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microRNA的检测技术及其法医学应用前景
microRNA (miRNA)是一类由18～25个核苷酸构成的非编码小分子RNA,在转录后水平调控基因的表达.miRNA的表达具有高度保守性、时序性和组织特异性.随着其检测技术的逐渐成熟,miRNA被引入到法医学的研究中.新近研究表明,miRNA在法医学体液鉴定、种属鉴定和PMI推断等方面有一定的应用前景.本文简述miRNA检测技术的发展,并对其在法医学中的应用及前景进行综述,以期为相关研究及实践提供参考.
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microRNA在心血管疾病中的作用及其法医学意义
microRNA(miRNA或miR)是一类21～25 nt大小的单链非编码RNA,在生物体内广泛存在,并调节基因表达.近年来与心血管疾病发生、发展相关的miRNA不断有报道.本文综述了miRNA的研究进展,从心肌组织和循环血液中的miRNA两方面综述miRNA在心血管疾病中的作用,并探讨miRNA在心源性猝死法医学鉴定中的可能应用.
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miRNA对Fontan术后血小板活化程度及血栓形成影响的精确预测价值
目的 探讨微小核糖核酸(miRNA)对Fontan术后血小板活化程度及血栓形成影响的精确预测价值.方法 选取单心室行Fontan术后病儿6例作为实验组(TG组),体检正常儿童6例作为对照组(CG组),分别提取两组血清、血小板和白细胞内miRNA;选取和心血管病相关的miRNA(miR-126、miR-150、miR-197、miR-223及miR-21),通过qRT-PCR检测其表达情况;通过流式细胞仪检测血小板活化程度;通过Western Blot方法检测经慢病毒转染抑制miR-223表达后对细胞核因子κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响.结果 CG组和TG组血清中miR-126、miR-223表达水平比较,差异有显著性(t=3.22、3.45,P＜0.05).两组外周血血小板和白细胞中miR-223表达水平比较,差异有显著性(t=5.62、4.32,P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示,TG组血小板中CD62 p、CD41a的表达率较CG组显著升高(t=17.57、87.78,P＜0.01);Western Blot检测结果显示,TG+病毒无转录抑制因子组(TC组)白细胞I小蛋白表达下调,p-p65蛋白表达上调;CG+病毒含转录抑制因子组(CI组)白细胞中Iκb蛋白表达上调,p-p65蛋白表达下调;与CI组组比较,TG+病毒含转录抑制因子组(TI组)白细胞中kb蛋白表达下调,p-p65蛋白表达上调;Ikkb和NF-κB蛋白表达在不同处理组间无明显变化.结论 Fontan术后病儿血清中miR-223表达水平升高,血小板活化率增加;miR-223表达升高后可能通过NF-κB信号路径来促进血小板活化和血管内皮损伤,从而影响血栓形成.
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MiR-27a-3p在肺腺癌中的表达及意义
目的 观察微小RNA(miR)-27a-3p在肺腺癌组织中的表达以及对肺腺癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 收集21例肺腺癌病人癌组织和癌旁组织,通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-27a-3p的表达水平.采用细胞增殖实验(MTT法)和划痕实验观察miR-27a-3p过表达或干扰对肺腺癌细胞株A549增殖和迁移能力的影响.结果 与癌旁组织比较,miR-27a-3p在肺腺癌组织中的表达水平显著上升(P<0.01).细胞增殖及划痕实验结果显示,细胞转染48、72、96h后,过表达miR-27a-3p后A549细胞的增殖、迁移能力显著高于对照组(P<0.05).细胞增殖及划痕实验结果显示,细胞转染48、72、96 h后,沉默miR-27a-3p后A549细胞的增殖、迁移能力较对照组细胞显著降低(P<0.05).结论 miR-27a-3p在肺腺癌中高表达,且其表达与肺腺癌细胞的增殖和迁移能力有关,提示miR-27a-3p可能参与调节肺腺癌细胞的生物学行为.
