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hOGGl基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的作用
目的 探讨hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的修复作用.方法 取不同浓度的Cr(Ⅵ)(0、2、8和32μmol/L)处理L-02肝细胞24h,分别测定细胞内活性氧簇(ROS)与hOGG1 mRNA表达水平和线粒体内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)与hOGG1基因表达的人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶蛋白(hOGG1蛋白)水平.结果 8μmol/L和32μmol/L剂量组与对照组比较,细胞内ROS平均水平及线粒体内8-OhdG平均水平均明显增加(P＜0.05),而hOGGl基因mRNA水平和线粒体内hOGG1蛋白水平,与对照组比较,2μmol/L剂量组两者水平均上升(P＜0.05),32 μmol/L剂量组两者水平均降低(P＜0.05).结论 Cr(Ⅵ)可诱导细胞内ROS水平增加,引起线粒体DNA氧化损伤,而hOGGl基因表达水平的改变,影响了线粒体DNA的修复能力.hOGGl基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中起到了重要的作用.
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hOGGl核酶介导的肺癌细胞对~(60)Co γ射线放射敏感性的研究
目的 观察~(60)Co γ射线对核酶诱导的hOGGl基因低表达的人肺腺癌A549细胞的损伤效应,探讨hOGGl低表达在增加肿瘤细胞放疗敏感性中的作用机制.方法 以A549细胞、转染空质粒的A549-P细胞和转染hOGGl特异性锤头状核酶真核表达载体pcDNA3.1(+)-RZ的A549-R细胞为研究对象,测定射线照射后3种细胞活性氧含量、细胞存活率、细胞染色体损伤及DNA损伤和修复的差异.结果 A549、A549-P和A549-R 3种细胞的存活率随~(60)Co γ射线照射剂量的增加而下降,存在较好的剂量-反应关系(r=-0.984、-0.978、-0.975,P<0.05).A549-R细胞的IC_(50)(9.37±0.24)显著低于A549细胞(12.98±0.44),差异有统计学意义(t=-12.48,P<0.05).~(60)Co γ射线照射下细胞活性氧含量、微核形成率及DNA损伤均增加,在相同剂量下,A549-R细胞中活性氧含量和微核形成率均高于A549和A549-P细胞.此外,在相同照射剂量下,hOGGl缺陷的A549-R细胞的DNA损伤较A549和A549-P细胞严重,且损伤后更加不易修复.结论 ~(60)co γ射线可以诱导A549、A549-P和A549-R 3种试验细胞的活性氧增加,从而导致DNA和染色体损伤,终使细胞存活率降低.且以hOGGl低表达的A549-R细胞更为明显,提示hOGGl基因的低表达可能增加肿瘤细胞对射线的敏感性.
