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参茶同用对人参总皂苷含量影响的研究
目的 研究人参与茶叶同用对人参总皂苷含量的影响.方法 以人参皂苷Rg1为对照品,用比色法分别测定人参组、人参绿茶组、人参乌龙茶组、人参红茶组中人参总皂苷含量,并将人参组分别与人参茶叶同用各组进行含量比较.结果 与人参组比较的参茶同用各组,人参总皂苷含量均显著降低,差异有统计学意义(P<0.001).结论 人参不宜与茶叶同用.
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石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠海马中单胺类神经递质的影响
目的:研究石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠的海马中单胺类神经递质的影响.方法:60只APP/PS1双转基因小鼠随机分为6组,雌雄各半,每组10只,即模型组、人参总皂苷(75mg/kg)组、石菖蒲挥发油(15mg/kg)组及石菖蒲挥发油+人参总皂苷低(15 mg/kg +75mg/kg)、中(30 mg/kg+ 150 mg/kg)、高(60mg/kg+ 300 mg/kg)剂量组.正常对照组为C57BL/6品系的正常小鼠10只,雌雄各半.模型组和正常对照组用等体积蒸馏水代替,灌胃给药,连续30 d.末次给药后心脏灌注排血后取出海马组织,采用高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FD)法检测多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)和去甲肾上腺素(NE)的含量.结果:与正常对照组比较,模型组DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA、NE含量及(DOPAC+ HVA)/DA、5-HIAA/5-HT、DA/5-HT比值显著降低(P＜0.01),DA/NE、5-HT/NE比值显著升高(P＜0.01).与模型组比较,石菖蒲挥发油+人参总皂苷各剂量组DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA、NE含量及(DOPAC+HVA)/DA、5-HIAA/5-HT、DA/5-HT比值显著升高(P＜0.01),DA/NE及5-HT/NE比值显著降低(P＜0.01),且效果优于人参总皂苷组或石菖蒲挥发油组.结论:石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠海马中DA和5-HT的生成及代谢及NE的生成均有促进作用.
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石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对D-半乳糖联合氯化铝致阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力及脑组织细胞凋亡的影响
目的:研究石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对D-半乳糖联合氯化铝致阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠的学习记忆能力及脑组织细胞凋亡的影响.方法:将50只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、安理申组(1 mg/kg)、定志丸组(10g/kg)和石菖蒲挥发油+人参总皂苷组(石菖蒲挥发油30 mg/kg,人参总皂苷150mg/kg).除正常对照组外,各组小鼠通过腹腔注射D-半乳糖(150 mg/kg)并灌胃氯化铝(5 mg/kg)制备AD模型,连续40 d,1次/d.在造模第20天开始各组小鼠同时给予相应药物治疗,连续给药40 d,1次/d.用水迷宫实验和避暗实验来考察小鼠学习记忆能力;ELISA检测皮质和海马Aβ1-42和BCL-2的含量,紫外分光光度法检测皮质和海马乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱转移酶(ChAT)的活性,WST-1法检测皮质和海马超氧化物歧化酶(SOD)活性,TBA法检测皮质和海马丙二醛(MDA)含量;免疫组化法观察Aβ1-42沉淀形成的老年斑情况;HE染色观察脑组织形态.结果:与模型组比较,石菖蒲挥发油+人参总皂苷组AD小鼠的游泳时间、盲区数和错误次数显著减少(P＜0.05),潜伏期时间显著延长(P＜0.05);皮质和海马中的AChE活性增强、Aβ1-42和MDA的含量显著降低(P＜0.05或P＜0.01),ChAT和SOD活性、BCL-2含量显著升高(P＜0.05或P＜0.01);老年斑形成减少,脑组织形态明显改善.结论:石菖蒲挥发油联合人参总皂苷能提高AD小鼠学习记忆能力并抑制脑组织细胞凋亡.
