首页 > 文献资料
-
用双标记时间分辨荧光免疫法同时检测黄曲霉毒素B_1和赭曲霉毒素A
目的 采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立同时检测黄曲霉毒素B_1(AFB_1)和赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏分析方法.方法 将AFB_1-HRP、OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离AFB_1、OTA共同竞争有限的抗AFB_1多克隆抗体或抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu~(3+)标记的羊抗兔抗体、Sm~(3+)标记羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立AFB_1/OTA-TRFIA.结果 该方法检测AFB_1的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02～100μg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为3.2%和7.3%,平均回收率为88.1%;检测OTA的灵敏度为0.05μg/L,测量范围为0.05～5μg/L,批内和批阅CV分别为2.9%和7.9%,平均回收率为89.9%,AFB_1/OTA-TRFIA检测时,AFB_1与OTA不相互干扰.样品经双标记AFB_1/OTA-TRFIA与单标记AFB_1-TRFIA、OTA-TRFIA同时检测,与AFB_1-TRFIA两者检测AFB_1结果的相关系数为0.972,与OTA-TRFIA两者检测OTA结果的相关系数为0.981,说明结果相符.结论 AFB_1/OTA-TRFIA灵敏度高,可测范围宽,稳定性好,一次操作可以同时得到AFB_1、OTA的两个结果.是一种简便、快速、经济的可进行大批量样品筛查的方法.
关键词： 黄曲霉毒素B_1 赭曲霉毒素A 时间分辨荧光免疫分析 抗体食品检测 -
银杏叶提取物对黄曲霉毒素B_1诱发大鼠肝癌过程中生物标志物的影响
目的:探讨银杏叶提取物(extract 761 from Ginkgo biloba,EGb761)对黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)在大鼠体内代谢的影响.方法:经AFB_1和EGb761不同处理,获得AFB_1组、AFB_1+EGb761组和空白对照组3组大鼠,分别于实验第14、28及42周给予抽血及肝活检,并于第64周全部处死.观察大鼠肝癌发生率,用分光光度法检测肝组织Ⅰ相酶CYP450和Ⅱ相酶GST活性,用高效液相色谱法检测血清AFB_1-赖氨酸加合物水平,以及应用免疫组织化学法检测8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)蛋白表达情况.结果:肝癌诱发率在AFB_1+EGb761组明显低于AFB_1组(P<0.001),而对照组无肿瘤发生;EGb761对Ⅰ相代谢酶CYP450及Ⅱ相代谢酶GST活性无明显影响.血清AFB_1-赖氨酸加合物的高水平(4 356.01 pg/mg albumin)发生于实验第14周的AFB_1组.在实验第14、42周时EGB761显著抑制了血清AFB_1-赖氨酸加合物的形成,抑制率分别为13.07% (P＝0.033)、73.63% (P＝0.002).在各检测点的8-OHdG蛋白表达强度显示,AFB_1+Egb 761组均显著低于AFB_1组(P<0.05).结论:EGb761阻断AFB_1致肝癌发生的主要机制可能不完全是通过影响肝脏Ⅰ、Ⅱ相代谢酶活性的途径实现的.EGb761能够抑制AFB_1-赖氨酸加合物的形成,降低8-OHdG蛋白的表达,减轻DNA的氧化损伤,这可能是其终抑制或延缓AFB_1诱发肝癌发生、发展的机制之一.
-
银杏叶提取物对黄曲霉毒素B_1诱导的大鼠肝癌的化学预防作用
目的 探讨银杏叶提取物(EGb761)对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致大鼠肝癌(HCC)发生发展的干预作用及其机制.方法 A组(AFB_1组28只)、B组(AFB_1+EGb761组29只)和C组(对照组14只)3组大鼠,定期肝活检并于第64周全部处死,观察实验肝癌发生过程中大鼠肝组织病理学、肝癌发生率、丙二醛(MDA)及8-羟基鸟嘌呤核苷(8-OHdG)蛋白表达的变化.结果 B组大鼠诱癌各时期肝脏损害均较A组轻,增生性病变发生亦较迟,肝癌诱发率(26.92%)明显低于A组(76.00%)(P<0.01),对照组无肿瘤发生.在各检测点(实验第14、28、42、64周),B组大鼠肝组织MDA含量(nmoL/mg蛋白)分别为0.14±0.01、0.24±0.01、0.36±0.01、0.60±0.01,均显著低于A组的0.27±0.01、0.66±0.01、0.56±0.01、0.93±0.02(P<0.05),在第64周时还明显低于C组的0.84±0.03(P<0.05);B组在第28、42和64周时8-OHdG蛋白的表达强度均显著低于A组(P<0.05).结论 EGb761能够明显抑制AFB_1诱发大鼠肝癌的发生,这可能与其降低了自由基所致的脂质过氧化反应、减轻AFB_1诱导的氧化损伤有关.
-
茜草、茜草炭饮片中黄曲霉毒素B_1含量比较和限度的确定
目的:比较茜草饮片黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的含量并确定限度标准.方法:间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA).结果:茜草、茜草炭饮片AFB_1含量基本都在国家规定的食品AFB_1限度范围之内.结论:茜草饮片的黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的含量限度标准初步确定为≤5μg·kg~(-1),与食品AFB_1限度相同.
-
XRCC3基因多态性对AFB_1-DNA加合物水平的影响
目的 探讨DNA修复酶基因X线修复交叉补体因子3(x-ray repair cross-complementing group 3,XRCG3)codon 241多态性对黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)高污染区广西人群AFB_1-DNA加合物水平的影响.方法 应用竞争性酶联免疫吸附法检测研究对象(966例)AFB_1-DNA加合物水平,而XRCC3基因型分析则通过PCR-RFLP来完成.结果 (1)带有codon 241 Met等位基因的XRCC3基因型(XRCC3-Thr/Met,XRCC3-Met/Met)与高AFB_1-DNA加合物水平相关,其风险值分别为1.43(1.08～1.89)和2.42(1.13～5.22);(2)XRCC3多态性与长时间的AFB_1暴露在AFB_1-DNA加合物形成过程中存在协同作用(OR=11.00,P<0.01).结论 AFB_1在带有易感基因型XRCC3-Thr/Met和XRCC3-Met/Met的人群更易诱导产生DNA损伤(AFB_1-DNA加合物).
关键词： 黄曲霉毒素B_1 AFB_1-DNA加合物 XRCC3 多态性
