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氟暴露对人成骨细胞系Saos-2细胞微小RNA-200c表达及其靶点的影响
目的 探讨氟暴露对于人成骨细胞系Saos-2细胞(简称Saos-2细胞)微小RNA (miR)-200c表达及其靶点的影响.方法 采用DMEM/F-12培养液,体外培养Saos-2细胞.按培养液中氟化钠(NaF)剂量将Saos-2细胞分为对照组(0 mg/L)、染氟组(4 mg/L),染氟培养48 h后收集细胞.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Saos-2细胞中miR-200c表达,碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)及miR-200c作用靶点人第10号染色体缺失磷酸酶(PTEN)、双特异性磷酸酶(DUSP1)mRNA的表达;采用蛋白免疫印迹法(Westem blot)检测PTEN、DUSP1蛋白表达.结果 染氟组Saos-2细胞中ALP、BGP mRNA和miR-200c表达(23.60±1.87、9.41±0.94、8.61±0.26)高于对照组(1.00±0.11、1.00±0.07、1.00±0.12),组间比较差异有统计学意义(t=-24.084、-18.388、-8.687,P均＜0.05);PTEN和DUSP1 mRNA表达(0.63±0.02、0.38±0.02)低于对照组(1.02±0.24、1.02±0.24),组间比较差异有统计学意义(t=3.327、5.454,P均＜0.05).染氟组Saos-2细胞PTEN、DUSP1蛋白表达(1.19±0.10、0.83±0.07)低于对照组(1.81±0.14、1.44土0.25),组间比较差异有统计学意义(t=6.250、4.171,P均＜0.05).结论 氟暴露能够使Saos-2细胞miR-200c表达水平升高,通过miR-200c作用于PTEN和DUSP1,下调PTEN、DUSP1 mRNA与蛋白表达水平.
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针刺介入时机对缺血性中风大鼠脑组织中PTEN、p-AKT和p-GSK3β的影响
目的 观察不同针刺介入时间对局灶性脑缺血中风模型大鼠脑组织细胞中双特异性磷酸酶(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK3β)的影响.方法 将200只成年雄性SD大鼠随机分为A组(假手术组)、B组(模型组)、C组(造模后2 h针刺组)、D组(造模后72 h针刺组)和E组(造模后168 h针刺组),每组40只.除A组外,其余各组均采用线栓法制备大鼠局灶性永久性脑缺血模型.各组术后1 d、3 d、7 d及14 d分别采用Garcia复合评分法评定神经功能,并采用Western Blot法和RT-PCR法检测脑组织中PTEN、p-AKT和p-GSK3β基因的转录和相应蛋白的表达情况.结果 与B组比较,C组和E组在不同时间点(术后1 d、3 d、7 d和14 d)Garcia复合评分均显著提高(P<0.01).D组术后7 d和14 d Garcia复合评分与C组比较,差异有统计学意义(P<0.05).E组术后3 d、7 d和14 d Garcia复合评分与C组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05).B组在不同时间点(术后1 d、3 d、7 d和14 d)PTEN、p-AKT、p-GSK3β蛋白表达及PTEN mRNA、p-AKT mRNA、p-GSK3βmRNA表达与A组和C组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05).D组和E组术后3 d、7 d和14 d PTEN、p-AKT、p-GSK3β蛋白表达与C组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05).D组和E组在不同时间点(术后1 d、3 d、7 d和14 d)PTEN mRNA、p-AKT mRNA、p-GSK3βmRNA表达与C组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05).结论 针刺可显著降低缺血脑组织神经细胞中PTEN的表达,显著升高p-AKT和p-GSK3β的表达,从而抑制细胞凋亡,保护和修复受损神经元细胞,且越早进行针刺,效果越好.
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双特异性磷酸酶在肿瘤中的研究进展
双特异性磷酸酶(DUSP)是酪氨酸磷酸酶家族中的一员,其参与生物体内许多基本的生理活动.近年关于DUSP在肿瘤发生发展过程中的研究受到关注.不同DUSP型别在肿瘤中的作用各异,即使同种DUSP在各种肿瘤发生发展中的作用也不同.本文就DUSP在肿瘤诊治中的研究进展做一综述.
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抑癌基因PTEN与人类肿瘤关系的研究现状
PTEN基因是迄今为止发现的第一个具有双特异性磷酸酶(DPS)活性的抑癌基因,该基因在细胞的生长、增殖、迁移和细胞凋亡中具有重要的生物学功能.PTEN基因的突变及失活与肝癌、子宫内膜癌、卵巢癌、胃癌等多种肿瘤的形成密切相关.现将PTEN基因的结构、功能、作用机制及其与肿瘤发生、发展的关系作一综述.