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人参总皂苷对痰湿证大鼠肝肾组织中有机阴离子转运肽oatp2b1基因和蛋白表达的影响
目的:观察人参总皂苷对痰湿状态下大鼠肝肾组织中有机阴离子转运肽oatp2b1表达的影响,探讨人参总皂苷治疗痰湿证的作用机理及oatp2b1在痰湿转运中的作用.方法:36只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组及人参皂苷组,每组12只.模型组采用高脂饮食造模3个月,造模后,人参皂苷组灌胃人参总皂苷水溶液(70 mg/kg),正常对照组与模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续4 w.每只大鼠取肝、肾组织各1块.采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测各组大鼠组织中oat p2b1的基因、蛋白表达情况并检测血清中总胆固醇(TG)、三酰甘油(TC)、高密度脂蛋白胆同醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平.结果:模型组肝、肾组织oatp2b1基因表达较正常对照组显著降低(P＜0.01,P ＜0.05),人参皂苷组肝、肾组织oatp2b1 mRNA表达量较模型组显著升高(P＜0.05,P ＜0.01);oatp2b1蛋白在肝、肾组织中有不同程度表达,三组间比较差异无统计学意义.模型组大鼠血清TC、TG、LDL水平较正常对照组显著升高,HDL水平显著降低(P＜0.5),提示高脂饮食可致血脂代谢率乱,痰湿模型造模成功.人参皂苷组大鼠血清TC、TG、LDL水平较模型组减低,HDL水平升高.结论:oatp2b1是参与痰湿转运的物质基础之一,人参总皂苷治疗痰湿证的机理之一可能是通过调节oatp2b1的表达而发挥运化痰浊的作用.
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响应曲面优化超微粉碎参须中人参总皂苷的溶出工艺
目的:研究超微粉碎的粉碎度、提取时间、乙醇体积分数、提取温度等因素对参须中人参总皂苷溶出的影响,并探讨不同因素之间的交互作用.方法:通过单因素试验探讨粉碎度、提取时间、乙醇体积分数、提取温度等因素对参须中人参总皂苷溶出率的影响,在单因素试验基础上,利用响应曲面法对影响人参总皂苷溶出率的3个主要因素即超微粉碎时间、提取时间和乙醇体积分数进行优化.结果:人参总皂苷的含量与所考察的3个因素之间关系符合二次模型.确定佳溶出工艺参数为:参须超微粉碎时间为9 min,70％乙醇为溶剂,提取温度50℃,提取时间70 min.实验结果显示,此条件下人参总皂苷平均溶出率为94.81％,与模型预测值非常接近,说明该模型比较可靠.结论:该优化工艺溶出快速、高效、简单、稳定.
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大孔树脂富集纯化人参总皂苷工艺条件优选
目的:考察D101型大孔树脂富集纯化人参总皂苷的佳工艺条件.方法:采用均匀设计考察药液浓度、药液pH值、洗脱流速、吸附流速等参数对人参总皂苷得率、人参总皂苷纯度效果的影响,用紫外分光光度计测定人参总皂苷含量、用重量法计算人参总皂苷得率.结果:大孔树脂富集纯化的佳工艺条件是在药液浓度12.38mg/ml、药液pH值7.0,洗脱流速1.5 ml/min,吸附流速2.0 ml/min条件下,用5%乙醇洗脱人参总皂苷.结论:在所确定的工艺条件下,乙醇洗脱物中人参总皂苷纯度达85%以上,人参总皂苷得率达65%以上,为大生产应用提供依据.
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西洋参冠瘿组织悬浮培养及其人参总皂苷的含量测定
目的:在西洋参冠瘿组织固体培养的基础上,进一步考察其悬浮培养条件及人参总皂苷含量,为利用西洋参冠瘿组织大规模生产药用成分提供科学根据.方法:考察固体培养和悬浮培养对西洋参冠瘿组织生长和人参总皂苷累积的影响,并检测悬浮培养液中碳源的消耗.结果:冠瘿组织在悬浮培养中生长速度快,生长量和总皂苷产量分别达到0.776 g DW/flask和19.4 mg/flask,是固体培养的2.11和1.64倍;培养基中蔗糖利用率达到91.8%,远远高于西洋参愈伤组织悬浮培养中的蔗糖利用率.结论:西洋参冠瘿组织悬浮培养既可大大提高生物工程产品的生物量,又能获得较高含量的人参总皂苷,可为大规模生产药用活性物质提供参考.
