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益气除痰方降低肺癌Caspase6、Lamin B1表达诱导细胞凋亡的机制
目的 研究益气除痰方对肺癌A549裸鼠移植瘤天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶6(Caspase 6)及核纤层蛋白B1 (Lamin B1)表达的影响.方法 选用BALB/c裸小鼠40只,将肺癌A549细胞悬液接种于小鼠背侧皮下建立肺癌模型,接种第7天将小鼠随机分为5组,即模型组(生理盐水组),顺铂注射液组(0.002 g/kg),益气除痰方低、高剂量组(3.0、6.0 g/kg),联合用药组(3.0 g/kg益气除痰方+0.002 g/kg顺铂),每组8只.中药灌胃,每天1次,连用21 d;顺铂注射液腹腔注射,每天1次,连用7d.干预第22天,处死所有小鼠,测量瘤体质量、体积,并采用免疫组化及RT-PCR法检测肿瘤组织中Caspase 6、Lamin B1的表达.结果 益气除痰方高剂量组和联合用药组肿瘤体积、肿瘤质量明显下降,免疫组织化学法及RT-PCR法检测结果显示,肿瘤组织中Caspase 6、Lamin B1的表达均降低,与模型组比较,差异有显著性(P＜0.01);联合用药组与顺铂注射液组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论 益气除痰方可抑制小鼠A549肺癌,与化疗药物联用有一定的增效作用,其机制可能与通过降低Caspase 6、Lamin B1的表达诱导细胞凋亡有关.
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小鼠睾丸支持细胞Attractin基因的抗氧化和抗凋亡作用的初步研究
目的:观察Attractin(Atrn)基因不同程度缺失对小鼠睾丸支持细胞抗氧化和抗凋亡的作用,及其对细胞超氧化物歧化酶(SOD)、caspase6表达的影响. 方法:观察Atrn基因正常表达、部分缺失、完全缺失的三组细胞(psiRNA-TM4、psiAtrn-TM4、mu-SC)的细胞凋亡指数;采用荧光定量PCR、Western印迹技术检测SOD、caspase6 mRNA及蛋白表达水平;采用化学比色法检测细胞中SOD活性和丙二醛(MDA)含量. 结果:与对照组psiRNA-TM4比较,抑制Atrn基因的表达后,支持细胞的SOD mRNA表达水平下降,psiAtrn-TM4、mu-Sc组细胞SOD mRNA表达量分别下降了70.76％和92.58％,caspase6 mRNA表达水平上升,分别为对照组的5.28倍和2.97倍;蛋白水平的变化趋势与mRNA结果一致,psiAtrn-TM4及mu-Sc组细胞中SOD蛋白的表达分别下降了65.11％和71.0％,caspase6蛋白表达分别为对照组的3.4倍和2.5倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).抑制Atrn基因表达后,psiAtrn-TM4、mu-SC组细胞凋亡率分别增加16.22％和22.03％,SOD活性分别下降23.00％和39.37％,mu-SC组MDA含量增加155.22％,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论:Atrn基因对睾丸支持细胞功能的影响是通过多途径实现的,抗氧化应激以及调控凋亡途径可能在其中起着重要作用.
