首页 > 文献资料
-
一株产苯乳酸的植物乳杆菌发酵条件的研究
目的:探讨一株产苯乳酸的植物乳杆菌突变株KLDS1.0728-16-30的佳发酵条件.方法:采用平板菌落计数方法,确定适发酵温度、接种量、pH、搅拌速度和发酵时间.结果:该菌株按照1%接种量,在37℃、pH 6.5、100 r/min条件下培养8 h后,发酵液活菌数达到高值,为1.09×1010 CFU/mL.结论:经过优化发酵工艺参数,使活菌数提高了近一个数量级,为该菌株的开发和应用提供了参考.
-
益生菌在当前市场的应用现状
近年来，一些益生菌已被卫生部批准作为新资源食品，广泛应用于乳制品行业，同时也逐步被应用于其他功能性食品，如固体饮料、果汁、冰淇淋、糖果、巧克力、泡菜等。在亚洲地区益生菌普遍应用于奶制品领域，例如酸奶、乳酸菌饮品等。常见益生菌主要指两大类乳酸菌群：一类为双歧杆菌，常见的有婴儿双歧杆菌，长双歧杆菌，短双歧杆菌，青春双歧杆菌等；另一类为乳杆菌，如嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌，副干酪乳杆菌，鼠李糖乳杆菌，植物乳杆菌和罗伊氏乳杆菌等。
-
植物乳杆菌发酵转化人参皂苷的研究
目的:探索植物乳杆菌对人参的发酵工艺,将人参中的部分人参总苷转化成活性更强的人参皂苷Rd.方法:采用静止暗培养法进行微生物发酵;索氏提取法提取人参总苷;香草醛-硫酸显色,紫外-可见分光光度法测定人参总苷含量;HPLC测定供试品中人参皂苷Rd含量.结果:植物乳杆菌对人参的发酵工艺为:发酵培养基为MRS培养基、培养温度35℃、培养pH为5.0、发酵时间2d;发酵后的人参,其发酵产物中人参总苷含量提高了32％,单体人参皂苷Rd含量增加4.864 mg·g-1.结论:建立的发酵体系工艺合理,适用于大规模生产,对微生物转化人参皂苷的研究具有重要意义.
-
植物乳杆菌对IL-10基因敲除结肠炎小鼠黏附分子的影响
目的: 观察植物乳杆菌( Lactobacillus plantarum,LP)灌胃对IL-10基因敲除小鼠肠道炎症和淋巴细胞归巢的影响.方法: 取IL-10基因敲除(knockout,KO)小鼠和未作基因敲除的背景鼠分为4组: 对照组(野生组WT)、加植物乳杆菌组(WT+LP)、IL-10基因敲除模型组(KO)、模型加植物乳杆菌组(KO+LP).4 wk开始对照组和KO组每日予PBS灌胃,WT+LP和KO+LP组予溶于PBS的LP灌胃,持续4-8 wk结束.实验结束后取各组小鼠结肠行炎症评分和电镜亚显微结构观察,并用RT-PCR和Western blot检测归巢相关分子MAdCAM-1、ICAM-1、α4β7及CD3的表达.结果: 8 w k 后K O小鼠1 0 0%发生肠道炎症,且其CD3及黏附分子α4β7、ICAM-1和MAdCAM-1的mRNA和蛋白表达水平较WT组均明显增高(mRNA: t = 39.42,8.83,25.53,45.78,均P＜0.01;CD3、ICAM-1、MAdCAM-1蛋白: t = 19.04,29.57,12.29,均P＜0.01).予以益生菌LP灌胃后,KO+LP组小鼠CD3及黏附分子α4β7、ICAM-1和MAdCAM-1的mRNA和蛋白表达水平较KO组均明显降低(mRNA: t = 20.34;4.95;14.21;22.31,均P＜0.01;CD3、ICAM-1、MAdCAM-1蛋白: t = 6.82,14.10,7.03,均P＜0.01);WT+L P组小鼠CD3及黏附分子α4β7、ICAM-1和MAdCAM-1的mRNA较WT组均明显降低( t = 9.33,10.55,7.75,6.69,均P＜0.01),而WT+LP组小鼠CD3及黏附分子ICAM-1和MAdCAM-1的蛋白表达水平无明显降低.结论: 植物乳杆菌能下调黏附分子在IL-10基因敲除结肠炎小鼠中的高表达,这可能是其减轻炎症状态,缓解炎症性肠病的重要机制之一.
