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瘦素对L-02肝细胞甘油三酯沉积及乙酰辅酶A羧化酶表达的影响
目的 观察瘦素对人L-02脂肪变肝细胞甘油三酯合成的影响,探讨瘦素在非酒精性脂肪性肝病发生、发展中的作用.方法 人肝L-02细胞在50%胎牛血清1640培养基中造模24 h.设立正常组、模型组、处理组,处理组分为3个亚组,分别应用瘦素10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L处理24 h.均行油红"O"染色,观察脂肪化情况,RT-PCR测CA羧化酶mRNA表达.结果 油红"O"染色显示,50%胎牛血清的1640培养基24 h能成功制造肝细胞脂肪变性模型;加入瘦素处理后,脂肪化程度减轻,且与瘦素呈剂量依赖性关系;RT-PCR显示,肝细胞脂肪变性后,乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达增强,加入瘦素处理后,乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达明显减弱,与瘦素呈剂量依赖性关系.结论 肝细胞脂肪变性时,瘦素能使肝细胞脂肪化程度减轻,能减少肝细胞甘油三酯的合成,对脂肪肝防治有一定的作用.
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水通道蛋白9在培养肝细胞脂肪变性模型中的表达及意义
目的:探讨油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型中水通道蛋白9(Aquaporin-9,AQP9)的表达及意义.方法:用油酸诱导正常肝细胞株L-02建立肝细胞脂肪变模型.采用油红O染色观察细胞内的脂滴,并检测细胞内甘油三脂,游离脂肪酸.甘油含量,RT-PCR法和Western blotting法分别检测AQP9 mRNA和蛋白的表达.结果:油红O染色显示24h开始出现脂肪变性,72h脂肪变性重;模型组TG、FFA、甘油含量均在各时相点较对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01);模型组AQP9 mRNA的表达上调,于24h开始增高,72h表达强,与对照组相比差异有统计学意义(P
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SCAP在培养肝细胞脂肪变性模型中的表达及意义
目的 探讨油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(srebp cleavage activating protein, SCAP)的表达及意义.方法 以正常肝细胞株L-02进行细胞培养,用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型.采用油红O染色观察细胞内的脂滴,并检测细胞内甘油三酯含量,RT-PCR法检测SCAP mRNA的表达,Weston blot检测SCAP蛋白的表达.结果 油红O染色显示24h开始出现脂肪变性,120h脂肪变性重;模型组肝细胞内甘油三酯(TG)含量在各时相点较对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01),120h增高明显;模型组SCAP mRNA的表达上调,于24h开始增高,72h表达强,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01);SCAP蛋白的表达24h开始增高,120h强,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论 油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型SCAP的表达增强,细胞内TG的合成增加,SCAP可能参与了肝细胞的脂代谢及脂肪变性的形成.
