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齐墩果酸通过线粒体途径诱导原髓细胞白血病细胞株细胞凋亡
目的：探讨原髓细胞白血病细胞株HL－60细胞半胱氨酸蛋白酶（ Caspase）－9、Smac／DIABLO、细胞色素C（ Cyt－c）和线粒体凋亡诱导蛋白（ Bid）表达及齐墩果酸（ OA）对HL－60细胞线粒体凋亡信号通路的干预作用。方法细胞分瓶培养，实验设空白对照组和12、24、48 h的OA用药组，收集细胞，提取细胞总蛋白、线粒体蛋白和去线粒体细胞浆蛋白，Western印迹法分别检测Caspase－9、Bid、Smac／DIABLO和Cyt－c的表达。结果OA引起HL－60细胞质中Cyt－c和Smac／DIABLO含量增加，并引起Caspase－9的激活，线粒体Bid蛋白含量增加。结论 OA可以通过线粒体凋亡信号通路诱导HL－60细胞凋亡。
关键词： 齐墩果酸 白血病细胞株HL-60 线粒体途径 bid 细胞色素C -
ALA-PDT诱导白血病细胞株HL-60凋亡
背景与目的:基于5-氨基乙酰丙酸的光动力疗法(ALA-PDT)利用肿瘤细胞对ALA产生的内源性光敏剂原卟啉IX(PpIX)的优先摄取,使肿瘤细胞在受到一定的光照后被选择性地杀伤.到目前为止,ALA-PDT引起肿瘤细胞破坏的确切机制尚未完全阐明.本研究探讨ALA-PDT对白血病细胞株HL-60的凋亡诱导作用.方法:以白血病细胞株HL-60为实验模型.实验分为4组,对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA+PDT组.用MTF法检测细胞的存活率,瑞氏染色观察细胞形态学改变,用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,并用共聚焦激光显微镜(LSCM)观察凋亡细胞的特征.结果:ALA+PDT组光照后细胞形态学可见凋亡改变;MTF法显示细胞存活率明显下降,24 h为(46±9)%,48 h为(26±8)%,两者比较差异有显著性(P＜0.05);流式细胞仪检测显示光照后4、5和24 h细胞凋亡率分别为(26±9)%、(29±11)%和(51±6)%,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05);LSCM观察AnnexinV-FITC单阳性及AnnexinV-FITC/PI双阳性细胞均具有典型的凋亡特征,而单纯ALA组、单纯光照组及对照组则无上述改变.结论:MA-PDT能杀伤白血病细胞株HL-60,主要通过诱导凋亡的方式实现的,并呈一定的时间依赖性.
关键词： 5-氨基乙酰丙酸 光动力学治疗 白血病细胞株HL-60 细胞凋亡 -
地西他滨联合丙戊酸钠对白血病细胞株HL-60促凋亡和分化的影响
目的 探讨地西他滨(DCA)和丙戊酸钠(VPA)联用对白血病细胞株HL60促凋亡和分化诱导的协同作用.方法 白血病细胞株HL-60分别与以下药物终浓度组作用48h:对照组,DCA单药A组(1.0 μmol·L-1),DCA单药B组(4.0 μmol·L-1),VPA单药组(2.0 mmol· L-1),联合用药A组(DCA 1.0 μmol·L-1+ VPA 2.0 mmol·L-1),联合用药B组(DCA4.0μmol·L-1+ VPA2.0 mmol· L-1).应用Annexin V-FTTC/PI标记法检测早期凋亡率,流式细胞术检测CD34、CD117平均荧光强度(MFI)以及CD11b、CD14表达率.结果联合用药A、B组的凋亡率高于其各自的单药组,差异具有高度统计学意义(P＜0.01)；联合用药A、B组的CD117和CD34MFI低于其各自的单药组,差异具有高度统计学意义(P＜0.01)；联合用药A组的CD11b和CD14表达率以及联合用药B组的CD11b表达率均低于其各自的单药组,差异具有高度统计学意义(P＜0.01).结论白血病细胞株HL-60中VPA能显著增强DCA的促凋亡分化作用.
关键词： 分化抗原 凋亡 白血病细胞株HL-60 丙戊酸钠 地西他滨 -
枸杞多糖对NK细胞杀伤活性的影响
目的:观察枸杞多糖作用前后人白血病细胞株HL-60表面MICA的表达变化及对NK细胞杀伤活性的影响,为白血病免疫治疗打下实验基础.方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测不同浓度枸杞多糖作用前后HL-60细胞培养上清中MICA的浓度;MTT法对不同浓度枸杞多糖作用前后NK细胞对HL-60杀伤活性的变化进行检测.结果:ELISA检测显示不同浓度枸杞多糖(6mg/ml,8mg/ml,10mg/ml)作用后HL-60细胞培养上清中MICA的浓度分别为(18.314±0.926)ng/l;(22.049±1.207)ng/l;(27.509±1.859)ng/l与作用前浓度(11.226±0.652)ng/l相比,差异有统计学意义(P＜0.05);MTT法检测显示效靶比5:1、10:1、20:1时,不同浓度枸杞多糖作用后NK细胞对HL-60细胞的杀伤性分别为:浓度为6mg/ml时,NK细胞对HL-60细胞的杀伤率分别为(19.59±0.47)%、(27.46±0.83)%、(38.43±1.68)%;浓度为8mg/ml时,NK细胞对HL-60细胞的杀伤率分别为(27.86±0.75)%、(39.30±1.86)%、(48.94±2.80)%;浓度为10mg/ml时,NK细胞对HL-60细胞的杀伤率分别为(34.50±1.20)%、(41.28±2.38)%、(51.02±3.72)%;以上结果 均高于作用前NK细胞对HL-60的杀伤率(13.64±0.25)%、(22.41±0.36)%、(31.72±0.62)%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:本实验结果 提示:枸杞多糖能上调HL-60细胞表面MICA的表达率,增强NK细胞的杀伤活性,并与浓度成正比.通过提高HL-60细胞表面MICA的表达水平,可能有助于提高刺激NK细胞杀伤活性的激活性信号水平,促进MICA与NK细胞NKG2D受体结合,增强NK细胞的杀伤活性,有利于启动免疫反应,对清除微小残留病灶及减少白血病复发具有非常重要的意义.
