+CaSki细胞分为mimics组、NC组、空白对照组,mimics组转染miR-23b模拟物(miR-23b mimics),NC组转染miR-23b阴性对照物(miR-23b NC),空白对照组不做任何处理,之后分别加入不同浓度的CDDP,CCK-8法检测CDDP对各组CD133+CaSki细胞的半数抑制浓度(IC50).Western blotting法检测CD133+CaSki、CD133-CaSki、转染miR-23b mimics的CD133+CaSki细胞中乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)蛋白.将人胚胎肾细胞系HEK-293T分为wt组、mut组、空载体组,wt组转染miR-23b mimics、内参质粒SV40、pmirGLO-ALDH1A1-3′-UTR wt(野生型)荧光素酶质粒,mut组转染miR-23b mimics、内参质粒SV40、pmirGLO-ALDH1A1-3′-UTR mut(突变型)荧光素酶质粒,空载体组转染miR-23b mimics、内参质粒SV40、pmirGLO空载体质粒,采用双荧光素酶试验检测各组细胞中转染质粒编码蛋白的萤光强度.结果 CD133+CaSki、CD133-CaSki细胞中miR-23b的相对表达量分别为0.29±0.05、1.09±0.14,两者相比,P<0.01;miR-23b的预测靶基因为ALDH1A1基因.CDDP对mimics组、NC组、空白对照组细胞的IC50分别为(8.18±1.02)、(13.98±1.48)、(14.15±1.27)μg/mL,mimics组与NC组和空白对照组相比,P均<0.05.CD133+CaSki、CD133-CaSki、转染miR-23b mimics的CD133+CaSki细胞中ALDH1A1蛋白相对表达量分别为0.29±0.06、0.12±0.03、0.13±0.04,ALDH1A1蛋白在CD133+CaSki细胞中的相对表达量与CD133-CaSki细胞和转染miR-23b mimics的CD133+CaSki细胞相比,P均<0.05.HEK-293T细胞中,wt组、mut组、空载体组转染质粒编码蛋白的萤光强度分别为0.41±0.06、1.12±0.15、1.02±0.15,wt组转染质粒编码蛋白的相对荧光强度与mut组和空载体组相比,P均<0.05.结论 在CD133+CaSki细胞中,miR-23b表达水平降低,CDDP的IC50升高,AL-DH1A1蛋白表达增加;CD133+CaSki细胞转染miR-23b后,CDDP的IC50降低;HEK-293T细胞转染miR-23b后,抑制ALDH1A1基因表达.
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ALDH1A1在舌癌及淋巴结中的表达及其临床意义
目的:检测乙醛脱氢酶1A1 (aldehyde dehydrogenase1A1,ALDH1A1)在舌鳞状细胞癌(tongue squamouscell carcinoma,TSCC)原发灶及颈淋巴结标本中的表达水平,分析其与患者临床病理特征及预后的关系.方法:采用免疫组化SP法检测50例舌鳞状细胞癌原发灶和10例正常舌组织、29例转移淋巴结和9例未转移淋巴结标本中ALDH1A1的表达水平.结果:舌鳞状细胞癌原发灶中ALDH1A1表达高于正常舌组织,差异有统计学意义(P＜0.05);转移淋巴结中ALDH1A1表达高于未转移淋巴结,差异有统计学意义(P＜0.05).在舌鳞状细胞癌原发灶中,ALDH1A1表达与患者的临床分期、有无淋巴结转移、原发灶大小及组织学分级有关(P＜0.05);在淋巴结中,ALDH1A1表达与患者的临床分期、有无淋巴结转移及原发灶大小有关(P＜0.05).Kaplan-Meier分析表明舌鳞状细胞癌原发灶ALDH1A1高表达提示不良预后.结论:ALDH1A1的表达与舌鳞状细胞癌的生物学行为及预后密切相关,有望作为舌鳞状细胞癌预后相关因子,可能为舌鳞状细胞癌提供新的治疗靶点.
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ALDH1A1在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义
目的 探讨ALDH1A1在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义.方法 收集2004年至2008年在中国医科大学附属第一医院乳腺外科病房行根治性手术的158例有完整随访资料的乳腺浸润性导管癌组织石蜡标本,采用免疫组化SP法检测ALDH1A1蛋白在乳腺癌组织中的表达,分析其与临床病理因素及预后的关系.结果 ALDH1A1主要表达于细胞浆.乳腺癌浸润性导管癌组织中ALDH1A1表达阳性率为56.3％.乳腺癌浸润性导管癌组织中ALDH1A1的表达与年龄、绝经状态、肿瘤大小、临床分期、临床分级无关(P＜0.05),而与淋巴结转移相关(P=0.009).ALDH1A1阳性表达患者无病生存时间(DFS)和总生存时间(OS)均短于ALDH1A1阳性表达患者,差异具有有统计学意义(P=0.022和P=0.011).Cox比例风险回归分析显示ALDH1A1是影响乳腺浸润性导管癌患者预后的危险因素(P=0.025和P=0.014),但不是独立危险因素(P=0.892和P=0.489).结论 ALDH1A1蛋白在乳腺浸润性导管癌的发生、发展中起一定作用,与淋巴结转移密切相关,可能是影响乳腺浸润性导管癌预后的重要指标.
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ALDH1A1基因表达沉默对鼻咽癌细胞的增殖抑制作用
目的:探讨干扰乙醛脱氢酶1A1(ALDH1A1)基因表达后对鼻咽癌5-8F和CNE2细胞生长、增殖的影响.方法:构建ALDH1A1 siRNA 表达质粒稳定转染鼻咽癌5-8F和CNE2细胞,Western blot 检测干扰ALDH1A1基因蛋白表达水平.MTT、平板克隆、裸鼠成瘤实验检测干扰ALDH1A1基因前后鼻咽癌5-8F和CNE2细胞的增殖、克隆及成瘤能力.结果:与空白组和阴性对照组相比,干扰ALDH1A1表达后5-8F和CNE2细胞增殖、克隆及肿瘤形成能力明显受到抑制.结论:干扰ALDH1A1基因表达,可抑制鼻咽癌细胞的生长、增殖、克隆及成瘤能力.
