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高效液相色谱检测聚乙二醇化天花粉蛋白方法比较
目的:建立聚乙二醇化天花粉蛋白纯度的检测方法.方法:使用分子筛色谱法和反相高效液相色谱法测定了聚乙二醇天花粉蛋白.结果:聚乙二醇天花粉蛋白纯度分别为100%和98.14%.结论:高效液相色谱法简单易行、准确、灵敏度高,适用于聚乙二醇化天花粉蛋白纯度检测.
关键词: SEC-HPLC RP-HPLC 聚乙二醇化天花粉蛋白 纯度 -
不同方法测定聚乙二醇化天花粉蛋白的修饰度
目的:建立测定PEG化天花粉蛋白修饰度的方法.方法:利用电泳法初步确定PEG-TCS的分子量、用质谱法进行验证;通过TNBS法和荧光胺法测定其修饰度.结果:从质谱法和电泳法可知PEG-TCS的理论修饰度为9.0909%,TNBS法测得的修饰度为9.8613%%,荧光胺法所测得值为8.5955%.TNBS法测定结果尽管偏大,但是操作简单,不需要专门的仪器;荧光胺法需要荧光分光光度计,且丙酮易挥发.结论:TNBS法可作为测定PEG-TCS修饰度的方法.
关键词: 修饰度 聚乙二醇化天花粉蛋白 TNBS 荧光胺 -
聚乙二醇化天花粉蛋白抗生育活性及其过敏反应试验
目的:分析聚乙二醇修饰对天花粉蛋白抗生育活性和引起过敏反应的影响.方法:妊娠11-12 d小鼠静脉给药,48 h后解剖,计算引产率;豚鼠药物致敏5次,末次致敏14 d、21 d攻击,观察0.5 h内过敏反应情况;大鼠皮内接种抗血清,24 h后抗原加染料攻击,观察染料渗出情况.结果:与天花粉蛋白相比,聚乙二醇化天花粉蛋白在较低浓度(0.5 mg/kg)就可达到引产目的(引产率>85%),且引起豚鼠和大鼠过敏反应的程度较低.结论:聚乙二醇化修饰能提高天花粉蛋白的体内活性,降低其免疫原性,在临床中有广阔的应用前景.
关键词: 聚乙二醇化天花粉蛋白 抗生育活性 全身过敏反应 被动皮肤过敏反应