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  • 氟化物对大鼠成骨细胞增殖分化的影响

    作者:张颖;孙贵范;金亚平;王毅

    目的研究不同浓度氟化物对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化的影响.方法大鼠颅骨分离的成骨细胞经不同浓度(10 μmol/L~4 mmol/L)的氟化钠作用后,采用AlamarBlue+TM摄入法检测细胞增殖;ELISA方法测定碱性磷酸酶活性.结果低浓度氟化钠(100 μmol/L~1 mmol/L)在体外可刺激细胞增殖,高浓度氟化钠(2 mmol/L以上)可抑制细胞增殖;10 μmol/L~50 μmol/L的NaF增强细胞ALP活力,100 μmol/L以上的NaF降低了细胞ALP活力.结论氟化物对成骨细胞的增殖与分化具有双向作用,即低浓度促进,高浓度抑制.

  • 乙二醛对大鼠淋巴细胞活力的影响及诱导凋亡的作用

    作者:于光;王璐

    分离大鼠淋巴细胞,经不同浓度的乙二醛作用后,采用AlamarBlueTM摄入法检测细胞活力,采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡.结果 显示,乙二醛浓度在125 μmol/L以上时,AlamarBlue的还原率明显低于对照组,差异有统计学意义;乙二醛浓度为0.5、1、2 mmol/L时,凋亡百分率明显高于对照组.提示乙二醛可抑制大鼠淋巴细胞的活力和诱导凋亡发生.

  • 白假丝酵母菌体外生物膜药敏性不同检测方法的比较

    作者:郭静;孙静;张晟;颜正豪;亓庆国

    目的 比较不同的方法对白假丝酵母菌体外生物膜药敏性检测的差异.方法 分别采用菌落计数法(CFU)、AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法对白假丝酵母菌体外48 h成熟生物膜的药敏性进行检测,并将AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法与CFU法进行比较,观察其相关性及差异性.结果 AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法与CFU法都有较高的相关性,相关系数分别为r=0.969、r=0.971、r=0.982 (P<0.01);与CFU法的差异分别为(0.093±0.127)、(0.054±0.113)、(0.013±0.066),其差异无统计学意义(P>0.05).结论 AlamarBlue试剂法、XTT减低法、MTT法均可替代CFU法对白假丝酵母菌生物膜进行药敏检测.MTT法与CFU法的相关性大,差异性小;AlamarBlue试剂作为一种新的试剂,操作简单,对细胞及人类无毒害,更加适合高通量检测.

  • 小鼠CD4+CD25+T细胞的分离、鉴定和体外功能的检测

    作者:周洁;袁劲;周鸿敏;杜敦峰;陈必成;昌盛;陈忠华

    目的建立CD4+CD25+T细胞的免疫磁性分离(MACS)方法,并检测其体外免疫抑制功能.方法分离C57BL/6小鼠和Balb/c小鼠脾脏细胞后运用MACS法分离CD4+CD25+T淋巴细胞,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测选出细胞的活性和纯度,用淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能.结果MACS分选法分选出的CD4+CD25+T细胞活性>97%,纯度>95%;此方法获得的CD4+CD25+T细胞在体外不增殖,经丝裂原活化后可以抑制同品系小鼠和异品系小鼠的CD4+CD25-T细胞增殖,这种抑制作用具有剂量依赖性.结论MACS法可简单迅速分选出高纯度无菌CD4+CD25+T细胞,且不影响细胞活力.CD4+CD25+T调节性细胞在体外具有免疫无能和免疫抑制作用;丝裂原活化的该细胞免疫抑制功能具有剂量依赖性,但不具有抗原特异性.

  • 氟对成骨细胞活性影响的一种新的检测方法

    作者:张颖;金亚平;孙贵范;王路

    [目的]研究不同浓度氟化物对大鼠成骨细胞活性的影响.[方法]用AlamarBlue摄入法检测细胞增殖.[结果]100μmol/L~1mmol/L氟化钠在体外可刺激细胞增殖,AlamarBlue的还原率明显升高,2mmol/L以上氟化钠可抑制细胞增殖,AlamarBlue的还原率下降,与对照组相比有显著性差异.[结论]AlamarBlue摄入法是一种简单、快速、客观地评价细胞活力的检测方法,并可对细胞活力的变化进行连续观察.

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