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祛湿活血方对脂肪细胞多聚化脂联素表达的影响

刘旭东;梁真;赵晓芳;刘钢涛

摘要: 目的:通过研究祛湿活血方在脂肪细胞内外对脂联素多聚化表达的影响,探讨祛湿活血方治疗NAFLD的分子机制.方法:体外对3T3-L1脂肪细胞及大鼠原代脂肪细胞进行诱导分化;在3T3-L1脂肪细胞中加入浓度为4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.625 g/L的祛湿活血方中药,通过Western Blot检测高分子量脂联素,筛选合适的中药浓度;体外培养3T3-L1脂肪细胞及大鼠原代脂肪细胞,ELISA检测TNF-α作用下的高分子量脂联素的变化;并以Akt活化阻断剂AKTiⅧ作阳性对照,用Westernblot分析祛湿活血方对3T3-L1脂肪细胞及大鼠原代脂肪细胞HMW脂联素、DsbA-L、Akt、P-Akt、FOX01、P-FOX01的影响.结果:取祛湿活血方浓度0.5 mg/mL进行实验,ELISA结果显示:无论是3T3-L1脂肪细胞还是大鼠原代脂肪细胞,TNF-α明显抑制了HMW脂联素的分泌(P<0.05),而加入祛湿活血中药后,HMW脂联素的分泌明显增加.WesternBlot实验结果显示:与空白组对比,祛湿活血方组和Akt抑制剂组的HMW脂联素及DsbA-L表达水平升高;与空白组比较,祛湿活血方组和AKTiⅧ组表达P-FOX01、P-Akt水平降低,而FOX01、Akt的表达水平无明显变化.结论:祛湿活血方可促进脂肪细胞的多聚化脂联素的表达,其在细胞外机制主要与改善TNF-α对脂肪细胞分泌HMW的抑制以及在脂肪细胞内,直接抑制Akt/FOX01的活化,上调DsbA-L的表达有关.

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