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滋阴泻火方对性早熟模型大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的影响
目的:观察滋阴泻火方对性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响.方法:26d雌性SD大鼠60只,随机分成正常对照(N)组、性早熟模型(P)组、亮丙瑞林(L)组、中药大剂量(C-H)组、中药中剂量(C-M)组和中药小剂量(C-L)组.除N组外,其余组建立由N-甲基-DL-天冬氨酸(NMA)诱导的性早熟大鼠模型.L组、C-H组、C-M组和C-L组在建立模型的同时,分别用L、C-H、C-M及C-L进行干预.测定各组大鼠卵巢、子宫指数,卵巢黄体出现率,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH-RmRNA表达水平.结果:①与N组比较,P组、C-L组上述观察指标显著升高(P＜0.05),而L组、C-H组和C-M组未见统计学差异(P＞0.05).②与L组比较,C-H组、C-M组以上指标未见统计学差异(P＞0.05).结论:滋阴泻火方能抑制NMA诱导的雌性大鼠性早熟的发生,并使其维持在正常青春前期状态,其作用与亮丙瑞林相似.其干预机制可能是通过下调下丘脑GnRH和垂体GnRH-R基因的表达,从而抑制下丘脑-垂体-性腺轴的功能来实现的.
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疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R表达的影响
目的:观察疏肝泻火方对雌性性早熟大鼠性腺、雌激素和下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)表达的作用.方法:取SD雌性大鼠60只,随机分为正常对照组、性早熟模型组、亮丙瑞林100μ g/ks组、疏肝泻火方8.5g/kg、4.25g/kg、2.13g/kg组共6组,采用NMA建立性早熟模型,予不同剂量的疏肝泻火方和亮丙瑞林干预,观察性腺发育情况;测定血FSH、LH水平和下丘脑GnRH、垂体GnRH-R的mRNA表达.结果:性早熟模型组大鼠阴道口开放和出现第一个动情间期的时间分别为32.10±1.56天、35.24±1.46天,均较正常对照组提前,性早熟模型组第一只大鼠出现阴道口开放和第一个动情间期时,疏肝泻火方2.125g/kg组出现一只,其余各组均未见.各组子宫指数和卵巢指数均较模型组显著降低、血清FSH和LH分泌量显著降低,下丘脑GnRH mRNA、垂体GnRH-R mRNA的表达量显著降低,疏肝泻火方8.5g/kg组与亮丙瑞林100μμg/kg组疗效相当,疏肝泻火方2.13g/kg、4.25g/kg、8.5g/kg组的作用呈现依次递增的趋势.结论:疏肝泻火方可以降低下丘脑GnRH mRNA和垂体GnRH-R mRNA的表达水平,降低雌激素水平,抑制性腺的发育,延缓HPG轴的启动.
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大黄不同萃取物对大鼠下丘脑和腺垂体超微结构及其GnRH、GnRH-R和FSHβ表达的影响
目的:比较大黄不同萃取物对成年雌性大鼠下丘脑、腺垂体超微结构及功能的影响,筛选大黄具有生殖毒性的主要萃取物.方法:采用极性梯度萃取法制备大黄水提物的氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水溶物.雌性成年大鼠随机分为正常对照组、大黄水提物组和各萃取物组,连续灌胃给药60天.采用透射电镜观察下丘脑、腺垂体超微结构病理变化;免疫组化法检测下丘脑弓状核中GnRH、腺垂体促性腺细胞中GnRH-R和FSHβ表达水平.结果:(1)超微结构:电镜下,与正常对照组相比,大黄水提物(生药4.0 g/kg)、氯仿(4.44 mg/kg)和乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)组均出现不同程度的病理变化,下丘脑弓状核神经元出现核仁增大,内质网、线粒体数目增多,同时伴有染色质边集和溶酶体增多;腺垂体促性腺细胞可见核膜断裂,线粒体肥大,内质网和高尔基体扩张,以及由粗面内质网组成的同心圆性膜性小体.正丁醇萃取物(79.43 mg/kg)和水溶物(835.72 mg/kg)组超微结构病变不明显.(2)大黄水提物(生药4.0 g/kg)组、氯仿(4.44 mg/kg)和乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)组GnRH和FSHβ表达明显高于正常对照组,大黄水提物(生药4.0g/kg)组GnRH-R表达明显低于正常对照组.大黄水提物(生药4.0 g/kg)组GnRH和FSHβ表达明显高于正丁醇萃取物(79.43mg/kg)和水溶物(835.72mg/kg)组,乙酸乙酯萃取物(40.96 mg/kg)组GnRH和FSHβ表达高于正丁醇萃取物(79.43 mg/kg)组,其余各组间比较差异均无统计学意义.结论:氯仿(4.44 mg/kg)和乙酸乙酯萃取物(40.96mg/kg)具有与大黄水提物相类的毒性作用,是大黄主要的生殖毒性萃取物.
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大黄对幼年雌性大鼠下丘脑、垂体结构及激素水平的影响
目的:观察长期应用大黄水煎液对雌性幼年大鼠下丘脑、垂体结构及功能的影响,探讨大黄生殖毒性的作用机制.方法:4周龄SD大鼠,随机分为正常对照组,大黄水煎液0.25、0.5、1.0、2.0g/kg组(按生药计算),连续给药30d.取下丘脑、垂体,光镜观察下丘脑弓状核神经元、垂体促性腺细胞一般病理变化;透射电镜观察超微病理的变化;免疫组化-SP法检测大鼠下丘脑Gn-RH、垂体GnRH-R的表达水平.结果:(1)组织结构:与正常对照组相比,大黄水煎液各剂量组大鼠下丘脑、垂体均出现不同程度的病变,其中,下丘脑弓状核神经元出现染色质边际、染色质溶解、核中央透明区,可见红色神经元、鬼影细胞;垂体细胞整体数目减少,嗜酸性细胞增生,嗜碱性细胞减少,细胞排列不规则,血窦微扩张;2.0g/kg组电镜下可见下丘脑神经元胞质变少,核糖体、高尔基体消失、线粒体减少等;垂体促性腺细胞间隙增大、线粒体模糊、核不规则、异染色质增多、核膜模糊等.不同剂量间比较:2.0g/kg组病变为严重,1.0g/kg组次之,0.5g/kg组较轻,0.25g/kg组病变不明显.(2)大黄0.5、1.0和2.0g/kg组GnRH和GnRH-R的表达水平显著低于正常对照组;0.25g/kg组GnRH和GnRH-R的表达水平与正常对照组比较无显著性差异.结论:长期灌胃较大剂量大黄水煎液可致幼年雌性大鼠下丘脑、垂体结构发生病理性改变、降低下丘脑和垂体的分泌功能,这可能是影响幼年雌性大鼠性器官发育及功能主要因素之一.
