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超抗原SEB诱导外周血单核细胞杀伤肿瘤效果
目的通过观察葡萄球菌肠毒素B(SEB)对外周血单核细胞(PBMC)杀瘤活性的影响,寻找适用于肿瘤过继免疫治疗的新途径.方法密度梯度离心法分离富集PBMC,分别用10-12,10-11,10-10,10-9 g/L浓度的SEB作用于PBMC,12,24,36,48 h后测定PBMC对K562细胞的杀伤活性.结果 SEB处理PBMC 12 h后杀瘤活性增强,至24 h杀瘤活性佳;在一定浓度范围内PBMC的杀瘤活性随SEB浓度的升高而增强.结论超抗原SEB在体外能够增强PBMC的杀瘤活性.
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补血方协同转染TCRVβ7.1 PBMC对肿瘤化疗造成骨髓抑制的缓解机制
目的:探讨补血方协同转染TCRVβ7.1 PBMC对肿瘤化疗造成骨髓抑制的缓解机制.方法:采用体外细胞实验建立化疗损伤模型,利用MTT法测定肿瘤细胞的死亡率,利用ELISA法检测造血相关细胞因子的分泌情况.结果:与对照组相比补血方与转染TCRVβ7.1 PBMC组能够明显促进粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的分泌,并且加PBMC组与单纯化疗药组相比能够明显抑制肿瘤的生长.结论:补血方协同转TCRVβ7.1 PBMC不仅能够对肿瘤细胞起到杀伤作用,且对化疗药所引起的骨髓抑制有一定的缓解作用.
关键词： 外周血单核细胞(PBMC) 补血方 骨髓抑制 化疗 -
不同来源间充质干细胞抑制滤泡辅助性T细胞的作用及其机制研究
目的 探讨不同来源的间充质干细胞(MSC)对滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)的抑制作用及其机制.方法 采用脐带来源MSC(UC MSC)、骨髓来源MSC(BM MSC)、脂肪来源MSC(Fat MSC)分别与外周血单核细胞(PBMC)混合培养48 h,并设立对照组,采用流式细胞仪检测4组培养物中Tfh细胞占淋巴细胞比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测4组培养物上清中白细胞介素(IL)-21的含量.将BM MSC与PBMC共同培养,分别加入吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)、IL-10抗体、人类白细胞抗原(HLA)-G抗体,分别为1-MT组、IL-10抑制组、HLA-G抑制组,另设不加其他物质的BM MSC组,培养48 h后采用流式细胞仪检测Tfh细胞占淋巴细胞比例.结果 流式细胞术检测结果显示,与对照组比较, BM MSC组Tfh细胞的比例降低,差异有统计学意义(P<0.05);与BM MSC组比较,UC MSC组和Fat MSC组Tfh细胞的比例较高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).ELISA结果显示,与对照组比较,BM-MSC组IL-21含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与BM MSC组比较,UC MSC组和Fat MSC组IL-21含量较高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).机制研究结果显示1-MT组、IL-10抑制组和HLA-G抑制组Tfh细胞的比例分别为(1.75±0.07)%、(1.31±0.09)%和(1.50±0.03)%,与BM MSC组[(1.03±0.43)%]比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 BM MSC对Tfh细胞分化的抑制效果好,抑制IL-21的效 果好,其发挥抑制Tfh细胞分化的机制可能与促进IDO分泌有关.
