CD22分子机制的研究进展

CD22为Ⅰ型跨膜糖蛋白，是唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素家族成员。作为 B 细胞受体（BCR）的抑制性共受体，CD22对B细胞激活信号具有负性调节作用。 CD22能够与包含α－2，6连接唾液酸的糖蛋白配体特异性结合，抗原激活BCR，也使CD22胞质区免疫受体酪氨酸抑制基序中的酪氨酸迅速磷酸化，并激活下游信号分子抑制钙离子内流而减弱 BCR信号。 CD22参与 B 细胞的归巢过程。因CD22相对特异地表达于B细胞表面，已成为调节 B细胞免疫及治疗某些 B 细胞肿瘤的良好靶标。

免疫组库测序在淋巴血液系统肿瘤诊断及疗效预测中的应用价值

免疫组库是指在任何指定的时间,个体循环系统中所有功能多样性的T细胞和B细胞的总和,其具体特征反映了机体免疫系统对抗各种抗原和预防疾病发生的能力.近年来,多重聚合酶链式反应和高通量测序技术的发展再次推动了研究者对免疫组库的深入研究.通过对免疫组库测序可以早期发现急性白血病缓解后的微小残留病灶,发现疾病特异的免疫球蛋白重链(IgH)重排;在新药的临床试验中,通过对免疫组库高通量测序可以发现预测药物疗效的免疫组库变化,如免疫组库多样性的增减、特异克隆型的出现或消失等;在造血干细胞移植后机体免疫重建过程中,临床医生也可以通过监测免疫组库而及时准确地了解患者免疫功能的恢复情况.本文就免疫组库测序在淋巴血液系统肿瘤的诊断及疗效预测中的应用情况进行综述.

依鲁替尼对伯基特淋巴瘤细胞生长抑制及诱导凋亡的作用及机制研究

目的：研究依鲁替尼（ibrutinib）在体外对伯基特淋巴瘤细胞株Namawal的作用，探讨其可能的分子机制。方法：应用CCK8法，细胞周期分析法检测依鲁替尼作用于Namawal细胞株后，对其增殖、细胞周期等细胞生物学的影响；应用免疫荧光电镜观察药物作用该细胞株后48H细胞核变化；应用免疫印迹法检测ibrutinib作用于Namaw－al后BTK信号通路相关蛋白的变化。结果：经依鲁替尼处理后的Namawal细胞增殖受到明显抑制；依鲁替尼下调BTK信号通路上相关蛋白活性。结论：依鲁替尼通过抑制p-BTK活性抑制细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，是治疗Burkitt淋巴瘤的潜在新药。

B细胞受体核心岩藻糖基化调节成熟B细胞的信号转导

目的 探讨核心岩藻糖基转移酶(Fut8)对成熟B细胞信号转导的影响.方法 利用Fut8-siRNA逆转录病毒载体建立Fut8基因沉默成熟B细胞株(3-83-KD细胞),并将PLHCX-Fut8质粒导入3-83-KD细胞建立Fut8基因恢复成熟B细胞株(3-83-KD-Re).用Real time-PCR、Western blot和HPLC法检测Fut8 mRNA、蛋白表达和Fut8酶活性,流式细胞仪和凝集素免疫印迹检测BCR的表达量和核心岩藻糖基化水平,Western blot技术检测细胞内酪氨酸磷酸化水平.结果 与3-83细胞相比,3-83-KD细胞的BCR核心岩藻糖基化水平明显下降,而3-83-KD-Re细胞其表达得到恢复.Fut8基因沉默使3-83-KD细胞BCR介导的信号传导明显减弱,而3-83-KD-Re细胞的信号传导恢复正常.结论 Fut8修饰的核心岩藻糖基化在BCR介导的细胞信号转导过程中发挥重要的调节作用.

BCR信号途径在B细胞肿瘤中的作用及靶向药物研究

高通量测序对原发性胆汁性胆管炎患者个体水平外周血B细胞受体免疫球蛋白重链互补决定区3免疫组库特征的初步研究

目的 分析原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者个体水平外周血B细胞受体免疫球蛋白重链互补决定区3 (IGH-CDR3)免疫组库特征,了解其免疫系统多样性的特点. 方法 采用扩增子救援多重PCR (arm-PCR)技术特异性扩增一例PBC患者外周血B细胞受体,即膜表面免疫球蛋白重链IGH-CDR3区核苷酸序列,通过第二代高通量测序技术进行测序,结合生物信息学分析其免疫组库特征. 结果 共测得序列数329 219个,总CDR3序列为325 540个,独特CDR3序列为72 774个,D50为7.7;IGH-CDR3区长度主要为45个核苷酸(nt)(9.6％),N区添加的核苷酸数量频率高的为13 ～ 14 nt (5.25％),J基因片段末端去除的核苷酸数主要是0(12.7％);V基因使用频率高的前3个等位基因是V4-59(9.5％),其次为V3-23(8.1％)和V1-69(6.4％).结论 该PBC患者IGH-CDR3免疫组库多样性程度较低,存在个别克隆异常增殖情况,该特异性有待扩大样本量进一步验证.

BCR组库分析乙肝疫苗接种反应及初步机理分析

目的 接种乙肝疫苗是控制乙肝流行经济有效的方法,通过对3次乙肝注射疫苗前后的B细胞库进行高通量测序分析,探讨注射乙肝疫苗后体液免疫的动态过程.方法 将志愿者接种乙肝疫苗前后的外周血样进行密度梯度离心获得淋巴细胞并提取RNA,逆转录为cDNA后对B细胞受体H链的CDR3区序列进行高通量测序,以揭示注射乙肝疫苗前后B细胞应答的变化,分析人外周血B细胞受体CDR3的多样性以及序列变化与疫苗应答之间的关系.结果 志愿者外周血B细胞受体CDR3的种类和数量在接种疫苗后都有所降低,并表现出其特有的免疫学特征,包括高频取用的V、D、J家族、V-J家族配对发生了改变,CDR3区氨基酸的取用和长度分布也发生显著变化;并且接种疫苗后,志愿者外周血中存在某些寡克隆异常增殖的情况.结论 大部分志愿者在接种疫苗后,B细胞受体组库的多样性等发生特征性改变,并且出现某些疫苗接种相关的寡克隆.B细胞受体高通量测序技术可以从克隆水平上监控乙肝疫苗接种后抗体产生和表达的动态变化过程.

关键分子SYK和BTK活性的动态调节控制B细胞受体信号转导过程

目的 建立B细胞受体信号途径的动力学模型,通过模型仿真揭示B细胞受体信号途径各分子间的动态调控过程.方法 根据数据库KEGG及相关中英文文献,提取B细胞受体信号转导各条通路相关分子作用的方式及数量关系,利用Matlab7.0的Simulink工具箱构建信号途径的动力学模型并仿真.结果 模型仿真结果能够从数量上反映B细胞受体信号途径中各分子间复杂的调控关系,并能通过模型仿真发现和验证该信号途径中的关键分子.结论 关键分子SYK和BTK活性的动态调节机制控制着B细胞受体信号途径的动力学过程.

典型模式B细胞受体在慢性淋巴细胞白血病中的研究进展:第54届美国血液学会年会报道

B细胞受体在慢性淋巴细胞白血病的发病机制中发挥着重要作用.独特的B细胞受体亚群表现出独特的生物学特征,在与微环境的相互作用中导致不同克隆亚群和不同预后亚群的形成.