-
植物乳杆菌对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎的治疗作用
目的:评估益生菌植物乳杆菌(LP)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导小鼠肠道炎症损伤的治疗作用,并探讨其可能的作用机制.方法:将成年♀Balb/c鼠随机分成3组:正常对照组(Control组),TNBS灌肠诱导小鼠结肠炎组(TNBS组)和LP干预组(TNBS+LP组).TNBS诱导肠炎模型建立后,给予TNBS+LP组小鼠灌胃LP3wk,其余两组灌胃空白对照PBS液.实验结束后对大鼠一般情况、结肠大体损伤及组织学损伤进行评估,并对各组小鼠结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性、LTB4含量及促炎细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达进行测定.结果:与TNBS诱导的TNBS组相比,LP明显减轻了TNBS诱导的小鼠结肠炎症,表现为疾病活动指数下降(3.37±0.36vs0.97±0.47,P<0.05),结肠大体和组织学评分显著降低(1.11±0.61vs4.62±0.40;1.48±0.40vs5.39±1.12,均P<0.05),且LP显著降低了TNBS诱导的小鼠结肠黏膜内中性粒细胞浸润,这与MPO活性降低相一致(25.14U/g±5.22U/g vs90.3U/g±7.70U/g,P<0.05).此外,LP明显降低了TNBS诱导的小鼠结肠内具有化学趋化活性的LTB4含量(3.13ng/g±0.10ng/g vs8.43ng/g±0.49ng/g,P<0.05)和增加了促炎细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达(205ng/g±68ng/g vs375ng/g±79ng/g;446ng/g±116ng/g vs603ng/g±109ng/g,均P<0.05).结论:口服植物乳杆菌能有效缓解TNBS诱导的小鼠结肠炎症状,其作用机制可能与其降低白细胞聚集及促炎细胞因子的表达有关.
-
关键词：
-
唾液乳杆菌、嗜酸乳杆菌及植物乳杆菌三联活菌制剂联合三联疗法根除幽门螺杆菌的临床研究
目的:探讨唾液乳杆菌、嗜酸乳杆菌及植物乳杆菌三联活菌制剂联合三联疗法根除幽门螺杆菌的临床效果.方法:按照入院顺序抽签后随机将180例Hp阳性慢性胃炎或消化性溃疡患者分为益生菌组和对照组,每组各90例.对照组患者给予常规三联疗法治疗,益生菌组患者在此基础上加用益生菌治疗,比较两组患者治疗8周后临床疗效,Hp根除效果及治疗过程中不良反应情况.结果:益生菌组患者治疗总有效率显著高于对照组(94.44％ vs 83.33％),比较差异有统计学意义(P＜0.05);益生菌组患者Hp根除率显著高于对照组(93.33％ vs 81.11％),比较差异有统计学意义(P＜0.05);益生菌组患者不良反应发生率显著低于对照组(14.44％ vs 35.56％),比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:唾液乳杆菌、嗜酸乳杆菌及植物乳杆菌三联活菌制剂联合三联疗法根除幽门螺杆菌效果好,不良反应少,可作为优选治疗方案.
-
具广谱抑菌作用的植物乳杆菌素LPC718发酵培养基的优化
目的 提高植物乳杆菌素LPC718的产量.方法 在单因素试验的基础上,利用响应面法对培养基成分进行优化.结果 单因素试验表明,产植物乳杆菌素LPC718优碳源、氮源分别为蔗糖和聚蛋白胨,适刺激因子为吐温80.Plackett-Burman试验表明,蔗糖、牛肉膏和硫酸镁是影响植物乳杆菌素LPC718产量的三个显著因子.Box-Benhnken试验确定了适培养基成分为(g/L):蔗糖41.16,酵母粉5.00,聚蛋白胨10.00,牛肉膏20.49,七水硫酸镁1.13,磷酸氢二钾2.00,柠檬酸二铵5.00,乙酸钠5.00,硫酸锰0.25,吐温80 5.00 mL.在适条件下所获抑菌圈直径为23.35mm,与模型预期值接近,抑菌活性比优化前提高了72.96％.结论 获得了佳培养基配方,为进一步在食品保鲜中的研究奠定了基础.
-
温度和渗透应激对植物乳杆菌稳定性的影响
在植物乳杆菌对数期后期,高温(43～47℃)、低温(15～25℃)及10～30 g/L NaCl等应激处理60min均可使植物乳杆菌耐热性和耐酸性得到较大的提高.其中,尤以高温应激45℃应激处理效果好,细胞耐热残存率和耐酸残存率较对照分别提高124%和56.8%.
