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小青龙汤对TSLP诱导DCs表达IL-4、IL-12、IFN-γ、IL-10的干预作用
目的:当代研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)可以活化树突细胞(以下简称DCs),通过改变DCs分泌的细胞因子,形成有利于Th0向Th2优势分化的微环境,从而诱发过敏性鼻炎.临床发现小青龙汤治疗过敏性鼻炎疗效确切,关于其抗过敏的作用机制目前尚不明确.实验在体外用小青龙汤对TSLP-DCs体系进行干预,观察小青龙汤能否改变Th2优势分化的微环境.方法:从C57小鼠获取骨髓前体细胞,体外诱导培养生成DCs,设置空白组、TSLP刺激组、小青龙汤大中小3个剂量干预组,结合酶联免疫吸附实验(以下简称ELISA)在12、24、48 h3个时间点分别检测IL-4、IL-12、IFN-γ、IL-10的表达.结果:与空白组相比,各TSLP刺激组IL-4的表达均明显升高(P＜0.01),而IL-10、IFN-γ的表达均明显降低(P＜0.01).与TSLP刺激组相比,大中小三个剂量的小青龙汤干预组IL-4的表达量均明显降低(P＜0.01),降低为明显的是4μg/mL小青龙汤组;与TSLP刺激组相比,大中小三个剂量的小青龙汤干预组IFN-γ、IL-10的表达量均升高(P＜0.01),升高为明显的是4 μg/mL小青龙汤组;IL-10的表达量随时间增加呈现降低趋势并在48 h时表达量达到低;IFN-γ、IL-10的表达量随时间增加呈现先升高后降低的趋势并在24h时表达量达到高.结论:小青龙汤可以降低TSLP-DCs体系IL-4的表达,升高IL-10、IFN-γ的表达,改变Th2优势分化的微环境起到抗过敏作用,在剂量为4 μg/mL时作用为明显.
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TSLP和NF-κB在子宫腺肌病患者子宫内膜细胞中的表达及意义
目的：探讨TSLP和NF-κB在子宫腺肌病发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学SABC法检测35例子宫腺肌病患者异位、在位内膜及20例子宫肌瘤患者子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞中TSLP和NF-κB p65的表达，并对两者表达量进行相关性分析；采用ELISA双抗体夹心法检测子宫腺肌病患者血清TSLP的水平，子宫肌瘤患者和健康体检者各20例作为对照。结果：子宫腺肌病患者异位、在位子宫内膜腺上皮和间质细胞中TSLP和NF-κB p65均阳性表达，且表达量明显高于对照组（子宫肌瘤组）（ P＜0.01），异位内膜腺上皮和间质细胞中TSLP和NF-κB p65表达量高于在位内膜（ P＜0.01），异位内膜腺上皮和间质细胞中TSLP和NF-κB p65的表达呈正相关，子宫腺肌病患者血清中TSLP的水平高于子宫肌瘤患者（ P＜0.05）和健康体检者（ P＜0.05）。结论：子宫腺肌病患者异位和在位子宫内膜腺上皮和间质细胞TSLP高表达，血清中水平升高，异位内膜TSLP的表达与NF-κB相关。
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RSV感染幼龄大鼠肺组织TSLP与Th2反应的相关性分析
目的:通过观察当呼吸道合胞病毒(RSV)感染幼龄大鼠肺组织时胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)与IL-4、IL-10和IL-13的变化,探讨TSLP与Th2反应的相关性.方法:将18只正常Wistar大鼠随机分为模型组和正常对照组,每组各9只.应用RSV病毒液滴鼻造模,生理盐水滴鼻做对照.取大鼠肺部组织进行病理切片观察炎症反应情况;运用实时荧光定量聚合酶链式反应(q-PCR)分别检测两组大鼠不同时间点合胞病毒载量情况和肺组织TSLP在基因水平的表达情况,同时采用免疫印记法(Western blot)检测肺组织TSLP在蛋白水平的表达情况;同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中Th2型相关细胞因子IL-4、IL-10和IL-13的表达水平;并对TSLP与L-4、IL-10、IL-13的关系进行Spearman相关分析.结果:与正常对照组相比,模型组大鼠在滴鼻感染后出现精神状态差、毛粗糙、活动减少、呼吸短促等症状,且上述症状进行性加重;病理观察显示模型组大鼠可见肺泡壁明显增厚,肺间质可见大量的浆细胞、淋巴细胞以及嗜酸性粒细胞浸润;q-PCR法检测模型组大鼠合胞病毒载量逐渐增加,在第5天左右达到峰值,后逐渐降低;RSV感染促进大鼠体内TSLP表达水平增加,q-PCR法和Western blot法检测显示:模型组大鼠的TSLP浓度均高于对照组(P<0.05);同时ELISA检测表明模型组大鼠血清中IL-4、IL-10和IL-13的浓度均高于对照组(P<0.05);Spearman相关分析显示RSV模型组大鼠的TSLP与IL-4和IL-10表达水平均呈正相关,TSLP与IL-13表达水平无相关性.结论:RSV感染Wistar大鼠肺组织时,可诱导TSLP表达水平增加,同时促进Th2型炎症反应的发生及相关细胞因子的表达,为进一步研究RSV感染致毛细支气管炎和哮喘等喘息类疾病的作用机制及临床治疗奠定了基础.
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宫颈癌细胞通过分泌TSLP促进自身细胞活力
目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)对宫颈癌细胞活力的自分泌调节作用.方法:体外培养宫颈癌细胞株HeLa和CasKi,分别收集培养24、48和72小时的培养上清,ELISA法检测培养上清中TSLP的分泌水平;流式细胞术分析HeLa和CasKi细胞表面TSLP受体(TSLPR)的表达水平;再用MTT法分别检测HeLa和CasKi细胞经人重组细胞因子TSLP(1、10和100 ng/ml)处理24、48和72小时后细胞活力的水平变化.结果:HeLa和CasKi细胞均呈时间依赖性分泌TSLP(P＜0.01),且HeLa细胞在24和48小时分泌TSLP的水平高于CasKi细胞(P＜0.01或P＜0.05);HeLa和CasKi细胞TSLPR阳性表达率分别为23.61±1.30和27.07±2.13,前者低于后者(P＜0.05);此外,10或100 ng/ml TSLP作用HeLa和CasKi细胞48小时或72小时均能上调其细胞活力(P＜0.05).结论:宫颈癌细胞可能通过TSLP自分泌作用促进自身的活力,进而利于宫颈癌细胞的生长,因而参与宫颈癌的发病和进展.
关键词： 胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP) 宫颈癌 Hela Caski 细胞活力
