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桔梗边角料中桔梗多糖的分离纯化研究
目的 优选桔梗边角料中桔梗多糖的分离纯化工艺.方法 以多糖损失率、蛋白脱除率为指标,比较Sevag法和三氯乙酸法(TCA)对桔梗多糖脱蛋白的效果；以脱色率、多糖保留率为指标,比较不同质量分数的活性炭对桔梗多糖脱色的效果；采用柱层析分离纯多糖.结果 桔梗多糖的佳分离纯化工艺为以Sevag法脱蛋白、2％活性炭脱色,依次过DEAE-52纤维素和SephadexG-200分离纯化得PG和PG2两个多糖组分,其中PG相对分子质量为11749,主要由果糖组成.结论 所建立的分离纯化方法可行.
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桔梗多糖对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用及机制研究
目的 研究桔梗多糖(PGP)对H2O2致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用机制.方法 建立H2O2诱导PC12细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率;比色法测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;DCFH-DA检测细胞内ROS;qPCR、Western Blot方法分别检测NOX2、p22phox和Rac mRNA和蛋白的表达.结果 与模型组相比,PGP预处理24h后,加入终浓度为600μmol/L H2O2处理2h,LDH、MDA含量和细胞内ROS减少,SOD与GSH-Px活性增强,同时,PGP下调NOX2、p22phox和Rac mRNA和蛋白的表达水平.结论 PGP对H2O2诱导的PC12细胞的氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制NADPH氧化酶2(NOX2)过表达有关.
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正交试验法优选桔梗非药用部位多糖的提取工艺
目的 优选桔梗非药用部位多糖的佳提取工艺.方法 以桔梗多糖得率为指标,采用正交设计法考察料液比、浸提次数、浸提时间对提取工艺的影响,以确定佳提取工艺.结果 佳提取工艺参数为:加25倍量水,提取3次,每次1 h.结论 优选的提取工艺稳定、可行.
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不同产地桔梗中桔梗皂苷D及总多糖的含量比较
目的 比较不同产地桔梗中的桔梗皂苷D及总多糖的含量.方法 高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法分别测定桔梗中的桔梗皂苷D和桔梗总多糖.结果 各产地桔梗药材中桔梗皂苷D含量均符合药典标准;不同产地的桔梗中桔梗皂苷D含量和多糖含量存在一定相关性.结论 通过多指标评价不同产地的桔梗药材质量,可以为桔梗药材的选用提供依据.
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基于Centramate超滤系统-HPLC-ELSD分离及测定桔梗多糖含量研究
目的：建立桔梗多糖分离及含量测定方法。方法运用 Centramate 超滤系统分离桔梗水提部分不同分子量的多糖组分，采用 HPLC-ELSD法测定桔梗多糖含量。结果本文建立的方法线性关系良好， r ＝0.9991，线性范围为19.96μg ～19.76μg （ n ＝6），加样回收率为98.19％，RSD＝2.01％。结论本方法灵敏、准确、重复性好、回收率高、操作简便。
关键词： 桔梗多糖 Centramate超滤系统 HPLC ELSD -
苯酚-硫酸法定量测定桔梗多糖的研究
目的 建立桔梗多糖含量定量测定方法,为评价桔梗药材及新选育品种的质量提供方法.方法桔梗样品用水提取,经多级处理除去杂质制得桔梗精制多糖,精制多糖溶解与苯酚-硫酸试剂显色;用精制多糖测得桔梗多糖与葡萄糖的换算因子,采用苯酚-硫酸比色法测定桔梗样品中多糖的含量.结果建立了一种苯酚-硫酸法测定桔梗多糖质量分数的方法,其平均回收率为97.54% ,RSD=1.44%.对不同来源桔梗中多糖的质量分数进行测定,其范围为8.54%～20.28%.结论此方法简便可行,桔梗多糖供试液在4 h内显色稳定,重复性较好,可作为桔梗多糖的测定方法.
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桔梗双飞片产业化生产工艺研究
建立桔梗双飞片的产业化生产工艺技术参数.方法:以桔梗皂苷D、桔梗多糖为质量评价指标,结合桔梗双飞片外观性状,系统考察桔梗药材大小的选择、佳切片程度和厚度、干燥温度与干燥时间等,并通过中试生产,建立桔梗双飞片的产业化生产工艺技术参数.结果:桔梗双飞片的产业化生产工艺为:选取直径1.5 cm左右的药材,用水淋洗后闷润,并保持药材湿润,当含水量达到55％～60％时,取出进行切制；用自制轧扁机轧扁成1.5 mm厚的双飞片,再放入低温烘干机,在60℃烘8～9h取出,放凉,密封包装即可.结论:桔梗双飞片产业化生产工艺稳定,提高了生产效率,产品质量较好.
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桔梗多糖软模板法制备纳米硒的抗氧化及抗肿瘤活性研究
目的:研究纳米硒的抗氧化及抗肿瘤活性.方法:以桔梗多糖为模板在温和的条件下制备纳米硒(NanoSeO).采用邻苯三酚自氧化法测定纳米硒—桔梗多糖对超氧阴离子自由基的清除作用,水杨酸法测定羟自由基清除作用,紫外法测定DPPH自由基清除作用,MTT法研究其体外抗肿瘤活性.结果:纳米硒和桔梗多糖均显示出与浓度正相关的抗氧化活性,且纳米硒的抗氧化活性比桔梗多糖更强.纳米硒对HepG-2细胞显示出更强的体外抗肿瘤活性,IC50值为123.7 μg/ml.结论:纳米硒—桔梗多糖具有很强的抗氧化和抗肿瘤活性,为开发纳米硒—桔梗多糖的功能产品提供理论支撑.