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大孔树脂吸附人参总皂苷的使用寿命及强化再生的研究
目的 研究D101型大孔树脂吸附人参总皂苷的使用寿命和强化再生方法.方法 以人参总皂苷比吸附量为指标,观察大孔树脂在多次吸附洗脱和用不同方法强化再生后的吸附能力变化.结果 吸附52次后,树脂比吸附量下降10%;经强化再生处理,吸附能力恢复.结论 D101型大孔树脂吸附人参总皂苷可以使用52次以上,采用强化再生处理后可以重新使用.
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人参总皂苷对波动性高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响
目的 观察人参总皂苷( TSPG)在体外培养的波动性高糖环境下对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡及超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响,探讨其可能的保护性干预作用.方法 参考文献报道,选用HUVEC进行体外培养,建立波动性高糖损伤模型,用MTT法检测波动性高糖对HUVEC的损伤情况；观察各实验组HUVEC形态学变化；流式细胞术检测TSPG对HUVEC凋亡的影响；测定各实验组培养上清液中SOD、MDA水平.结果 (1)空白对照组细胞呈形态较规则的铺路石样且边界清楚,其他实验组细胞生长均有不同程度的损伤,但加TSPG组细胞形态变化明显优于波动性高糖组；(2)波动性高糖可诱导HUVEC产生凋亡,凋亡率明显高于空白对照组,MDA含量升高,而SOD活性则明显下降,两组比较,差异具有显著性意义(P＜0.001)；(3)人参总皂苷组的HUVEC凋亡率下降,SOD活性上升,MDA含量下降,与模型组比较,均有显著性差异(P＜0.05).结论 TSPG可明显抑制波动性高糖所致的HUVEC凋亡,可使细胞上清液中SOD活性增加,MDA含量降低,从而对波动性高糖所致的HUVEC损伤表现出一定的保护作用.
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补气开窍法对APP/PS1双转基因小鼠认知能力和β-淀粉样肽42的影响
[目的]探讨补气开窍法对APP/PS1双转基因小鼠认知能力和β-淀粉样肽42 (Aβ42)的影响及其自噬机制.[方法]将56只APP/PS1双转基因小鼠随机分为4组,雌雄各半,每组14只,即模型组、人参总皂苷组(剂量为75 mg/kg)、石菖蒲挥发油组(剂量为15 mg/kg)、补气开窍方组(剂量为石菖蒲挥发油15 mg/kg+人参总皂苷75 mg/kg).另设正常组,C57BL/6品系的正常小鼠14只,雌雄各半.各组灌胃给药,模型组和正常组用等体积的蒸馏水代替,给药30 d.末次给药结束1h后,先将各组小鼠进行行为学检测(水迷宫实验,避暗实验和跳台实验),再麻醉各组小鼠,其中4只灌注固定后的全脑用于免疫组织化学法检测Aβ42,其余小鼠在冰上迅速取出海马用于检测Aβ.,流式细胞术检测磷酸化的哺乳动物雷帕霉素蛋白(p-mTOR)和自噬相关基因(Beclin-1). [结果]与正常组比较,模型组水迷宫实验的潜伏期显著延长(P＜0.01),避暗实验和跳台实验的潜伏期显著缩短(P＜0.01),Aβ42含量和Beclin-1表达显著增加(P＜0.01),p-mTOR表达显著减少(P＜0.01);与模型组、人参总皂苷组、石菖蒲挥发油组比较,补气开窍方组的水迷宫实验的潜伏期显著缩短(P＜0.05),避暗实验和跳台实验的潜伏期显著延长(P＜0.05),水迷宫实验、避暗实验和跳台实验的错误次数显著减少(P＜0.05),Aβ42含量显著减少(P＜0.05),此外,与模型组比较,补气开窍方组的p-mTOR表达显著增加(P＜0.05),Beclin-1表达显著减少(P＜0.05).[结论]人参总皂苷联合石菖蒲挥发油具有改善APP/PS1双转基因模型小鼠的认知能力,减少Aβ42表达和调节自噬作用,且优于单独使用人参总皂苷组或石菖蒲挥发油组.
