首页 > 文献资料
-
SIRT1抑制剂sirtinol对前列腺癌DU145细胞凋亡的影响及可能机制
目的 观察SIRT1抑制剂sirtinol对前列腺癌DU145细胞系细胞凋亡和细胞凋亡关键调控因子(Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3)表达变化的影响,探讨SIRT1在前列腺癌发生的可能机制.方法 体外培养DU145细胞,实验分对照组(DMSO组)和sirtinol组(终浓度为10,25和50μmol/L),Western印迹检测DU145细胞SIRT1蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测DU145细胞中细胞凋亡关键调控因子Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3的蛋白表达.结果 与对照组相比,随着sirtinol浓度的增加,SIRT1蛋白表达水平逐渐降低,细胞凋亡比例增加,诱导细胞发生凋亡.不同浓度sirtinol作用DU145细胞后Bcl-2蛋白表达减少,且随剂量增加表达越低;Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比率降低;伴随Cytochrome C的释放和Caspase-3的激活.结论 下调SIRT1表达诱导前列腺癌细胞DU145细胞凋亡,其机制可能与改变细胞凋亡关键调控因子Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3的蛋白表达相关.
-
白藜芦醇对喉癌Hep-2细胞顺铂敏感性的增强作用及其机制
目的:探讨白藜芦醇提高喉癌Hep-2细胞株对顺铂(DDP)敏感性的作用,并阐明其作用机制.方法:Hep-2喉癌细胞随机分为空白对照组和DDP组(终浓度分别为3、6、12和24 μmol.L-1)培养6、12、24及48 h.CCK-8法检测各组细胞生存率;选出DDP的佳作用浓度6μmol.L-1和作用时间24 h.Hep-2喉癌细胞株经培养后随机分为对照组、DDP组、白藜芦醇组、sirtinol组、白藜芦醇+sirtinol组、白藜芦醇+DDP组、sirtinol+ DDP组和白藜芦醇+sirtinol+ DDP组.CCK-8法检测各组细胞生存率;采用免疫荧光法观察各组细胞中Sirt1蛋白的表达强度;Annexin V-FITC Kit法检测各组细胞凋亡率.结果:CCK-8检测,与对照组比较,DDP组和白藜芦醇组细胞生存率明显下降(P＜0.01);与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞生存率明显下降(P＜0.01);与白藜芦醇+ sirtinol+ DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞生存率明显下降(P＜0.05).细胞免疫荧光法检测,与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞中Sirt1蛋白的平均免疫荧光强度明显升高(P＜0.01);与白藜芦醇+ sirtinol+ DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞中Sirt1蛋白的平均免疫荧光强度明显升高(P＜0.01).Annexin V-FITC Kit检测,与DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞凋亡率均明显升高(P＜0.01);与白藜芦醇+ sirtinol+ DDP组比较,白藜芦醇+DDP组细胞凋亡率明显升高(P＜0.01).结论:白藜芦醇提高Hep-2喉癌细胞株对DDP的敏感性,其机制可能与提高喉癌细胞中Sirt1蛋白表达有关联.
-
sirtinol对前列腺癌DU145细胞周期的影响及其机制
目的：观察沉默信息调节因子1（SIRT1）抑制剂 sirtinol对前列腺癌 DU145细胞生长增殖、细胞周期进程和细胞周期正性调节蛋白Cyclin D1、CDK4及 pRb 表达的影响，探讨 SIRT1在前列腺癌发生中的可能作用机制。方法：取处于对数生长期 DU145细胞随机分为对照组（DMSO组）和 sirtinol组（终浓度分别为10、25和50μmol·L-1），MTT法测定各组DU145细胞生长抑制率，RT-PCR和 Western blotting法检测 DU145细胞中SIRT1 mRNA和蛋白表达水平，流式细胞术检测细胞周期进程，Western blotting法检测 DU145细胞中细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4和 pRb的表达水平。结果：与对照组比较，各浓度 sirtinol组 DU145细胞生长抑制率明显升高（P＜0.01）， G1期细胞明显增多（P＜0.01），且呈浓度依赖性。与对照组比较，各浓度 sirtinol 组DU145细胞中 SIRT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0.01），Cyclin D1和 pRb 蛋白表达水平降低（P＜0.01），CDK4蛋白表达无明显变化（P＞0.05）。结论：下调 SIRT1表达可以抑制前列腺癌 DU145细胞的增殖和阻滞细胞周期进程，其机制可能与改变细胞周期蛋白CyclinD1和 pRb的表达有关。
关键词： sirtinol 沉默信息调节因子 1 前列腺肿瘤 DU145 细胞 -
组蛋白去乙酰化酶抑制剂对乙型肝炎病毒复制的影响
目的:研究SIRT1抑制剂sirtinol、曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响,并探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)在HBV复制过程中的作用.方法:运用MTS分析HepG2.2.15细胞对sirtinol、TSA的耐受程度;real-time PCR和Southern blot验证sirtinol和TSA对HepG2.2.15细胞中HBV复制中间体表达的影响;Western blot和ELISA分析sirtinol对HBV核心蛋白(HBc)和HBsAg、HBeAg表达的影响.结果:sirtinol能抑制HBV复制中间体、HBc的表达和HBsAg、HBeAg的分泌,TSA可以促进HBV的复制.结论:SIRT1抑制剂sirtinol具有抗病毒作用.
