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卵母细胞和卵巢组织的冷冻
精子冻存已取得了一定的成功,但是冻存的卵母细胞体外发育的成功率很低,因为卵母细胞冻存与许多因素有关,成熟的卵母细胞对冻存非常敏感,很容易出现非整倍体现象.为了提高卵母细胞的受精率,人们已着手研究不成熟卵母细胞及卵巢的冻存.要建立一个方法,使生长完全的生殖泡(germinal vesicle,GV)和MII卵母细胞暴露于与冻存有关的物理和化学逆境后,仍然具有很高的存活率、受精率和发育率.目前还没有一个简单可行的冻存方法,而且主要困难在于如何使原始卵泡中的未成熟卵母细胞发育为成熟的卵母细胞.
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连续核移植对异种山羊(Bore)克隆胚胎发育的影响
目的探讨连续核移植与异种山羊克隆胚胎发育之间的关系.方法分别以波尔(Bore)山羊耳部成纤维细胞、山羊-兔异种克隆桑椹胚卵裂球为核供体,以兔卵母细胞为受体,进行连续核移植.结果共构建145枚异种原代重构卵、73枚继Ⅰ代及20枚继Ⅱ代重构卵,经电融合后,获得重构胚数分别为90、58和14枚,融合率分别为62.1%、79.5%和70%;162枚重构胚在同等条件下进行体外共培养,卵裂率分别为72.2%、75.9%和28.6%,囊胚率分别为10%、13.8%和0%;融合率方面,原代、继Ⅰ及继Ⅱ重构卵之间无显著差异(P＞0.05);早期发育率无显著差异,但继Ⅰ代重构胚高于原代重构胚,相反,继Ⅱ代远低于前两者,差异极显著(P＜0.01).结论波尔山羊体细胞核经第1次核移植过程中异种受体卵胞质作用后,比高度分化的体细胞更有利于重构胚的发育,但异种山羊克隆胚卵裂球反复多次暴露在异种卵胞质中,可能不利于细胞核的发育.
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胚胎干细胞培养体系对早期胚胎发育的影响
目的利用胚胎干细胞(ES)培养体系(饲养细胞+添加条件培养基的胚胎干细胞培养液)培养早期胚胎,建立并优化移植前早期胚胎培养系统,为提高胚胎的着床率与临床妊娠率及植入前遗传学诊断奠定基础.方法将获取的521枚胚胎根据培养液及饲养细胞的不同分为10组,分别比较各组胚胎的体外发育率.结果ES培养体系显著优于传统的胚胎培养体系(P＜0.05).ES培养体系中用SIM小鼠成纤维细胞耐硫代鸟嘌呤和耐乌苷亚系(STO)作饲养细胞培养效果优于小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)饲养细胞,两种饲养细胞效果均显著优于用输卵管上皮细胞(OEC)作为饲养细胞(P＜0.05).结论ES培养体系可以显著提高早期胚胎的发育率,培养体系中STO饲养细胞较MEF饲养细胞有更好的效果.
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固肾安胎中药对小鼠早期胚胎体外发育的影响
固肾安胎中药在助孕保胎方面有着良好的临床疗效,其中尤以寿胎丸为经典名方.本研究旨在通过采用血清药理学及胚胎体外培养的实验方法,动态观察配有各种含药血清的培养基中早期胚胎各期(2CE至囊胚)的发育率,研究单味固肾安胎中药及寿胎丸对早期胚胎发育的作用,以探讨固肾安胎中药对早期胚胎发育的影响及作用机制.
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云南6种方法及各虫期发育率
为完成有关蚤类生物学特性和鼠疫传播试验等研究作准备，我们对云南省家鼠鼠疫疫源地的印鼠客蚤（Xenopsylla cheopis）、缓慢细蚤（Leptosylla segnis）和不等单蚤（Monopsylla anisus）[1]，野鼠鼠疫疫源地的特新蚤指名亚种（Neopsylla specialis specialis，简称特新蚤）、棕形额蚤（Frontopsylla spadix）和方叶栉眼蚤（Ctecnophtalmus quadratus）[2]进行了养殖方法及各虫期发育率的观察。
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纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响
纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少.本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵母细胞,使用形态观察和荧光染色的方法,研究其对细胞存活率和发育率的影响.结果显示在实验浓度范围内,HA较其它纳米颗粒对猪卵母细胞的毒性低,当浓度低于0.5％时,细胞发育率为100％；低温保护剂中添加0.1％HA纳米颗粒,发育率比其它组显著提高,可以达到22％,且HA的粒径对结果影响不大；当低温保护剂中添加0.05％粒径为60 nm的HA颗粒时,卵母细胞冷冻复温后发育率会进一步从14.7％提高达到30.4％.在低温保护剂中添加适宜浓度的HA纳米颗粒,可以减少复温过程中的重结晶现象,促进细胞的冷冻存活率和发育率,保存效果与浓度相关,而与纳米颗粒的粒径关系不大.
