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δ-生育三烯酚对结肠癌细胞SW620中Wnt信号途径的影响
目的 依据生育三烯酚的抗肿瘤作用,研究其对结肠癌细胞SW620细胞增殖抑制作用与Wnt信号途径之间的关系.方法 采用MTT方法,观察不同剂量δ-生育三烯酚对细胞增殖抑制作用,通过Real-time RT-PCR检测Wnt途径相关因子mRNA的表达量变化情况,观察δ-生育三烯酚对细胞中wnt-1、β-catenin、c-jun、c -myc、cyclin D1及MMP-7mRNA表达水平的影响.结果 δ-生育三烯酚对结肠癌SW620细胞增殖有明显抑制作用,20 μmol/L δ-生育三烯酚作用24 h对SW620细胞抑制率为70.43％,IC50值为15.18μmol/L.20 μmol/L δ-生育三烯酚对Wnt信号途径中的wnt-1、β-catenin、c-jun及c-myc mRNA表达降低(P＜0.05)；对cyclin D1及MMP-7 mRNA的表达无影响(P＞0.05).结论 δ-生育三烯酚对结肠癌SW620细胞增殖抑制作用可能与其致Wnt途径中wnt-1、β-catenin、c-jun及c-myc表达降低有关.
关键词： δ-生育三烯酚 人结肠癌SW620细胞 Wnt信号途径 mRNA -
δ-生育三烯酚抑制结肠癌细胞Wnt途径的实验研究
目的 依据生育三烯酚的抗肿瘤作用,研究其对人结肠癌细胞SW620细胞增殖抑制作用与Wnt信号途径之间的关系.方法 采用MTT(噻唑蓝比色法)方法,观察不同剂量δ-生育三烯酚对细胞增殖抑制作用,通过免疫细胞化学染色法和蛋白免疫印迹方法测定Wnt信号途径中相关因子的蛋白表达情况.结果 δ-生育三烯酚对结肠癌SW620细胞增殖有明显抑制作用,20μmol/L δ-生育三烯酚作用24h对SW620细胞抑制率为70.43％,IC50值为15.18 μmol/L.20μmol/L δ-生育三烯酚可使人结肠癌细胞SW620中Wnt信号途径中的wnt-1、β-catenin、c-jun和cylin D1蛋白表达量显著下降(P＜0.05).结论δ-生育三烯酚对结肠癌SW620细胞增殖抑制作用可能与其致Wnt途径中wnt-1、β-catenin、c-jun和cylin D1表达降低有关.
关键词： δ-生育三烯酚 人结肠癌SW620细胞 Wnt信号途径 -
Survivin反义寡核苷酸诱导SW620细胞凋亡过程中对caspase-3表达的影响
目的:观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌细胞株SW620增殖、凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:靶向survivin基因中与caspase-3结合的部位设计、合成反义寡核苷酸并通过脂质体将其转染至人结肠癌细胞SW620中.噻唑蓝(MTT)法观察survivin ASODN对SW620细胞增殖的抑制作用,测定IC50;转染36 h后,Hoechst33342染色荧光显微镜下观察检测SW620细胞核变化,RT-PCR检测survivin ASODN处理后SW620细胞中caspase-3 mRNA表达,分光光度法检测caspase-3酶活性.结果:转染8h后,SW620细胞中可见黄绿色荧光均匀分布.不同浓度survivin ASODN处理SW620细胞44h后,SW620细胞增殖显著受到抑制,IC50为1×10-6 M.2×10-7,4×10-7,6×10-7,8×10-7 and 1.2×10-6 M的survivin ASODN处理后,细胞生长抑制率分别为15.38±0.022%、24.04±0.023%、30.87±0.027%、45.02±0.018%和65.01±0.024%.Hoechest33342染色后荧光显微镜下可观察到染色质凝集并出现凋亡小体,RT-PCR检测到caspase-3 mRNA表达上调,另外caspase-3酶活性显著升高.结论靶向survivin基因中与caspasc-3结合的部位设计合成的survivin ASODN可抑制显著结肠癌SW620增殖、诱导细胞凋亡,其机制与诱导caspase-3表达,提高caspase-3酶活性有关.
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三氧化二砷对人结肠癌SW620细胞OCT4和FOXO3a因子表达影响的研究
目的 研究已证实三氧化二砷(As2O3)可杀伤干细胞,新研究表明大肠癌是一种干细胞起源的疾病.实验研究As2O3对于大肠癌干细胞因子的作用及相关机制.通过观察FOXO3a基因沉默和激动后,As2O3对人结肠癌SW620细胞FOXO3a和OCT4表达的影响,探究As2O3对OCT4表达影响是否通过FOXO3a途径.方法 采用脂质体转染siRNA方法降低人结肠癌SW620细胞FOXO3a的表达,采用PI3K抑制剂LY294002提高FOXO3a的表达.给予As2O3作用后,RT-PCR方法检测FOXO3a和OCT4 mRNA的表达,Western blot方法检测FOXO3a和OCT4蛋白的表达.结果 ①As2O3增加SW620细胞中FOXO3a mRNA及蛋白的表达,同时降低OCT4 mRNA及蛋白表达(P﹤0.05);②FOXO3a siRNA处理后,FOXO3a mRNA及蛋白的表达明显降低,OCT4 mRNA及蛋白的表达增加.LY294002处理后,FOXO3a mRNA及蛋白的表达增加,OCT4 mRNA及蛋白的表达减少(P﹤0.05);③FOXO3a siRNA处理后,As2O3 对FOXO3a 和OCT4蛋白及mRNA表达无影响(P＞0.05),LY294002处理后,As2O3对FOXO3a和OCT4蛋白及mRNA表达无影响(P＞0.05).结论 As2O3能下调人结肠癌SW620细胞OCT4因子表达,其机制可能与上调FOXO3a因子表达有关.
关键词： 三氧化二砷 人结肠癌SW620细胞 FoxO3a OCT4 -
重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果.方法 采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达.结果 重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加.结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性.
关键词： 重楼 人结肠癌SW620细胞 增殖 凋亡 敏感性
