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ELISA梅毒检测法中假阳性的观察及结果分析
用ELISA法检测梅毒特异性抗体(TP-AB),对所有手术或输血前的患者进行了梅毒的筛查,筛查阳性结果均经再次复查才确定.确定阳性的结果用TPPA(明胶颗粒凝集法)确认,对ELSIA梅毒检测法中假阳性进行分析.
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超敏CRP单克隆抗体制备及其ELISA体系的初步建立
目的 获得CRP特异性单克隆抗体并建立能够检测超敏CRP(hs-CRP)的双抗体夹心ELISA免疫定量检测方法.方法 从NCBI核酸数据库中获得人CRP编码序列并进行密码子偏嗜性改造,利用E.coli表达系统表达CRP重组蛋白.用pET22b-CRP重组质粒表达的CRP重组蛋白(rhCRP-22b)作为免疫原免疫Balb/c小鼠并通过杂交瘤技术制备CRP特异性单克隆抗体,鉴定并筛选能够建立双抗体夹心ELISA系统的抗体配对.以pET28a-CRP重组质粒表达的CRP重组蛋白(rhCRP-28a)作为标准品,对该系统线性范围、灵敏度、精密度和准确度(回收试验)进行分析和评价.结果 获得5株CRP单克隆抗体,筛选得到2株单克隆抗体可用于hs-CRP的ELISA免疫检测.通过鉴定2株抗体具有良好的效价和特异性.ELISA检测系统线性范围为0～166 ng/ml,灵敏度为5.2 ng/ml,批内CV≤6.43％,批间CV≤5.93％,平均回收率为98.9％,与Orion公司hs-CRP诊断试剂检测结果有良好的可比性.结论 本研究制备了高效特异的CRP单克隆抗体并建立了能够检测hs-CRP的双抗体夹心ELISA方法,该方法灵敏度、精密度和准确性良好,能够达到hs-CRP的检测要求,为进一步研发和建立具有自主知识产权的免疫检测试剂盒及其他检测方法体系奠定了良好的基础.
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血液保养液对抗-HCV检测影响的探讨
目的 探讨CPD血液保养液(以下简称CPD)对抗-HCV检测的影响.方法 用CPD以5%的幅度对3种浓度的抗-HCV阳性质控物进行梯度稀释后用ELISA方法进行平行检测,观察S/CO值变化情况.随机抽取抗-HCV阳性和阴性献血者各60名,对其试管样本和血袋管样本做ELISA检测比较.结果 阳性质控实验组的S/CO值均随保养液的量增加而逐渐降低;阳性物浓度降低5%,S/CO值均有明显降低(P﹤0.05);其中阳性物浓度95%的S/CO值降低极显著(P﹤0.01).试管和血袋管的抗-HCV阳性样本检测结果有差异,弱阳性样本较为明显.结论 CPD对ELSIA检测抗-HCV弱阳性样本影响明显,易造成弱阳性样本的漏检.
关键词： 血液保养液(CPD) 抗-HCV ELSIA -
乙肝患者血清标志物HBsAg与HBsAb同时阳性的实验分析
目的探讨乙肝患者血清标志物HBsAg和HBsAb同时阳性原因.方法采用ELISA方法检测每天受检标本,收集HBsAg、HBsAb同时阳性检测结果,测定其谷丙转氨酶(ALT)及总胆红素(T-Bili)等肝功能项目.结果 HBsAb阳性主要出现在慢性乙肝患者及慢性乙肝携带者,"大三阳"与"小三阳"中出现没有明显差异.结论HBsAg、HBsAb同时阳性的模式,是由多种原因引起,HBsAg亚型双重感染可能是主要原因.
