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EDTA解离法消除脂浊对血清钙测定的干扰
[目的] 建立灵敏度高、选择性好的偶氮胂Ⅲ显色EDTA络合解离法来消除脂浊对测定血清钙干扰的方法. [方法] 在巴比妥钠-盐酸缓冲液介质中,偶氮胂Ⅲ与钙络合显色,加入EDTA使偶氮胂Ⅲ与钙解离,测定其吸光度的下降值分析血清钙.对方法学性能进行系统研究. [结果] 该法线性0～4 mmol/L,平均回收率99.3%,变异系数0.74%～1.93%.与偶氮胂Ⅲ直接显色法对照,r＝0.973,P＞0.05. [结论] 该法试剂稳定,灵敏度、选择性及测试线性均优于或相当于偶氮胂Ⅲ直接显色法,且可消除脂浊标本对测定的干扰,可用于血清钙的常规分析,尤其适合于自动分析.
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血清镁的偶氮胂Ⅲ显色EDTA褪色测定法
目的建立一种选择性好、基本无干扰的血清镁偶氮胂Ⅲ显色EDTA褪色测定法.方法在碱性条件下镁离子与偶氮胂Ⅲ络合显色,加入EDTA使镁离子重新解离,测定吸光度的下降来分析血清镁.结果线性范围达2.5 mmol/L;批内和批间平均变异分别为1.1%和1.8%,平均回收率为100.4%,在血清胆红素高达500 μmol/L、脂肪乳剂(Intralipid)浓度达10 g/L时,均对该法无显著干扰,该法与Calmagite比色法结果相关性好(r=0.994).结论该法选择性好、简便、快速、无干扰,可用于血清镁的常规分析,更适合自动分析.
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偶氮胂Ⅲ分光光度法测定血清镁
目的建立一种简便、灵敏、试剂稳定性好的分光光度法测定血清镁.方法用国产试剂偶氮胂Ⅲ作显色剂,乙二醇双(α-氨基乙基)醚四乙酸(EGTA)掩蔽钙,在三乙醇胺-盐酸缓冲体系中以分光光度法测定血清镁.结果该方法显色络合物大吸收波长为640 nm,线性范围达2.47 mmol/L,表观摩尔吸光系数为1.5×104 L*mol-1*cm-1.回收率为99.5%～101.8%,批内变异系数(CV)和批间CV分别为2.7%与3.3%,与MTB法(X)比较具有良好的相关性,Y=0.982X+0.018,r=0.9839,P>0.05,72名健康人血清镁含量为0.68～1.20 mmol/L(±2s).结论该法具有快速、简便、灵敏可靠等优点,适于血清镁的常规手工分析和自动分析.
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偶氮胂Ⅲ分光光度法测定庆大霉素
在pH2～4条件下,偶氮胂Ⅲ(ARSⅢ)与庆大霉素(GEN)反应时生成离子缔合物,导致偶氮胂Ⅲ褪色,大褪色波长位于525 nm,摩尔吸光系数(ε)为3.80×104L·mol-1·cm-1,线性范围为0～20.00μg·mL-1,相关系数为0.9991,相对标准偏差为0.14%.所建立的方法用于市售庆大霉素注射液含量的测定,结果令人满意.
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荧光光谱法研究偶氮胂Ⅲ与牛血清白蛋白的相互作用
目的 为了研究偶氮胂Ⅲ与牛血清白蛋白(BSA)在不同pH条件下(pH=2.0～9.0)的相互作用机理.方法 采用荧光光谱法研究偶氮胂Ⅲ对BSA荧光的影响,通过计算获得作用机理的诸多信息.结果 偶氮胂Ⅲ对BSA有较强的荧光猝灭作用,猝灭机制为生成复合物的静态猝灭;偶氮胂Ⅲ与BSA间的结合常数在pH3.0～5.0大,结合位点数为1;pH =3.5和4.5时偶氮胂Ⅲ与BSA色氨基酸残基间的结合距离在4.10 nm左右;两者主要靠静电引力结合;金属离子Mg2+、Ba2+和Ca2+对两者结合作用有影响.结论 偶氮胂Ⅲ及偶氮胂Ⅲ-Ba2+、偶氮胂Ⅲ-Ca2+可作为优良的光谱探针,用于蛋白质的定量测定.
