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PI3K特异性抑制剂LY294002增强rsTRAIL蛋白对A549细胞的杀伤作用
目的：探讨磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）参与非小细胞肺癌A549细胞株抵抗重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（rsTRAIL）蛋白诱导凋亡的机制，寻找增强 rsTRAIL 蛋白杀伤非小细胞肺癌细胞的新方法。方法：选取对数生长期 A549细胞，随机分为 rsTRAIL蛋白组和 PI3K特异性抑制剂 LY294002联合 rsTRAIL蛋白（LY294002＋rsTRAIL蛋白）组。MTT法检测2组 A549细胞生长抑制率，流式细胞技术检测2组 A549细胞周期和细胞凋亡的变化，蛋白质印迹法检测2组 A549细胞中 p-Akt（Ser473）、c-FLIPL、Bcl-2和 Bax蛋白表达水平。结果：与 rsTRAIL蛋白组（5.16％±0.32％）比较，LY294002＋rsTRAIL蛋白组 A549细胞生长抑制率（74.6％±2.63％）明显升高（P＜0.05）。与 rsTRAIL 蛋白组比较，LY294002＋rsTRAIL 蛋白组处理2 h 后G0/G1期A549细胞百分比增加（P＜0.05），S 期细胞百分比降低（P＜0.05）。LY294002＋rsTRAIL 蛋白组A549细胞凋亡率为（61.50±3.02）％，显著高于 rsTRAIL蛋白组（3.21％±0.96％）（P＜0.05）。蛋白质印迹检测，与 rsTRAIL蛋白组比较，LY294002＋rsTRAIL蛋白组 A549细胞中 p-Akt、c-FLIPL和Bcl-2蛋白表达水平降低（P＜0.05），Bax/Bcl-2比值升高（P＜0.05）。结论：LY294002能够抑制 PI3K活性，增强 rsTRAIL蛋白对A549细胞的杀伤作用。
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得力生诱导肺癌细胞株A549细胞凋亡及其对survivin基因表达的影响
目的 探讨中成药得力生诱导肺癌细胞株A549细胞凋亡及其对survivin基因表达的影响.方法 采用MTT法测定细胞增殖抑制率,在显微镜下观察细胞凋亡的形态特点,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)法测定survivin mRNA的表达.结果 (1)得力生在4 mL/L～100 mL/L浓度范围内可抑制A549细胞增殖,此作用与药物体积浓度无明显相关关系,但该作用具有时间依赖性(r=0.991,P=0.001).(2)20 mL/L浓度的得力生在体外可诱导A549细胞凋亡,且其作用具有时间依赖性(r=0.997,P=0.049).(3)RT-PCR结果显示,得力生可明显抑制A549细胞中表达survivin,与对照组相比,差异具有统计学意义(t=4.333,P＜0.05).结论 得力生可抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与抑制survivin基因表达有关.
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人肺腺癌 A549细胞株胰岛素受体与放射敏感性的实验研究
目的：研究人肺腺癌 A549细胞放射治疗组与对照组的胰岛素受体（IR）的表达，探讨胰岛素受体与放射敏感性的关系。方法将随机分为对照组（0 Gy）和放射治疗组（剂量为2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy、10 Gy、12 Gy 6 MV X 线）人肺腺癌 A549细胞进行放射治疗，放疗后培养25天后用免疫组化 S-P 法测定肺腺癌 A549细胞株各标本的胰岛素受体表达情况。结果胰岛素受体（IR）主要分布于 A549细胞膜上。小剂量（2 Gy、4 Gy）组与对照组（0 Gy）胰岛素受体表达强阳性率差异无统计学意义。6 Gy、8 Gy、10 Gy、12 Gy 放射治疗组与对照组相比，胰岛素受体强阳性率与对照组差异有统计学意义（P ＜0.005），其中12 Gy 剂量组强阳性率高。结论胰岛素受体与放射敏感性负相关，ISR 强阳性的肿瘤细胞对射线抗拒。胰岛素受体有可能成为预测肺癌放射敏感性的分子标志物。
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榄香烯乳对人肺腺癌 A549 细胞株凋亡蛋白表达的影响
目的:探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株凋亡蛋白表达的影响.方法:体外培养人肺腺癌A549细胞株,四甲基偶氮唑蓝比色试验法(MTT法)测定不同浓度榄香烯乳在不同作用时间下对A549细胞株的生长抑制作用.IC软件计算10％的细胞抑制浓度(IC10).免疫细胞化学染色观察榄香烯乳作用24h后A549细胞的Bcl-2、Bax、Survivin及VEGF蛋白的表达变化.结果:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性.榄香烯乳作用24h后IC10为43.49μg/ml,Bax蛋白表达增加,细胞质着色增强；Bcl-2蛋白表达下降,细胞质着色减弱；增殖蛋白Survivin和VEGF的表达下降,且具有药物浓度相关性.结论:榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞株有明显的抑制作用,榄香烯乳可上调凋亡相关蛋白表达、诱导凋亡.