-
植物乳杆菌发酵、冻干工艺及其益生特性的研究
目的 以Lactobacillus plantarum SQ-2506为目标,研究该菌株的发酵、冻干工艺及其益生特性.方法 通过对培养基中C源、N源和刺激因子的浓度改变考察对活菌数的影响,从而确定培养基的佳配方;在确定佳培养基后做出该菌的生长曲线以确定佳发酵时间点;同时考察冻干保护剂的配方和预冷时间对菌粉活菌数的影响;此外,对植物乳杆菌进行产酸、产H2O2、生物膜形成能力、抑菌特性以及抗氧化能力的检测.结果 佳MRS培养基中葡萄糖浓度为0.8％、酪蛋白胨为0.4％、牛肉粉为0.6％、吐温为0.06％;植物乳杆菌的生长曲线在5h时达到稳定期,此时发酵液活菌数为3.16×109 CFU/mL,发酵液的pH为4.45.佳冻干保护剂的配方:脱脂乳100 g/L,蔗糖120 g/L,抗坏血酸20 g/L,谷氨酸钠30 g/L;冻干前对上机液预冻时间为2h,此时菌粉冻干存活率为70.21％.该菌株具有产酸、产H2 O2能力,并对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白色假丝酵母均有一定的抑制作用,形成膜能力较强,且具有一定的抗氧化能力.结论 通过培养基成分、发酵条件和冻干工艺的优化以及对其益生特性的研究,为下一步新药开发和规模化生产奠定基础.
-
植物乳杆菌ST Ⅲ对大鼠小肠上皮细胞钙离子吸收的影响
目的 探讨乳杆菌对小肠上皮钙离子吸收的影响及其作用机制.方法 测定植物乳杆菌ST Ⅲ发酵上清液对复合钙盐解离效果的基础上,通过MTT比色法测定植物乳杆菌ST Ⅲ发酵上清液对大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)增殖率影响以及用fluo-3AM荧光染色观察对IEC-6细胞内游离钙离子浓度变化.结果 植物乳杆菌ST Ⅲ发酵上清液对大鼠IEC-6增殖有明显的促进作用,与对照组比较差异有统计学意义,24 h(F=548.401,P=0.000,P＜0.05),48 h(F=722.352,P=0.000,P＜0.05),并呈良好的量效关系;同时植物乳酸菌ST Ⅲ发酵上清液刺激后小肠隐窝上皮细胞6、12和24 h,细胞内游离钙离子荧光强度相对值明显高于对照组,6h(F=203.911,P=0.000,P＜0.05),12 h(F=106.158,P=0.000,P＜0.05),24 h(F=26.076,P=0.000,P＜0.05),差异有统计学意义.结论 植物乳杆菌ST Ⅲ在细胞水平上促进小肠上皮增殖并对细胞内Ca2+有明显的促进作用.
-
一种快速定量检测益生菌制品中植物乳杆菌的方法
目的 建立快速定量检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰.方法 利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行实时荧光定量PCR反应.结果 设计的引物具有良好的种特异性,检测限为2.26×102 CFU/mL.结论 该方法快速灵敏,可以在实际生产中应用.
-
昂立植物乳杆菌发酵及其稳定性能的研究
研究昂立植物乳杆菌(LP-Onlly)的发酵特性、耐药性及遗传稳定性.结果表明LP-Onlly发酵培养条件为:37 ℃培养16～18 h发酵结束,pH可达4.4左右;LP-Onlly对研究的33种抗生素敏感、7种耐受;LP-Onlly连续传代15代后,基因组DNA指纹图谱及代谢产物HPLC指纹图谱与原代保持一致.
-
昂立植物乳杆菌及其抑菌物质的特性研究
该文研究了昂立植物乳杆菌(LP-Onlly)菌体及其代谢产物的抑菌性能,并对其代谢产物中的抑菌物质进行了部分理化特性的考察,发现LP-Onlly菌体对部分肠道有害菌有抑制作用,代谢产物中的抑菌物质对常见的肠道致病菌和食品腐败微生物具有广谱抑菌作用,对嗜酸乳杆菌及双歧杆菌等益生菌无抑制作用.该物质具有热稳定性,但抑菌活性受pH值的影响较大.
-
昂立植物乳杆菌耐酸、耐胆盐性能及相关表型、基因型分析
目的从益生菌功能性评价出发,探讨昂立植物乳杆菌(LP-Onlly)的耐酸、耐胆盐性能及其相关的表型和基因型信息.结果 LP-Onlly在耐酸、耐胆盐性能方面,优于其他实验室保存菌株,在pH 3、37 ℃培养3 h后,LP-Onlly活菌存活率达95%以上.在1.0%胆盐的MRS培养液中生长24 h后,LP-Onlly活菌存活率达95%以上.经表型及分子鉴定,LP-Onlly为植物乳杆菌,其16S rDNA序列保存于GenBank, 登录号为AY 590777,与实验室保存的其他植物乳杆菌的基因DNA指纹图谱相似率达71%.
-
昂立植物乳杆菌粘附肠上皮细胞的研究
目的研究益生菌粘附肠上皮细胞机制,探讨益生菌的生物屏障机制,筛选益生菌.方法研究昂立植物乳杆菌(LP-Onlly)培养上清液,对病原菌和自身菌粘附Lovo细胞的影响.结果培养12 h的LP-Onlly发酵上清液在一定程度上能抑制病原菌的粘附,同时耗尽培养上清液,有促进自身菌粘附的作用.结论耗尽培养上清液中存在粘附素成分,能介导该菌的粘附.