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分光光度法测定益气胶囊中总皂苷含量
目的:建立益气胶囊中人参总皂苷含量的测定方法.方法:采用大孔吸附树脂分离-比色法测定,以香草醛-硫酸为显色剂,人参皂苷Rg1为对照品,测定波长λ=542 nm.结果:人参皂苷Rg1在0.049～0.194 mg/mL浓度范围内线性关系良好,Y= 5.7356X-0.176,r=0.9990.平均回收率为96.95%±1.29%,方法精密度RSD=2.97%(n=5).测得4批样品的标示量分别为0.24%、0.23%、0.28%、0.27%.结论:本方法简便、快速、准确、重复性好,可用作益气胶囊的质量控制.
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黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节作用初步研究
目的:研究黄芪多糖(APS)与人参总皂苷(TG)联用对正常人外周血T细胞增殖及对环磷酰胺(CY)处理后小鼠免疫功能的影响.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测并计算人外周血T细胞的增殖率;测定小鼠脾脏、胸腺等免疫器官重量.结果:APS浓度在25～100μg/ml范围内、TG浓度在5～20μg/ml范围内均可促进人外周血T细胞的增殖,增殖率分别为102.3%～141.1%和113.9%～163.1%,二者联用后的增殖率为262.3%～383.0%;与CY组比较,APS、APS+TG组小鼠脾脏指数明显更高(P＜0.05),而TG组无明显差异.结论:APS与T G联用能促进正常人外周血T细胞增殖和增强小鼠免疫功能,并具有一定的协同作用.
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人参总皂苷对脾虚模型大鼠的保护作用研究
目的:研究人参总皂苷对脾虚模型大鼠的保护作用.方法:连续12周迫使大鼠在冷水[(10±1)℃]中游泳至“力竭”并联合单日禁食双日高脂饮食以复制大鼠脾虚模型.实验分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、人参总皂苷(50μg/kg)组,腹腔注射给药,每天1次,连续12周.检测大鼠体质量、体温,胸腺指数、脾脏指数与血清中白细胞介素(IL)-2、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数显著降低(P＜0.01或P＜0.05),血清中IL-2、IL-6、TNF-α含量显著降低(P＜0.01或P＜0.05);与模型组比较,人参总皂苷组大鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数显著升高(P＜0.01或P＜0.05),血清中IL-2、IL-6、TNF-α含量显著升高(P＜0.01或P＜0.05).结论:人参总皂苷对脾虚模型大鼠有一定保护作用,其机制可能是通过提高细胞因子水平,恢复机体免疫功能,从而达到健脾益气的功效.
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人参总皂苷和枸杞多糖的溶解特性与脂质体包封率的关系研究
目的:研究药物的溶解度、油水分配系数与脂质体包封率的关系.方法:测定人参总皂苷和枸杞多糖的溶解度及油水分配系数；采用逆向蒸发法制备人参总皂苷脂质体和枸杞多糖脂质体,并测定各脂质体的包封率.结果:人参总皂苷的油水分配系数为0.45,制得的人参总皂苷脂质体包封率为59.06%；枸杞多糖的油水分配系数为0.98,制得的枸杞多糖脂质体包封率为47.61%.结论:油水分配系数对包封率有一定的影响.
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响应曲面法优化人参总皂苷动态连续循环提取工艺
目的 优化人参总皂苷的提取工艺.方法 在单因素试验考察乙醇体积分数、药材粒径、溶剂流速、浓缩温度对人参总皂苷转移率的影响基础上,通过响应曲面法对人参总皂苷动态连续循环提取工艺进行优化.结果 人参总皂苷的含量与所考察3个因素之间关系符合二次回归模型.优化后人参总皂苷的佳提取工艺为,乙醇体积分数78％,超微粉碎时间10 min,溶剂流速24 mL/min,浓缩温度65℃.人参总皂苷转移率为85.64％ (P＜0.000 1),验证试验结果与预测值偏差为2.58％,说明该模型比较可靠.结论 该方法科学、合理、可行,对人参总皂苷提取工艺应用于实际生产具有重要的参考价值.