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偶氮胂Ⅲ分光光度法测定人血清中蛋白质
偶氮胂Ⅲ是测定无机离子的灵敏显色剂,研究发现该试剂能在pH 2.1的缓冲介质中,与牛血清白蛋白形成复合物,大吸收波长602 nm,比试剂本身红移59 nm,表观摩尔吸光系数5.6×105 L*mol-1*cm-1,线性范围0～450 μg/mL.方法用于人血清样品中蛋白质的测定,结果可靠.
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灵敏的单一偶氮胂Ⅲ试剂测定血清总蛋白
[目的]建立一种快速、简便、灵敏的测定血清总蛋白的方法.[方法]在非离子型表面活性剂聚氧乙烯月桂醚(Brij-35)存在下,用水溶性试剂偶氮肿Ⅲ(ArsenazoⅢ)作显色剂直接分光光度法测定血靖总蛋白.[结果]该方法测定蛋白质,显色络合物的大吸收波长为610nm,线性范围在0-56.2mg/L,表观摩尔吸光系数为3.60×105L·mol-1·cm-1.回收率为96.1%～103.6%,批内相对标准差和批间相对标准差(RSD)分别为0.8%与2.0%,与双缩脲法比较相关性良好,Y=0.9882X+1.1007,r=0.9898,P＞0.05.59名健康成年人血清总蛋白含量为(62.9～80.8)g/L(X±2s).[结论]该法血清用量少,线性范围宽,具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点,适用于血清总蛋白的手工测定和自动分析.
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偶氮胂Ⅲ测定血清镁
目的:建立简便、灵敏的偶氮胂Ⅲ(ArsenanoⅢ)血清镁测定法.方法:在碱性条件下,用EGTA消除钙的干扰,偶氮胂Ⅲ与镁离子形成蓝紫色络合物,以分光光度法测定血清镁.结果:偶氮胂Ⅲ-镁反应液的大吸收峰为615nm,反应适pH8.8,偶氮胂Ⅲ适浓度为150umol/L,EGTA加入量为200umol/L.本法批内CV及批间CV(n=20)分别为1.70～2.10%、2.17～2.57%.平均回收率为99.3%,线性0～3.0mmol/L.胆红素(500umol/L以内),血红蛋白(7g/L).脂肪乳剂Interlipid(4g/L)对测定无干扰.该法与MTB法对照,结果无显著差异.(P＞0.05).结论:偶氮胂Ⅲ测定血清镁简便、快速、灵敏、可靠,适于手工分析和自动化分析.
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临床常用3种检测钙离子方法的比较
目的:用偶氮胂Ⅲ、酶法、OCPC法进行同步检测钙离子的含量,从中找出一种更为简单、灵敏、经济适用、快速准确的检测方法.方法:通过对生化分析仪仪器的校准,用同一标准溶液和血清,分别用3种方法进行钙离子对比测定,每种方法操作均按照其试剂说明书进行.结果:3种方法无明显差异,它们的线性范围、准确度、精密度均符合要求.结论:通过对3种方法的比较,酶法是好的,其消除了金属离子(例如Mg2+等)的干扰,胆红素等对其测定结果无显著影响,适宜在临床应用.
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自配偶氮胂Ⅲ试剂测定血清钙
目的：配制一种线性好、灵敏度高、抗干扰能力强且成本低的偶氮胂Ⅲ法钙检测试剂，以替代价格昂贵的原装进口试剂应用于贝克曼CX系列生化仪。方法：在碱性(pH：9.0)条件下，偶氮胂Ⅲ与钙形成稳定的络合物，其浓度与络合物颜色深浅成正比。结果：自配试剂的线性范围为0～3.75mmol/L，平均回收率为99.9％，高、低二种浓度质控血清批内变异系数(CV)分别为0.94％、0.97％，批间变异系数分别为1.67％、2.17％，与原装试剂具有较好的相关性，Y(自配)=0.967X-0.045，γ=0.999，P＞0.05。结论：自配试剂具有较好的精密度、线性、灵敏度及回收率，能有效避免镁离子及酸性条件下蛋白质沉淀带来的干扰，且成本低廉，完全可以替代价格昂贵的原装进口试剂应用于贝克曼CX系列生化仪。