-
昂立植物乳杆菌对腹腔感染大鼠肠道微生态的影响
目的探讨经肠道补充昂立植物乳杆菌(LP-Onlly)对腹腔感染大鼠肠道微生态的影响.方法大鼠经盲肠结扎穿孔法及颈静脉空肠置管制成腹腔感染模型后,分别给予肠外营养(PN组)和PN+昂立植物乳杆菌(LP-Onlly组)持续5 d,第6天处死,取盲肠内粪便进行肠菌群培养计数及细菌种群DNA指纹图谱分析.结果 LP-Onlly组大鼠肠道内的乳杆菌和双歧杆菌数量较单纯PN组的大鼠为多,而肠道内的潜在致病菌产气荚膜梭菌数量较单纯PN组的大鼠少,DNA指纹图谱也显示LP-Onlly组大鼠优势菌群的基因条带和正常大鼠具有较高的一致性,而PN组则差异有显著性.结论 LP-Onlly能纠正腹腔感染大鼠PN时的肠道菌群紊乱, 调理肠道微生态平衡.
-
植物乳杆菌M1-UVs29体外降解胆固醇的作用
目的 探讨植物乳杆菌M1-UVs29在不同条件下降解胆同醇的能力.方法 将M1-UVs29干菌粉活化后,分别接种至MRS液体培养基、MRS-胆盐培养基、MRS-胆固醇培养基和MRS-胆盐-胆同醇培养基中培养,绘制M1-UVs29在不同培养基中的生长曲线;以胆固醇降解率为指标,考察M 1-UVs29在不同条件下(胆固醇、胆盐添加量及菌种数量)降解胆固醇的能力.结果 胆盐具有抑制菌体生长的作用,胆周醇具有缓解胆盐对菌体生长抑制的作用.随着培养基中胆固醇含量的逐渐增加,胆固醇降解率也随之升高,趋势相对稳定,培养基中胆盐含量为0.2％,胆固醇含量为400 μg/ml时,胆周醇降解率可达34.76％;随着培养基中胆盐含量的逐渐增加,胆周醇降解率也增加,但不呈规律性变化,培养基中胆固醇含量为100 μg/ml,胆盐含量为0.4％时,胆固醇降解率可达32.85％;培养基中胆盐含量大于0.5％,胆固醇降解率极剧下降;培养基中胆周醇含量为100 μg/ml,胆盐含量为0.2％,菌种数量为2×lO8 cfu/ml时,胆固醇降解率达高,为37.30％.结论 植物乳杆菌M1-UVs29具有稳定的降解胆固醇的能力,本实验为其进一步应用提供了参考.
-
植物乳杆菌中胆盐水解酶基因的原核表达及纯化
目的 克隆植物乳杆菌中胆盐水解酶(BSH)基因,原核表达并纯化重组蛋白.方法 利用PCR技术扩增植物乳杆菌BSH基因,克隆至表达载体pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行纯化及Western blot鉴定.结果 重组表达质粒pET-30a-BSH经双酶切鉴定,可见961 bp的目的 基因条带.表达的重组蛋白相对分子质量约为40 000(含6个His标签),主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的43%,纯化后,纯度达90%以上,且可与植物乳杆菌多克隆抗血清发生特异性反应.结论 已成功克隆了植物乳杆菌中BSH基因,并在大肠杆菌中获得高效表达.纯化的重组蛋白纯度较高,为高效降解胆固醇的基因工程菌株的研究奠定了基础.
-
植物乳杆菌真空干燥保护剂配方的优化
目的:采用响应面法对植物乳杆菌真空干燥保护剂配方进行优化.方法:在单因素试验的基础上,利用响应面法(Response surface method,RSM)中的中心复合设计(Central composite design,CCD)进行试验,通过试验数据拟合得到二阶响应面模型,终确定优实验条件及佳保护剂配比.检测以优化的保护剂配方制备的菌粉的稳定性.结果:优化的保护剂配方为:甘油3.59％,Vc1％,谷氨酸钠2％,L半胱氨酸0.5％,海藻糖15％,蔗糖5％,脱脂乳粉42.82％,玉米淀粉15％,玉米面15％.用此配方保护剂真空干燥样品时,可使菌体存活率达52.86％,与理论预测值(54.18％)较接近.以优化的保护剂配方制备的菌粉于4℃条件下保存12个月,仍有107 cfu/g的活菌量.结论:已优化了植物乳杆菌真空干燥保护剂配方,对植物乳杆菌的应用、活菌产品的质量稳定及新产品的研发均有一定的指导意义.
