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高糖对肾小管上皮细胞PTEN蛋白表达影响
目的 观察高糖条件下肾小管上皮细胞第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)蛋白的表达变化,探讨其在肾小管纤维化病变中的作用及可能机制.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞株(NRK52E),随机分为对照组和高糖组,每组分别设2、12、24、48 h4个时间点进行动态观察;采用免疫荧光细胞化学染色检测E-钙黏素(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化,Western blotting检测各组PTEN、磷酸化蛋白激酶B[p-Akt1 (Ser473)]、E-caderin和c-SMA蛋白表达变化.结果 与对照组比较,高糖组培养24、48 h时,PTEN、E-caherin蛋白表达量[分别为(1.15±0.13)、(1.10 ±0.13)和(1.23±0.11)、(1.22±0.11)]均减少(均P＜0.05),而p-Akt1(ser473)、α-SMA蛋白表达量[分别为(1.53±0.13)、(1.60±0.13)和(1.86±0.10)、(1.91±0.10)]均增多(均P ＜0.05);PTEN与E-cadherin蛋白表达量呈正相关(r=0.58,P＜0.05),与α-SMA蛋白表达量呈负相关(r=-0.61,P＜0.05).结论 高糖培养的肾小管上皮细胞中PTEN蛋白表达明显减少,可能通过PI3K/Akt信号通路参与了肾小管纤维化病变的发生发展过程.
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米非司酮对早孕绒毛组织Notch/Snail/E-钙黏素表达的影响
目的:初步探讨米非司酮抗早孕的作用机制和Notch信号转导通路的关系.方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术(TR-qPCR)和免疫组织化学技术检测正常早孕绒毛组织中及不同剂量米非司酮作用后绒毛组织中Notch信号转导通路相关分子Notch-1、Snail、E-钙黏素(E-cadhefin)在mRNA水平及蛋白水平的表达情况.结果:米非司酮对旱孕绒毛组织的作用以200 mg组(D组)为显著,Notch-1、Snail基因以及E-钙黏素蛋白表达较对照组(A组)、100 mg组(B组)、150 mg组(C组)作用明显,差异有统计学意义(P<0.05);B组与A组比较差异无统计学意义(P>0.05).C组Notch-1mRNA、Snail蛋白与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余各基因及蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论:米非司酮抗早孕机制可能和Notch信号转导通路有关.