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春上枝头洗发水质量控制研究
目的 研究春上枝头洗发水的质量控制方法.方法 采用薄层色谱法对方中人参、丹参、川芎、当归、何首乌、苦参进行鉴别;采用加水稀释及柱层析除杂法制备测定样品;采用紫外分光光度法(UV法)测定总皂苷含量,绘制标准曲线,制订回归方程,计算人参总皂苷含量.结果 薄层色谱鉴别灵敏、专属性好、准确性高、重复性好.总皂苷(以人参皂苷Re计)进样量在0.101~0.606 mg范围内与吸光度线性关系良好(r ＝ 0.999 3);平均回收率为94. 87％～98. 57％,RSD 为0.70％～4.82％(n ＝ 6).结论 该方法可用作春上枝头洗发水的质量控制方法.
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人参总皂苷对PC12细胞分化的影响
目的:研究人参总皂苷(Total saponin ofpanax ginseng,TSPG)诱导PC12细胞神经元性分化的作用.方法:体外培养PC12细胞,观察PC12细胞在TSPG的影响下细胞发生的形态学改变.诱导48 h透射电镜观察突触连接形成情况,72 h利用免疫细胞化学技术,观察TSPG作用后PC12细胞向MAP-2(Microtubule-associatedprotein 2)阳性细胞分化的情况.结果:TSPG作用后的PC12细胞其突起长度和细胞直径较对照组明显增长和增大[长度由(13.95±2.59)μm增长至(30.33±3.82)μm;直径由(8.25±1.82)μm提高到(14.33±2.84)μm,P＜0.05].TSPG能促进PC12细胞形成突触连接.TSPG组表达MAP2的阳性细胞率明显高于对照组(由4.55%提高到12.22%,P＜0.05).结论:TSPG具有诱导PC12细胞神经元性分化的作用.
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人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1-α增殖的影响
目的 探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨.方法 体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验.空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组.培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR 技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达.用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性.结果 人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100 μmol/L为适作用浓度,7d为适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P＜0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-EPOR表达明显下调,Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调,而Bax、Cleaved Caspase-3表达增高,P53及P16无变化;然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加,Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达没有变化.结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的Jak-STAT通路相关蛋白的表达,并降低EPOR的活性,进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspase-3来促进细胞凋亡;而添加了EPO后这种作用被拮抗,抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的.
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人参总皂苷对放射所致骨髓造血细胞衰老的保护作用
目的 探讨人参总皂苷(total saponins of panax ginseng,TSPG)抗放射(6.5 Gy)所致骨髓造血细胞损伤衰老的作用.方法 40只雄性C57BL/6小鼠分为4组(每组10只):对照组、放射(irradiation,IR)组、IR+ T50(TSPG 50 mg/kg)组、IR+ T200(TSPG 200 mg/kg)组.先给药3d,然后照射,照射后继续给药7d,检测外周血的变化情况,计数各组骨髓单个核细胞数、骨髓造血细胞集落生成单位(CFU)的数量,观察形态变化；流式细胞术检测周期变化；回收CFU细胞进行β-半乳糖苷酶衰老(SA-β-gal)染色和细胞免疫荧光分析p16Ink4a蛋白的表达水平.结果 与IR组比较,给药处理后,IR+T200组的白细胞数增加至(2.19±0.87)(P＜0.05),但各组之间红细胞与血小板均无明显变化(P＞0.05)；IR+T200组的单个核细胞数及集落个数均明显增加(P＜0.05)；骨髓造血细胞周期G1期细胞比例随药物浓度增加有减少的趋势；SA-β-gal染色和p16Ink4a细胞免疫荧光染色均显示,IR+ T200组的CFU中细胞阳性率明显降低(P＜0.05).结论 合适剂量的TSPG(200 mg/kg)对放射引起的造血细胞损伤衰老有保护作用.
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复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的研究
目的:探讨复方黄芪多糖拮抗环磷酰胺对小鼠毒副作用的影响.方法:对小鼠行大剂量(85 mg/kg,2次)环磷酰胺(CY)腹腔注射,并用复方黄芪多糖腹腔注射预防,以观察复方黄芪多糖对CY毒副作用的影响.结果:与CY组比较复方黄芪多糖注射组(10ml/kg、20 ml/kg)小鼠WBC及LMY计数明显高于环磷酰胺组(P＜0.05),GRA比率低于环磷酰胺组(P＜0.05),脾脏指数明显高于CY组(P＜0.01).结论:复方黄芪多糖具有拮抗CY对小鼠毒副作用的效应.
